李晓鸾 孟文霞 张小平 王燕 刘艳梅 孙长春

结膜激发试验(CPT)是一种在人为严格控制下用少量可疑致敏物激发临床症状，以观察试验物与变应病相关性的方法，易于操作及观察。变态反应科近年来开展了大样本屋尘螨变应原结膜激发试验，进行了详细的观察，分析屋尘螨变应原结膜激发试验(CPT)的主要影响因素，为临床工作中客观评估屋尘螨变应原CPT结果提供依据。

1 资料与方法

1．1 一般资料 选择2008年1月至2009年12月在河北医科大学第一医院变态反应科就诊的符合变应性鼻炎、结膜炎和(或)支气管哮喘诊断的患者357例，其中男174例，女183例;年龄4～72岁，平均年龄(38±16)岁;所有患者均有病史以及皮肤点刺试验提示可疑对屋尘螨过敏。

1．2 方法

1．2．1 试验前期准备:试验避开患者急性发作期及饮酒后;试验前未进行免疫治疗;试验前2周未做过结膜激发试验;试验前停用眼部局部用药2周以上，停用全身用抗组胺药物1周及糖皮质激素类药物2周以上;遇有急性上呼吸道感染、变应性结膜炎以外的眼部疾患、佩戴角膜接触镜者待愈后2周进行结膜激发试验。

1．2．2 屋尘螨变应原 CPT:专业检查室，室温约20℃，患者进入室内休息10 min，取端坐位，检查并记录双眼基础情况，确定无急性结膜疾病，双眼结膜状况无明显差异后进行激发试验。以微量移液管取10 μl阴性对照液(由ALK公司提供除无屋尘螨变应原蛋白外所含成分与变应原试剂相同)于患者一眼中，随即另以微量移液管取10 μl变应原试剂(为ALK公司提供屋尘螨变应原试剂30 HEP/2 ml)于另一眼下结膜囊中。患者闭目头后仰30 s，于激发后5、10、15 min参照北京协和医院评估标准观察并记录。对照侧出现明显速发相反应或有迟发相反应者另作记录，不列入统计范围。

1．2．3 屋尘螨变应原特异性免疫球蛋白E(d1-sIgE)检测:采用Pharmacia公司Uni CAP系统-100型进行荧光酶联免疫法测定(所有试剂均为南京美瑞公司提供)，在Uni CAP系统-100型中自动完成。

1．3 观察及评价项目 所有入选者均进行屋尘螨变应原CPT，采用北京协和医院眼结膜激发试验评估标准分别记录为－、+、++、+++、++++，以++及以上为阳性。结膜激发试验操作由我科医师专人进行，结果观察记录由我科另一医师(第3方)进行双盲评判。

1．4 统计学分析 应用SPSS 13．0统计软件，计数资料采用χ2检验，相关性采用pearson相关分析，P ＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

357例患者，均有可疑屋尘螨过敏病史。屋尘螨变应原CPT结果阳性率为20．7%(74/357)，结合专业知识选择性别、年龄、累及器官、病程、受试季节等可能影响屋尘螨变应原CPT结果的因素，赋值采用pearson相关分析法进行分析，见表1、2。

表1 屋尘螨变应原结膜激发试验可疑影响因素的定义及赋值

3 讨论

变态反应性疾病已成为新世纪的流行病，发病率超过20%，且发病率呈逐年增高趋势，变态反应科学越来越受到重视。变态反应性疾病虽可以表现在不同器官发病，究其病因就是变态反应在局部的表现，正确的病因诊断是有效治疗的前提。激发试验是一种在人为严格控制下用少量可疑致敏物激发临床症状，以观察试验物与变应病相关性的方法。结膜激发试验能模拟自然发病状态，为诊断相关疾病提供了多时相、多角度观察机会，其敏感性、特异性及有效性已得到许多学者的共识［1－5］，但是目前国内缺乏规范化、客观化的操作以及评估的统一标准。

表2 各可疑影响因素与屋尘螨变应原CPT的pearson相关分析

CPT的本质就是模拟结膜接触变应原的自然状态，人为制造出由一定量变应原引起的变应性结膜炎的急性发作，是IgE介导的Ⅰ型变态反应。IgE主要由呼吸道、消化道和扁桃体部位的黏膜下浆细胞产生。IgE最明显的特性是亲细胞性，能牢固而持久地吸附在细胞表面，局部的肥大细胞和血液中的嗜碱细胞是IgE的靶细胞。人结膜上皮含有丰富的血管和许多特殊的炎症和免疫细胞，正常情况下结膜固有层每平方毫米含5 000～20 000个肥大细胞［5］，其中睑结膜高于球结膜。从本研究结果推断，由于IgE具有亲细胞性，结膜局部肥大细胞结合的特异性IgE与血清中游离特异性IgE存在相对平衡，就是说结膜局部肥大细胞结合的特异性IgE密度取决于血清特异性IgE水平，患者的性别、年龄、受累器官、病程、受试季节的差异在影响血清中游离特异性IgE水平的同时也影响结膜局部肥大细胞结合的特异性IgE密度。以此解释屋尘螨变应原CPT的结果与血清特异性IgE水平明显相关(P＜0．05)，以及本研究统计结果显示患者的性别、年龄、受累器官、病程、受试季节均与屋尘螨变应原CPT结果无相关(P＞0．05)，其中受累器官一项与我们先前资料的结果相符［6］，由此推断，结膜上皮肥大细胞上结合特异性IgE的情况只受血清特异性IgE水平的影响，不受性别、年龄、受累器官、病程、受试季节的差异的影响，判定屋尘螨变应原CPT结果时不需考虑这些因素的存在。

综上所述，我们认为屋尘螨变应原CPT不受患者的性别、年龄、受累器官、病程、受试季节的影响，判定屋尘螨变应原CPT结果时不需考虑这些因素的存在。

1 韩德民主编．变应性鼻炎．第1版．北京:人民卫生出版社，2007．197-203．

2 Bernstein IL，Li JT，Bernstein DI，et al．Allergy Diagnostic Testing:An updated practice parameter．Ann Allergy Asthma Immunol，2008，100:1-148．

3 Chelminska M，Niedoszytko M，Jassem E．Clinical value of conjunctival allergen challenge in diagnosing allergic conjunctivitis related to latex．J Allergy Clin Immunol，2007，20:207-208．

4 Garcla-Medina JJ，Garcla-Medina M，Zanon-Moreno VC，et al．Conjunctival provocation test for the diagnosis of ocular hypersensitivity to Chlorobutanol．Cornea，2007，26:94-97．

5 Mortemousque B，Fauquert JL，Chiambaretta F，et al．Conjunctival provocation test:practical recommendations for the diagnosis of allergic conjunctivitis．J Fr Ophtalmol，2006，29:837-846．

6 李晓鸾，孟文霞，王燕，等．屋尘螨变应原结膜激发试验在上、下气道变态反应性疾病的临床比较．河北医药，2010，32:663-664．