徐 博 安 英 沈 楠 赵丽晶 陈 雪 吴畏难 陈建光

阿尔茨海默病病理机制复杂，更缺乏有效的治疗措施已成为老年人致残最严重的疾病之一，并且随着人口的老龄化，患者日益增多，将给家庭和社会带来沉重的负担[1]。因此对老年性痴呆药物的寻求和研究是当前医学界的一个紧迫问题。学习记忆的“痕迹论”表明，记忆获得、巩固、再现组成了记忆的全过程[2]。本文应用亚硝酸钠造成小鼠记忆巩固障碍，从而观察北五味子醇提物（Schisandra Chinensis baill extract,SCE）对记忆障碍的改善作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料实验所用动物为 60只清洁级健康昆明种小白鼠，雌雄兼用，体重（20±2）g，实验动物许可证号为SCXK-（吉）2003～2004，由长春高新医学动物实验研究中心提供；实验所用试剂分别为 SCE（北华大学林学院）；亚硝酸钠，长春市试剂厂，批号：930220；脑复康，天津金世制药有限公司，批号：20060661；超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒，南京建成生物工程研究所批号：20080417；丙二醛（MDA）含量测定试剂盒，南京建成生物工程研究所批号：20080417；实验所用仪器为小鼠避暗测试仪（成都泰盟科技有限公司）。

1.2 实验方法

1.2.1 动物分组、造模及给药[3-4]将筛选的昆明种小鼠60只，雌雄各半，随机均分成6组，对照组、模型组、脑复康组、SCE低剂量组、SCE中剂量组、SCE高剂量组。对照组与模型组给予蒸馏水灌胃，脑复康组给予脑复康0.3g/kg·d，SCE低、中、高剂量分别给予SCE 0.15g/kg、0.30g/kg、0.60g/kg连续灌胃给药（每只小鼠按0.1ml/10g灌胃）15d。在第15天灌胃给药1h后，进行避暗实验。将小鼠面部背向洞口放入明室，适应环境5min，然后立即通以36V交流电，打开隔板，小鼠穿过洞口进入暗室受到电击，记时自动停止。取出小鼠，记录小鼠从放入明室至进入暗室遇到电击所需时间，即潜伏期。实验完毕除空白对照组外，其余各组立即皮下注射（sc）亚硝酸钠120mg/kg，即破坏记忆的巩固，对照组注射同体积的生理盐水。在第16天重做测试，记录小鼠从放入明室至进入暗室遇到电击所需时间即潜伏期和5min内受电击次数。

1.2.2 样本取材及测定实验第18天称重，快速剥离脑组织，用电子天平称脑组织湿重后用锡箔纸包好，置-80℃低温冰箱保存，待测各种生化指标。测定时，按重量:体积=1:9的比例加入预冷的生理盐水，用组织匀浆机充分匀浆，制成10%的脑组织匀浆，用微量移液器转移至离心管中，3000r/min离心10min。测定时取上清液进行超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量的测定。

1.3 统计学处理本文中数据均以均数±标准差（±s）表示，经SPSS 13.0统计学软件单因素方差分析（One-way ANOVA）中的Dunnett's Test处理。

2 结果

实验结果如表1～3所示。

3 讨论

实验表明，在第二次记忆测试中，SCE中、高剂量组较模型组潜伏期延长，错误次数减少，表明SCE可以改善记忆巩固障碍模型小鼠的记忆能力。SCE可增高抗氧化酶 SOD的活力，抑制脂质过氧化产物MDA的增多，从而减少氧自由基的损伤，加速体内自由基的清除，并且随着 SCE剂量的增加，此种变化越明显，且中药SCE中、高剂量组抗氧化作用明显高于低剂量组。提示，SCE具有清除自由基，延缓细胞老化，抑制细胞退化和变性，改善机体的结构和功能，提高机体生命力的作用。

