李光州，陈晓珍，Mishig Dumaa，4，易进海，张国林，罗应刚*

1成都中医药大学药学院，成都611137;2 中国科学院成都生物研究所，成都610041;3四川省中医药科学院药物化学研究所，成都610041;4Institute of Chemistry and Chemical Technology of the Mongolian Academy of Sciences，Ulaanbaatar 210351，Mongolia

唇形科兔唇花属植物主要分布于伊朗、阿富汗、蒙古、俄罗斯和我国的内蒙古、宁夏、甘肃、陕西和新疆等地，全球约有30 种，大部分物种在我国均有分布［1］。该属植物具有多种生物活性，主要用于治疗各种出血、冠心病、心绞痛及溃疡病等［2-5］。前苏联科学家对该属植物的化学成分进行了深入研究，从中主要分离得到了二萜类、黄酮类、香豆素类、环烯醚萜苷类和多糖等［5-15］。

冬青叶兔唇花(Lagochilus ilicifolius)是唇形科兔唇花属多年生植物，多生于海拔830～2000 m 的沙地及缓坡半荒漠灌丛中，主要分布于蒙古和我国的内蒙古，宁夏，甘肃，陕西北部等地［1］。但是，国内外还没有冬青叶兔唇花化学成分研究的报道。为了明确该植物的化学成分，我们采用GC-MS 联用技术对冬青叶兔唇花地上部分的非极性成分进行了分析，并利用峰面积归一化法确定各成分的相对含量。我们从冬青叶兔唇花地上部分的非极性成分中分离、鉴定了52 种成分，占非极性成分总量的92.61%，主要包括脂肪酸酯、长链烷烃、单萜、倍半萜、甾体及芳香化合物等。

1 材料、仪器与方法

1.1 实验材料

冬青叶兔唇花(L. ilicifolius)地上部分于2009年7 月采自蒙古科布多省，由蒙古科学院植物研究所Ch.Sanchir 教授鉴定，凭证标本保存于蒙古科学院化学与化学工艺研究所天然产物化学实验室。95%乙醇、石油醚、乙酸乙酯(工业纯，成都科龙化工试剂厂)，后两种溶剂在使用前均通过重蒸处理;氯仿(分析纯，重庆吉元化学有限公司)。

1.2 实验仪器

GC(Focus)-MS(Polaris Q)气相色谱-质谱联用仪(美国Thermo Scientific 公司);Buchi RE-121 型旋转蒸发仪(瑞士Buchi 公司)。

1.3 实验方法

1.3.1 样品的制备

冬青叶兔唇花地上部分(3.5 kg)经自然风干、粉碎，用95%乙醇室温下浸提三次(30 L × 10 天/次)，合并提取液，减压回收乙醇得总浸膏480 g。利用硅胶(200～300 mesh)对总浸膏进行柱层析分离，洗脱液为石油醚-乙酸乙酯(100∶0，20∶1，10∶1，5∶1;各6 L)，TLC 分析、收集，将其中0～8 L 洗脱液的溶剂回收得棕褐色油状样品(10. 499 g，得率0.3%)——冬青叶兔唇花地上部分的非极性成分。该油状物经少量氯仿溶解后转移至100 mL 容量瓶中，定容至刻度，摇匀，作为GC-MS 供试品溶液。

1.3.2 GC-MS 分析条件

气相色谱条件:色谱柱为ThermoTR-5ms SQC毛细管柱(30 m×0.25 mm i.d.);程序升温条件:初始温度80 ℃(保留4 min)，以3 ℃/min 升温至300℃，保持10 min;载气为高纯He(99.999%)，载气流量1 mL/min;进样口温度260 ℃;不分流进样，进样量1 μL。

质谱条件:离子源为EI 源;离子源温度250 ℃;电子能量70 eV;倍增器电压1688 V;质量范围100～650 amu。数据处理及质谱检索:通过Xcalibur 工作站，结合NIST2008 标准质谱图库进行检索，采用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。

2 结果与讨论

按上述实验条件进行GC-MS 联用分析，获得了冬青叶兔唇花地上部分非极性成分的总离子流图(图1)，以峰面积归一法确定其中各成分的相对百分含量。所得质谱信息经计算机以NIST2008 标准质谱图数据库检索结合人工谱图解析并查对相关资料对基峰、质荷比和相对丰度等方面进行直观比较、分析和鉴定［16］，结果见表1。

