水貂大肠杆菌病的诊断与防治

2013-01-26张贵贤史秋梅

中国兽医杂志 2013年2期

张贵贤，史秋梅

（1．河北省昌黎县动物疫病预防控制中心，河北昌黎066600；2．河北科技师范学院动科院，河北昌黎066600）

2011年7月，秦皇岛市昌黎县刘台庄某养殖户饲养的500只水貂发生了一种以腹泻、便血为特征的急性病例。饲养员曾采用庆大霉素肌肉注射，新霉素饮水，百毒杀消毒等措施，但收效甚微，不能控制病情发展，3d内死亡水貂53只。该貂群通过临床诊断和实验室检验等手段，确诊为大肠杆菌感染引发的水貂出血性肠炎，并采取有效措施控制了病情，诊治情况报告如下。

1 临床症状及病理变化

该病发生于断奶前后的幼貂、1～2月龄的仔貂，成年貂及老年貂很少发病。病貂体温不高，腹泻，呕吐，排出水样粪便，有的水貂见有血便，有的吐血后死亡，病貂粪中有长短不一的黏膜组织。出现症状后一般1～3d死亡，有的4～6d死亡。对死亡的水貂进行尸体剖检，主要病变在消化道。胃黏膜有出血点或出血斑，胃肠内充满棕色黏液，腹水增多，肠道臌气明显，肠黏膜脱落不全，肠壁菲薄，充满气体，盲肠内有大量血块，直肠黏膜出血。肠系膜淋巴结肿胀、出血；颌下淋巴结肿胀，肝脏呈土黄色、质脆易碎，有坏死灶；脾脏轻微肿胀；心肌呈淡红色，心内膜有点状或带状出血；肺脏表面大量出血；膀胱积尿。

2 实验室诊断

2．1 细菌分离培养无菌取新鲜病死水貂肝脏、脾脏、心血、肺脏分别进行直接涂片，革兰染色、镜检，均见有数量不等的革兰阴性单个、成双的中等大小杆菌。无菌取上述病料接种普通琼脂，37℃培养24 h，在麦康凯琼脂上见到生长良好、光滑、边缘整齐、均匀粉红色、不透明的菌落；伊红美蓝琼脂上为黑色有金属光泽的菌落；血琼脂培养基产生溶血环。镜检均为革兰阴性菌，两端钝圆的小杆菌，疑似大肠杆菌。

2．2 生化鉴定将细菌纯培养物，分别接种于各种微量发酵管中，37℃培养48h，结果该菌能发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖、蕈糖、果糖、蜜二糖和棉子糖产酸产气，甘露醇、木胶和阿拉伯胶产酸产气；山梨醇出现迟缓发酵，不发酵卫矛醇、侧金盏花醇、赖氨基酸和水杨素；不利用柠檬酸盐和尿素；甲基红、吲哚、ONPG、氧化酶试验阳性；石蕊牛乳试验红色；V－P试验、明胶液化试验阴性；TSI反应模式为：斜面产酸／底层产酸产气，不产生H2S。

2．3 动物接种试验选用10只健康小鼠做动物试验，分为2组，每组5只。第1组用分离菌24h肉汤培养物，腹腔注射，每只0．2mL；第2组每只小鼠，腹腔注射0．2mL生理盐水。结果第1组小鼠24h后出现精神沉郁，腹式呼吸，有的口腔出血，24～72h全部死亡。剖检见到小肠黏膜岀血，肠系膜血管充血；肝脏充血、出血、肿大；心肌弛缓，冠状沟周围有出血点；有的脾脏肿大，有散在的出血；肾脏皮质有出血点或出血斑。用肝脏和心血等涂片镜检及接种普通琼脂分离培养，结果所得细菌与2．1和2．2所述形态和生化特性相同。第2组全部正常，无一发病。

通过以上综合诊断，确诊为大肠杆菌病。

2．4 血清型鉴定将细菌的纯培养物接种于普通琼脂斜面上，37℃培养12h，用灭菌的石炭酸生理盐水2mL反复冲洗普通杆菌的O抗原。取10mL待检的抗原滴于载玻片上与已知的标准血清混合，同时取10mL石炭酸生理盐水与抗原琼脂斜面，使细菌溶于其中。把斜面里的石炭酸生理盐水倾倒于小试管中，121℃2h高压灭菌，制成大肠混合作为对照，3min内观察有无凝集现象。结果显示，该菌的血清型为O23。

2．5 药敏试验选5种常用抗菌药，用常规纸片法对分离的绿脓杆菌进行药物敏感试验，结果其对头孢拉啶、头孢噻肟、左氧氟沙星、环丙沙星高度敏感；对庆大霉素、阿米卡星中度敏感；对新霉素等表现出一定程度的耐荮性。

3 治疗措施

首先将发病水貂进行隔离，对食槽及饮水槽用5%漂白粉彻底清洗消毒，笼舍、粪便等用5%热火碱进行喷雾消毒；粪、尿等排泄物及时进行无害化处理。病貂与假定健康貂隔离饲养，对病死貂扒皮后焚烧、深埋。调整饲料，选用新鲜、适口性好，易消化、营养全价的饲料。根据分离菌及药敏情况进行治疗。对已发病的貂选用敏感药物头孢拉定，肌肉注射，每日2次；另外用左氧氟沙星拌料饲喂。治疗3d，病情得到了控制，病貂基本痊愈。