近年自由基学说与AD的关系越来越引起学者的关注，被认为是AD的一个重要致病因素，而且大量实验也证明抗氧化剂对AD的发病有保护和延缓进程的作用[5]。SOD对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用，此酶能清除超氧阴离子自由基，保护细胞免受损伤。MDA是氧自由基与生物膜多聚不饱和脂肪酸发生脂质过氧化的产物，其产生量与氧自由基的量相平行，因而测定MDA能反映氧自由基的水平，间接反映出细胞损伤的程度。MDA的测定常常与SOD的测定相互配合，SOD活力的高低间接反应了机体清楚氧自由基的能力，而MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度。

本实验为临床前期研究 SCE药物治疗老年痴呆症、改善学习和记忆功能提供了有价值的实验数据，但要获得更有价值的治疗药物，还需要做大量艰苦工作。相信随着时间的推移和对SCE改善学习记忆、防治衰老和老年痴呆症的研究进一步深入，SCE相关药物及其保健产品的研发将会取得突破。

表1 SCE对亚硝酸钠所致记忆巩固障碍模型小鼠记忆能力的影响(避暗法)[(±s),n=10]

表1 SCE对亚硝酸钠所致记忆巩固障碍模型小鼠记忆能力的影响(避暗法)[(±s),n=10]

注：与对照组比较#P＜0.05，##P＜0.01；与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01

分组 动物数 潜伏期(s) 错误次数(n)对照组 10 125.68±30.08 3.50±1.29模型组 10 49.35±32.88## 7.83±1.72##脑复康组 10 99.71±21.95** 3.43±1.40**SCE低剂量组 10 75.59±33.55 6.00±1.51 SCE中剂量组 10 88.38±28.83* 5.00±1.41**SCE高剂量组 10 104.31±30.09** 3.57±2.37**

表2 SCE对亚硝酸钠所致记忆巩固障碍模型小鼠脑组织SOD活性的影响[(±s),n=10]

表2 SCE对亚硝酸钠所致记忆巩固障碍模型小鼠脑组织SOD活性的影响[(±s),n=10]

注：与对照组比较#P＜0.05，##P＜0.01；与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01

分组 动物数 SOD(U/mgprot)对照组 10 78.97±10.50模型组 10 44.08±13.72##脑复康组 10 63.90±9.00**SCE低剂量组 10 49.70±7.56 SCE中剂量组 10 58.79±10.07*SCE高剂量组 10 78.24±15.55**

表3 SCE对亚硝酸钠所致记忆巩固障碍模型小鼠脑组织MDA含量的影响[(±s),n=10]

表3 SCE对亚硝酸钠所致记忆巩固障碍模型小鼠脑组织MDA含量的影响[(±s),n=10]

注：与对照组比较#P＜0.05，##P＜0.01；与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01

分组 动物数 MDA(nmol/mgprot)对照组 10 29.93±10.91模型组 10 74.24±29.89##脑复康组 10 32.60±26.38*SCE低剂量组 10 49.21±24.97 SCE中剂量组 10 36.77±25.16*SCE高剂量组 10 30.82±12.52**

[1]赵丽波,付宏娟,张健莉.阿尔茨海默病发生机制的研究进展[J].中国老年学杂志,2011,31(24):4997-4998.

[2]林途春,闰也.阿尔茨海默病发病机制研究的现状与进展[J].辽宁医学院学报,2009,30(6):558-560.

[3]邹宇晓,廖森泰,吴娱明,等.金针菇多糖提取物对记忆障碍模型大鼠、小鼠学习记忆能力的影响[J].中国食品学报,2010,10(1):26-29.

[4]罗建,王晔,程薇波.磷脂酰胆碱对小鼠记忆障碍模型的影响[J].现代预防医学,2011,38(3):446-448.

[5]林玉坤,曾园山,屈泽强,等.氧化应激与阿尔茨海默病[J].解剖学研究,2009,31(1):67-70.