图1 冬青叶兔唇花地上部分非极性性成分总离子流图Fig.1 TLC of the nonpolar constituents of the aerial parts of L.ilicifolius

表1 冬青叶兔唇花地上部分非极性成分Table 1 Nonpolar constituents of the aerial parts of L.ilicifolius

3 8.76 Benzene，1-methyl-2-(1-methylethyl)-1-甲基-2［1-甲基乙基］苯 923 C10H14 134 0.03 4 18.77 β-Cubebeneβ-荜澄茄油烯 778 C15H24 204 0.31 5 19.13 Thujopsene 罗汉柏烯 740 C15H24 204 0.30 6 19.90 Ylangene 衣兰烯 788 C15H24 204 0.55 7 20.52 Naphthalene，1，2，3，4，4a，7-hexahydro-1，6-dimethyl-4-(1-methylethyl)-1，2，3，4，4a，7-六氢-1，6-二甲基-4-(1-甲基乙基)萘 790 C15H24 204 0.17 8 20.91 Naphthalene，1，2，3，4，4a，5，6，8a-octahydro-7-methyl-4-methylene-1-(1-methylethyl)-，(1α，4aβ，8aα)-(1α，4aβ，8aα)-1，2，3，4，4a，5，6，8a-八氢-7-甲基-4-亚甲基-1-(1-甲基乙基)萘775 C15H24 204 0.20 9 21.31 (–)-Aristolene 马兜铃烯 811 C15H24 204 0.25 10 21.83 2，5-Octadecadiynoic acid，methyl ester2，5-十八碳二炔酸甲酯 788 C19H30O2 290 0.05 11 23.11 (+)-Cuparene(+)-花侧柏烯 801 C15H22 202 3.70 12 23.28 β-Iononeβ-紫罗酮 720 C13H20O 192 1.34 13 24.28 Naphthalene，1，2，4a，5，6，8a-hexahydro-4，7-dimethyl-1-(1-methylethyl)-，(1α，4aα，8aα)-(1α，4aα，8aα)-1，2，4a，5，6，8a-六氢-4，7-二甲基-1-(1-甲基乙基)萘781 C15H24 204 0.36 14 25.16 2(4H)-Benzofuranone，5，6，7，7a-tetrahydro-4，4，7a-trimethyl-，(R)-(R)-5，6，7，7a-四氢-4，7，7a-三甲基-2-(4H)-苯并呋喃酮 841 C11H16O2 180 0.73 15 25.41 Cadala-1(10)，3，8-triene1(10)，3，8-杜松三烯 739 C15H22 202 0.14 16 26.20 Naphthalene，1，2-dihydro-1，5，8-trimethyl1，2-二氢-1，5，8-三甲基萘 691 C13H16 172 0.03 17 28.69 Falcarinol 镰叶芹醇 717 C17H24O 244 0.04 18 29.00 Benzene，1-methyl-4-(2-propenyl)-1-甲基-4-(2-丙烯基)苯 888 C10H12 132 0.60 19 29.92 Benzene，4-ethenyl-1，2-dimethyl-1，2-二甲基-4-乙烯基苯 886 C10H12 132 0.59 20 30.39 Azulene，1，4-dimethyl-7-(1-methylethyl)-1，4-二甲基-7-(1-甲基乙基)-甘菊环 602 C15H18 198 0.14 21 30.87 β-Vatireneneβ-朱栾 812 C15H22 202 2.01 22 32.49 cis-Z-α-Bisabolene epoxidcis-Z-α-红没药烯氧化物 779 C15H22O 218 0.09 23 33.48 β-Elemeneβ-榄香烯 719 C15H24 204 0.01 24 36.82 Alloaromadendrene oxide-(1)别香橙烯氧化物-(1) 762 C15H24O 220 0.08 25 37.37 Icosapent 二十碳五烯酸 767 C20H30O2 302 0.02 26 40.049，12-Octadecadienoic acid，methyl ester9，12-十八碳二烯酸甲酯(亚油酸甲酯) 769 C19H34O 294 1.12 27 40.28 10，12-Octadecadienoic acid10，12-十八碳二烯酸 808 C18H34 250 0.11 28 41.49 Hexadecanoic acid，methyl ester 棕榈酸甲酯 626 C17H34O2 270 44.92 20 44.12 Octadecanoic acid，methyl ester 十八碳酸甲酯 743 C19H38O2 298 0.67 30 45.75 Cholestan-3-ol，2-methylene-，(3a，5a)-(3a，5a)-3-羟基-2-亚甲基胆甾烷 752 C28H48O 400 0.05 31 46.24 2，3-Dihydroxypropyl elaidate2，3-二羟丙基反油酸丙酯 754 C21H40O4 356 0.54 32 46.42 9，12，15-Octadecatrienoic acid，2，3-dihydroxypropyl ester，(Z，Z，Z)-(Z，Z，Z)-9，12，15-十八碳三烯酸-2，3-二羟丙基酯 731 C21H36O4 352 0.22 33 47.19 Nonadecanoic acid，methyl ester 十九碳酸甲酯 725 C20H40O2 312 7.18 34 49.82 Eicosanoic acid，methyl ester 二十碳酸甲酯 721 C21H42O2 326 0.14 35 52.60 Heneicosanoic acid，methyl ester 二十一碳酸甲酯 715 C22H44O2 340 2.50 36 53.24 Phenol，2，2'-methylenebis［6-(1，1-dimethylethyl)-4-methyl-2，2'-亚甲基-双(4-甲基-6-叔丁基)苯酚 853 C23H32O2 340 0.28 37 55.24 Octacosane 二十八烷 843 C28H58 394 0.58 38 56.02 Docosanoic acid，methyl ester 二十二碳酸甲酯 765 C23H46O2 354 0.65 39 56.43 1，2-Benzenedicarboxylic acid，diisooctyl ester 邻苯二甲酸二异辛酯 896 C24H38O4 390 0.17 40 57.71 Tricosanoic acid，methyl ester 二十三碳酸甲酯 721 C24H48O2 368 2.84 41 59.63 1-Heptatriacotanol 三十七醇 718 C37H76O 536 0.02

