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3种临床常用梅毒检测方法的比较

2011-08-17李珍瑶龙华泉陈银仲

中国医药科学 2011年19期
关键词:螺旋体胶体金梅毒

李珍瑶 龙华泉 陈银仲

广东省江门市新会区人民医院检验科,广东江门 529100

梅毒(syphilis)属于一种性传播疾病,病原体为苍白密螺旋体(treponema pallidum,TP)苍白亚种,又称梅毒螺旋体,主要通过性接触直接传染,接吻、手术、哺乳、输血、接触污染物也可被传染。患梅毒的孕妇可通过胎盘感染胎儿,早期可致胎儿流产、早产,晚期感染的成活胎儿可患先天梅毒。近几年梅毒的检测阳性率有所增高,现在很多医院都将梅毒作为住院患者的常规检查项目,笔者所在医院这几年也加大了对门诊及体检中心的检查患者的宣传防治力度,很多体检患者都会进行梅毒的血清学检测,住院手术患者也开展了输血前全套检查,其中就包括梅毒的血清学检测,因此,如何找出一种灵敏性和特异性都高,同时操作快速简便的方法,是本研究的目的。

1 材料与方法

1.1 标本来源

2010年1月1 日~2010年12月31日期间笔者所在医院进行梅毒血清学试验的患者,包括住院患者、门诊患者,没有区分初诊患者及复查患者,也没有从临床上对阳性患者进行病程(一期到三期)的区分,共15230例。

1.2 检测参考品

各方法试剂盒内附的阳性对照品及阴性对照品。

1.3 试剂

梅毒甲苯胺红不加热血清试验诊断试剂盒(TRUST)由上海荣盛生物药业有限公司提供;梅毒螺旋体抗体诊断试剂(胶体金法)由英科新创(厦门)科技有限公司提供;梅毒螺旋体抗体诊断试剂(凝集法)(TPPA法)由FUJIREBIO INC(富士瑞必欧株式会社)提供,上述试剂全部在有效期内使用。

1.4 方法

采用TRUST、胶体金法、TPPA法3种方法分别对15 230例标本进行平行检测,各种试验操作步骤及判断严格按照试剂盒说明书进行。

2 结果

用TRUST、胶体金法、TPPA法3种方法检测15 230份血样,比较各种方法检测结果的符合率及特性,见表1、2。

表1 3种方法梅毒检测结果比较表

表2 3种梅毒检测方法的特性比较

由表1、2看出,TPPA法确认阳性的标本中,TRUST法的阳性检测率不到20%,因为TRUST只在一期梅毒后期、二期梅毒的检出率较高;而胶体金法得阳性率达90%以上,不受梅毒病程的影响,只与血清中梅毒抗体的水平有关,且操作较简易。

3 讨论

人体感染梅毒螺旋体后,可产生多种抗体,特异性抗梅毒螺旋体抗体主要有IgM、IgG两类。IgM抗体持续时间短,IgG抗体可终生存在,但抗体浓度一般较低,不能预防再感染。非特异性抗体又称反应素,是人体受TP感染后,机体迅速作出免疫应答,在3~4周左右,由螺旋体破坏的组织细胞所释放的类脂样物质以及螺旋体自身的类脂和脂蛋白刺激机体产生的IgM和IgG类抗体。

梅毒的血清学检测试验根据抗原不同分为以下两类:

3.1 非特异性类脂质抗原试验

试验使用的抗原由牛心肌中提取的心磷脂、胆固醇和淳化的磷脂酰胆碱(卵磷脂)组成,即类脂质抗原,用于对梅毒的筛查。方法主要有性病研究实验室试验(venereal disease research laboratory test,VDRL)、不加热血清反应素试验(unheated serum reagin test,USR)、甲苯胺红不加热血清试验(toluidine red unheated-serum test,TRUST)、快速血浆反应素试验(RPR)等。

3.2 梅毒螺旋体抗原试验

使用的抗原是梅毒螺旋体的特异成分。这类试验有多种,国际上通用的试验是梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)和荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS),国内使用较多的是密螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和金标记免疫层析法。

检测非特异性抗类脂抗体(反应素)的方法目前国内最常用的是RPR法和TRUST法,并且长期以来作为国内临床疑似患者和血站献血员筛检的主要方法,但其灵敏性与特异性稍差。TRUST在一期梅毒后期、二期梅毒的检出率较高;而在一期梅毒早期和三期梅毒、潜伏梅毒及治疗后梅毒可呈阴性[3],在一期潜伏期及三期梅毒中检出率较低(58%~85%[4-5])。而且有报道称这种抗体也可在非梅毒螺旋体感染的孕妇血中及多种急、慢性疾病患者,尤其是老年人的血液中检出。所以TRUST等方法更适合临床梅毒确诊患者的疗效跟踪观察及各种研究,而不大适合临床病房的输血前全套检查,因为存在一定的漏检率以及假阳性率。

检测抗密螺旋体抗体国际上通用的试验主要有TPHA法和TPPA法,但由于操作稍繁琐费时,不及TP-ELISA法及金标法方便快捷,目前主要用于筛检阳性标本的确诊。金标法与TPPA法、ELISA法比较,其检测梅毒螺旋体抗体更快速,操作简单,不需特殊设备,可单人份检测,适合急门诊患者和基层医院,同时也适合体检人员的大批量筛查。虽然有报道称其特异性和灵敏度比TP-ELISA法稍低,但可作为住院患者输血前全套检查的初筛试验,阳性结果后再结合TPPA法做进一步的确诊试验及TRUST滴度记录,这样结合检查既可减少向临床反馈结果的时间,也可大大提高检测准确性,同时也可减轻实验室工作人员的工作负担,提高检测效率。

[1]曾志良,陈春梅,段逸群.一期梅毒治疗后血清学追踪检测结果分析[J].中国皮肤性病学,2004,18(3):15-17.

[2]中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006:101-108.

[3]赵辨. 临床皮肤病学[M].南京:江苏科学技术出版社,2001:515.

[4]张卓然.临床微生物学和微生物检验[M].北京:人民卫生出版社,2003:287.

[5]陈春梅,曾志良.潜伏梅毒85例血清学检测分析[J].中国皮肤性病学,2004,18(5):329-330.

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