蒋梦笔，闵苏，罗洁，林菁艳，李炜，刘力(重庆医科大学附属第一医院麻醉科，重庆市400016)

糖皮质激素广泛应用于外科手术中，术前单次注射大剂量甲泼尼龙能明显改善胸腹部手术中及术后的炎症反应，提高患者的术后恢复质量。大剂量糖皮质激素也常常应用于阑尾炎穿孔并腹膜炎引发的脓毒血症的外科手术中。罗库溴铵是一种较新型的甾类非去极化肌松药，其化学结构母体雄甾烷与甲泼尼龙的母体孕甾烷结构相似，二者在代谢上可相互影响。围术期同时使用上述2药时，罗库溴铵的肌松效应可能发生改变。而脓毒血症患者围术期单次大剂量应用甲泼尼龙对罗库溴铵肌松效应的影响研究尚未见报道。因此，本研究通过复制不同阶段的脓毒血症大鼠模型，探讨其单次大剂量应用甲泼尼龙对罗库溴铵肌松效应的影响，以期为临床用药提供依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器

RM6240型多道生理信号采集处理系统、JZJ100型肌肉张力换能器、YP100型压力换能器(成都仪器厂)；TKR-200C小动物呼吸机(江西省特力麻醉呼吸设备公司)。

1.2 试剂

罗库溴铵注射液(荷兰欧加农公司，批号:560760，规格:5 mL∶50 mg)；注射用甲泼尼龙琥珀酸钠(下简称:注射用甲泼尼龙，Pfizer Manufacturing Belgium NV，批号:T00626，规格:每支500 mg)。

1.3 动物

SD大鼠64只，♂，清洁级，体重250～350 g，由重庆医科大学实验动物中心提供，合格证号:SCXK(渝)2007-0001。实验前分笼喂养，每笼4只，室温22℃，明暗各12 h，自由进食进水。

2 方法

2.1 建模

结扎穿孔盲肠复制脓毒血症大鼠模型[1，2]。腹腔注射戊巴比妥钠40 mg·kg－1麻醉大鼠，中下腹中线右旁开作长约1.5 cm纵行切口，寻找盲肠，距回盲瓣末端1 cm处结扎，用18号针头穿孔各2个，还纳盲肠并缝合切口，皮下注射生理盐水40 mL·kg－1预防循环衰竭。盲肠结扎穿孔6、16 h后即得脓毒血症早、晚期模型。判断标准[2]:正常大鼠活动饮食正常，抓取时迅速躲避；脓毒血症早期模型大鼠活动减少，进食减少，毛发竖起，抓取时反应较差，打开腹腔可闻及恶臭味，肉眼观察见肠蠕动减弱、小肠水肿、肠壁可见出血点、肠管内有少量浑浊液体积聚；脓毒血症晚期模型大鼠活动明显减少，拒绝进食进水，呼吸稍加快，毛发竖立明显，抓取时反应差，可见异常分泌物，打开腹腔可闻及明显恶臭味，肉眼观察可见肠蠕动减弱、小肠明显水肿、肠壁可见出血点、肠管内有浑浊液体积聚。

2.2 分组

取64只大鼠，随机分为8组，每组8只，分别为药物早、晚期组，预处理早、晚期组，假手术早、晚期组，预处理对照组和药物对照组。药物早期组建早期模型；药物晚期组建晚期模型；预处理对照组注射罗库溴铵前30 min静脉注射甲泼尼龙190.28 mg·kg－1；预处理早、晚期组分别建早、晚期模型，其余操作同预处理对照组；假手术早、晚期组除不结扎穿孔盲肠外，其余分别同药物早、晚期组；药物对照组不作任何处理。