42 60.28 Hentriacontane 三十一烷 43 60.92 Tetracosanoic acid，methyl ester 二十四碳酸甲酯44 62.51 Pentacosanoic acid，methyl ester 二十五碳酸甲酯45 65.16 Tetratetracontane 四十四烷 46 65.52 Hexacosanoic acid，methyl ester 二十六碳酸甲酯47 66.91 Heptacosanoic acid，methyl ester 二十七碳酸甲酯48 68.30 5，8，11-Heptadecatriynoic acid，methyl ester5，8，11-十七碳-870 C31H64 436 1.78 742 C25H50O2 382 0.69 712 C26H52O2 396 4.21 831 C44H90 617 7.54 714 C27H54O2 410 0.05 746 C28H56O2 424 0.97三炔酸甲酯 726 C18H24O2 272 0.44 49 69.12 Hexatriacontane 三十六烷 824 C36H74 506 1.63 50 69.70 Vitamin E 维生素E 667 C29H50O2 430 0.01 51 73.31 β-Sitosterolβ-谷甾醇 691 C29H50O 414 0.03 52 75.10 Stigmasta-3，5-dien-7-one 豆甾-3，5-二烯-7-酮 736 C29H46O 410 0.27

从冬青叶兔唇花地上部分非极性成分中分离、鉴定了52 个化合物，占色谱峰总面积的92.61%。GC-MS 分析表明，冬青叶兔唇花地上部分非极性成分种类丰富，其主要成分包括脂肪酸酯类、长链烷烃、倍半萜等，其相对百分含量分别达到了67.19%、11.53%、7.44%;其中含量最高的为棕榈酸甲酯，占44.92%;其次为四十四烷(7.54%)、十九碳酸甲酯(7.18%)、二十五碳酸甲酯(4.21%)、(+ )-花 侧 柏 烯(3. 70%)、二 十 三 碳 酸 甲 酯(2.84%)、β-朱栾(2.01%)，同时还有较多的三十一烷(1.78%)、三十六烷(1.63%)、β-紫罗酮(1.34%)、亚油酸甲酯(1.12%)等。我们利用GC-MS 联用技术首次对冬青叶兔唇花地上部分的非极性成分进行了分析，并利用峰面积归一化法测定了各成分的相对含量，一方面丰富了兔唇花属植物的化学成分，另外对改属植物资源的合理开发应用提供了参考。

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