卢明挺，章志坚

（1.浙江省台州市黄岩区院桥中心卫生院外科，浙江台州318025；2.浙江省台州市第一人民医院肛肠外科，浙江台州318020）

直肠癌患者手术前后血清VEGF表达及与远期预后的相关关系

卢明挺1，章志坚2

（1.浙江省台州市黄岩区院桥中心卫生院外科，浙江台州318025；2.浙江省台州市第一人民医院肛肠外科，浙江台州318020）

目的分析直肠癌患者手术前后血清血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表达及与远期预后的相关关系。方法采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法检测患者手术前后血清VEGF的浓度，分析与临床指征的关系。所有患者至少随访3年，采用KaPlan-Meier分析3年生存率。结果VEGF的表达对照组为（107.4±18.3）mg/L，直肠癌组术前为（382.7±83.6）mg/L，术后为（257.4±76.4）mg/L。直肠癌组术前和术后血清VEGF明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），直肠癌组术后血清VEGF明显低于术前，差异有统计学意义（P＜0.05）。术前和术后血清VEGF表达在Duckes分期、浸润情况、淋巴结转移和肿瘤大小等程度的差异均有统计学意义（P＜0.05）。将VEGF平均值257.4mg/L作为划分VEGF水平高低的分界值，术前低、高表达的3年生存率为分别为90.9%（10/11）和78.9%（15/19），差异有统计学意义（P＜0.05）。术后低、高表达的3年生存率为分别为85.7%（12/14）和81.3%（13/16），差异无统计学意义（P＞0.05）。结论术前血清VEGF的检测对于直肠癌患者的远期预后具有重要意义，术后血清VEGF的检测对直肠癌患者的远期预后判断价值不如术前血清VEGF的检测。

直肠肿瘤；血管内皮生长因子A；预后

肿瘤的生成和转移依赖于新生血管，新生血管的生成为肿瘤提供必需的营养和氧气，同时又为脏器转移提供了通路，而肿瘤细胞又可分泌血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）等特异性分子，促进血管生成。目前传统的手术或者放化疗治疗只针对肿瘤细胞本身，忽略了血管，从而易引起肿瘤的复发和转移。VEGF是最强的促血管生长因子，目前有大量文献显示其在肿瘤组织中呈高表达状态，但研究多集中于术前检测，而对术前术后与远期预后的相关性报道较少，本文主要解决这一问题。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选择浙江省台州市第一人民医院2007年1—12月收治的直肠癌患者（直肠癌组）35例，均经过手术病理证实，病理类型均为腺癌。男性20例，女性15例，年龄38～84岁，中位年龄60岁。Duckes分期A期3例，B期13例，C期14例，D期5例；浸润黏膜层8例，肌层7例，浆膜层以外20例；有淋巴结转移21例，无淋巴结转移14例；肿瘤大小，＜5cm 22例，≥5cm 13例。另取同期体检的健康者30例作为对照组，男性18例，女性12例，年龄35～83岁，中位年龄58岁。2组患者性别、年龄等比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 VEGF检测：患者手术前1d和手术后5d抽取外周空腹静脉血2mL，常规离心分离血清，保存待检。VEGF检测采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法，试剂盒购于深圳晶美公司，酶标包被板、显色剂A液、标准品、显色剂B液、20倍浓缩洗涤液、终止液、标准品稀释液、说明书、样本稀释液、封板膜、酶标试剂和密封袋。取4块酶标包被板，设置为标准品孔、术前样本孔、术后样本孔和空白对照孔，于标准品孔中加入标准品50μL，术前和术后样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL，空白对照孔不加。37℃恒温箱温育30min，洗板。然后在除空白对照孔外的3个孔加入酶标工作液50μL，重复温育和洗板操作。每孔加入显色剂，取出酶标板，加如终止液，当颜色由蓝变黄终止反应。由空白对照孔校零，于450nm波长检测各孔吸光值，计算标准曲线的直线回归方程，并计算相应浓度。

1.3 统计学方法：应用SPSS12.0统计学软件包进行数据处理，计量资料以±s表示，组间比较采用t检验。生存曲线采用KaPlan-Meier分析，生存率比较采用Log rank检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 VEGF表达：对照组为（107.4±18.3）mg/L，直肠癌组术前为（382.7±83.6）mg/L，术后为（257.4±76.4）mg/L。直肠癌组术前与术后血清VEGF明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），直肠癌组术后血清VEGF明显低于术前，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 VEGF在各临床指征中的表达：直肠癌组术前与术后血清VEGF表达在Duckes分期、浸润情况、淋巴结转移和肿瘤大小等程度的差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 直肠癌组手术前后血清VEGF在各临床指征中的表达（±s，ρ/mg·L-1）