2.3 给药前处理与给药

给药前处理同文献[3]报道。大鼠腹腔注射20%乌拉坦(1.5 g·kg－1)麻醉，气管切开行机械通气，呼吸参数与文献一致；分离左颈动脉插管，连压力换能器监测平均动脉压(MAP)；暴露左坐骨神经，贴保护电极并连神经刺激导线；暴露左胫前肌肌腱，近端连接肌肉张力换能器；采用4个成串刺激(Train of four stimulation，TOF)模式[3]刺激左坐骨神经，连接多道生理信号采集处理系统。所有大鼠麻醉后静脉注射罗库溴铵3.81 mg·kg－1，整个过程大鼠持续静脉输注复方电解质注射液A 1 mL·h－1。大鼠给药剂量参考《药理实验方法学》[4]确定。

2.4 血流动力学与药效学检测

多道生理信号采集处理系统于注射罗库溴铵前30 min(t1)，即刻(t2)，注射后30(t3)、60(t4)、240 min(t5)时记录各组大鼠的MAP、心率(HR)以及起效时间、TOF无反应期、高峰时间、临床肌松时间、体内肌松作用时间和T1(第1个刺激肌颤搐高度)10%恢复时间、T125%恢复时间、T150%恢复时间、T175%恢复时间、T190%恢复时间和恢复指数(T1恢复从25%至75%的时间)。

2.5 统计学处理

数据采用均数±标准差(±s)表示，用SPSS 16.0软件包进行分析。检验水准取α＝0.05，P＜0.05为差异有显著性。血流动力学指标采用重复测量设计资料方差分析，差异显著者行多重比较。药效学指标作Levene方差齐性检验，方差齐则用完全随机资料的方差分析，差异显著者用LSD多重比较；方差不齐则用Welch法检验，差异显著者用Dunnett’s C多重比较。

3 结果

3.1 血流动力学指标

大鼠MAP不同组间比较具有显著性差异(F＝5.290，P＜0.01)；与药物对照组相同时间点比较，药物晚期组和预处理晚期组MAP明显降低(P＜0.05)；与同一组不同时间点比较，MAP差异无统计学意义(F＝0.629，P＞0.05)；组别与时间无交互作用(F＝1.223，P＞0.05)。各组大鼠MAP的变化详见表1。

表1 各组大鼠MAP的变化(mmHg，±s，n＝8)Tab 1The changes of mean arterial blood pressur(emmHg，±s，n＝8)

表1 各组大鼠MAP的变化(mmHg，±s，n＝8)Tab 1The changes of mean arterial blood pressur(emmHg，±s，n＝8)

与药物对照组相同时间点比较:＊P＜0.05vs.drug control group at the same time:＊P＜0.05

t5 t1t2t3t4组别药物对照组假手术早期组假手术晚期组预处理对照组药物早期组药物晚期组预处理早期组预处理晚期组96.80±6.71100.50±7.0296.50±10.3697.20±5.18101.15±6.5187.00±4.02＊102.74±9.0687.32±4.61＊96.31±7.48100.98±7.6096.87±10.5495.78±5.57102.95±9.3187.34±4.15＊102.11±9.6788.93±3.16＊97.32±6.73100.60±6.0796.60±10.2296.54±5.61101.94±8.8887.75±4.20＊101.24±10.2388.01±4.31＊97.71±6.98101.07±7.1796.68±10.5096.49±4.79101.67±7.0187.08±3.69＊102.27±9.6288.43±4.80＊96.75±6.44100.73±6.0496.47±10.2796.86±4.90100.92±6.5187.21±3.70＊102.43±9.1287.89±4.30＊

大鼠HR不同组间比较具有显著性差异(F＝12.754，P＜0.01)；同一时间点，与药物对照组比较，药物早期组和预处理早期组HR明显加快(P＜0.05或P＜0.01)；与同一组不同时间点比较，HR差异无统计学意义(F＝1.654，P＞0.05)；组别与时间无交互作用(F＝1.323，P＞0.05)。各组大鼠HR的变化详见表2。

表2 各组大鼠HR的变化(次/min，±s，n＝8)Tab 2The changes of mean heart rat(etimes/min，±s，n＝8)

表2 各组大鼠HR的变化(次/min，±s，n＝8)Tab 2The changes of mean heart rat(etimes/min，±s，n＝8)