表1 直肠癌组手术前后血清VEGF在各临床指征中的表达（±s，ρ/mg·L-1）

*P＜0.05与术前比较（t检验）

临床指征例数血清VEGF术前术后Duckes 分期A、B16274.5±71.6223.2±46.2*C、D19489.5±98.0281.4±67.7*浸润情况黏膜层8284.4±62.6201.3±48.0*肌层7341.4±72.8251.3±69.6*浆膜层以外20406.7±77.1293.7±83.5*淋巴结转移有21422.1±101.5274.3±73.5*无14316.4±80.2226.6±78.4*肿瘤大小（L/cm）＜522415.3±89.4263.4±72.2*≥513327.4±88.5235.4±65.5*

2.3 远期预后：将术后血清VEGF平均值257.4mg/L作为划分高低VEGF水平的分界值，并观察术前术后以此为分界的3年生存情况。术前血清VEGF＜257.4mg/L和≥257.4mg/L的3年生存率为分别为90.9%（10/11）和78.9%（15/19），差异有统计学意义（P＜0.05）。术后血清VEGF＜257.4mg/L和≥257.4mg/L的3年生存率为分别为85.7%（12/14）和81.3%（13/16），差异无统计学意义（P＞0.05）。

3 讨 论

Folkman于1971年［1］首次提出“肿瘤的生长和转移依赖于新生血管的生成”假说，近几十年来，大量临床研究显示出了该学说的科学性，并因此产生了一类作用于新生血管的靶向药物。血管生成主要受激活因子和抑制因子的共同作用，当二者失衡，就会导致血管退化或生成。血管生成促进因子包含多种生物有效分子，其中VEGF是目前研究最多、作用最重要的一大类分子，包含7个成员，可在胚胎、炎症、组织缺血和肿瘤时促进血管生成。VEGF与肿瘤细胞的作用是相互的，一方面肿瘤细胞可以过度分泌VEGF，促进周围组织的血管生成，另一方面VEGF在促进血管生成后，可为肿瘤组织提供必需的生长物质，又为脏器转移提供了通路［2-3］。因此，VEGF在肿瘤的生长、发展和转移中起着重要作用。

本研究结果显示，术前血清VEGF在Duckes分期A、B期的表达水平低于C、D期，同样在浸润至浆膜层以外的表达高于黏膜层和肌层，有淋巴结转移和肿瘤大小≥5cm的VEGF表达也明显高于无淋巴结转移和肿瘤大小＜5cm的患者。证实VEGF表达与肿瘤生长、发展、浸润和转移有相关性。与文献报道相似［4］。

本研究患者均获得了3年随访，死亡5例。将术后血清VEGF平均值257.4mg/L作为划分高低VEGF水平的分界值，并观察术前术后以此为分界的3年生存情况。结果显示术前血清VEGF低、高表达的3年生存率为分别为90.9%和78.9%，术后血清VEGF低、高表达的3年生存率为分别为85.7%和81.3%。表明术前血清VEGF的检测对于直肠癌的远期预后具有判断价值。术后低表达的3年生存率虽高于高表达，但差异无统计学意义，造成这种现象的原因可能是由于样本偏小，尚不能据此得出科学的结论。因此，笔者认为术前血清VEGF的检测对于直肠癌患者的远期预后具有重要意义，术后血清VEGF的检测对直肠癌患者的远期预后判断价值不如术前血清VEGF的检测。

［1］FOLKMAN J.Tumor angiogenesis theraPeuitc imPlication［J］.N Engl J Med，1971，285（21）：1182-1186.

［2］陈中皓，王学志，徐铭，等.Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF及其受体Flt-1在结直肠癌中的表达及临床意义［J］.中国癌症杂志，2011，21（4）：290-293.

［3］陈琳，侯梅，吴琦，等.结直肠癌组织P53、ToPoⅡ、VEGF的表达及临床意义［J］.中国基层医药，2011，18（18）：2547-2548.

［4］赵增仁，张丽静，李芳，等.结直肠癌组织中VEGF、PINCH mRNA的表达变化及意义［J］.山东医药，2010，50（22）：19-21.

（本文编辑：刘斯静）

R735.37

B

1007-3205（2012）05-0562-02

2011-12-22；

2012-03-05

卢明挺（1971-），男，浙江台州人，浙江省台州市黄岩区院桥中心卫生院主治医师，从事普通外科疾病诊治研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2012.05.026