与药物对照组相同时间点比较:＊P＜0.05，＊＊P＜0.01vs.drug control group at the same time:＊P＜0.05，＊＊P＜0.01

组别药物对照组假手术早期组假手术晚期组预处理对照组药物早期组药物晚期组预处理早期组预处理晚期组t2t3t4t5 404.11±15.65383.44±36.77385.47±23.39395.72±27.23445.63±26.14＊389.75±14.82448.58±19.39＊＊377.82±11.01397.07±19.44383.22±35.77382.52±26.97395.39±27.17454.86±29.39＊396.76±12.37449.43±17.56＊＊381.71±10.82401.95±17.79379.01±37.30378.94±27.21393.40±25.42445.37±25.22＊399.30±12.87451.44±19.01＊＊375.06±10.09402.75±20.61385.03±44.15382.20±26.71395.55±27.37446.64±27.90＊397.42±18.49455.05±24.27＊＊377.07±12.57409.30±17.63385.30±29.02379.83±26.03397.76±24.77446.96±21.85＊397.53±16.62451.02±24.64＊＊381.24±8.63

3.2 罗库溴铵的药效学变化

与药物对照组比较，预处理早、晚期组和药物晚期组大鼠起效时间明显延长，高峰时间、TOF无反应期明显缩短(P＜0.05或P＜0.01)；除假手术早、晚期组外，其余各组临床肌松时间和体内肌松作用时间均明显缩短(P＜0.01)。与预处理对照组比较，预处理早、晚期组高峰时间、TOF无反应期、临床肌松时间均明显缩短(P＜0.05或P＜0.01)；仅预处理晚期组体内肌松作用时间明显缩短(P＜0.01)。与药物早期组比较，预处理早期组临床肌松时间明显缩短(P＜0.05)；预处理晚期组高峰时间、TOF无反应期、临床肌松时间和体内肌松作用时间均明显缩短(P＜0.05或P＜0.01)，结果详见表3。

表3 各组大鼠罗库溴铵的药效学变化(s，±s，n＝8)Tab 3Comparison of pharmacodynamics of rocuronium(s，±s，n＝8)

表3 各组大鼠罗库溴铵的药效学变化(s，±s，n＝8)Tab 3Comparison of pharmacodynamics of rocuronium(s，±s，n＝8)

与药物对照组比较:aP＜0.05，bP＜0.01；与预处理对照组比较:cP＜0.05，dP＜0.01；与药物早期组比较:eP＜0.05，fP＜0.01；与药物晚期组比较:gP＜0.01；与预处理早期组比较:hP＜0.01vs.drug control group::aP＜0.05，bP＜0.01；vs.pretreatment control group:cP＜0.05，dP＜0.01；vs.drug early-therapy group:eP＜0.05，fP＜0.01；vs.drug advanced-treatment group:gP＜0.01；vs.pretreatment early-stage group:hP＜0.01

组别药物对照组假手术早期组假手术晚期组预处理对照组药物早期组药物晚期组预处理早期组预处理晚期组体内肌松作用时间1595±1691560±1121577±1941213±142b 1226±111b 1174±33b 1055±88b 774±87bdfgh起效时间25.1±5.222.6±5.025.3±3.431.8±6.231.9±8.236.5±6.2a 35.4±9.1a 37.8±10.8a高峰时间889±155910±81879±128702±72659±92622±50a 550±71bc 378±85bdfgh TOF无反应期838±164814±87826±115661±68591±111571±45a 509±50ad 344±88bdfgh临床肌松时间1075±1371063±861025±137861±135b 791±83b 744±29bc 678±70bde 451±87bdfgh

与药物对照组比较，除假手术早、晚期组和药物早期组外，其余各组恢复指数均明显降低(P＜0.01)。与预处理对照组、药物晚期组和预处理早期组比较，预处理晚期组恢复指数均明显降低(P＜0.05或P＜0.01)，结果详见表4。

表4 各组大鼠罗库溴铵肌松恢复指标比较(s，±s，n＝8)Tab 4Comparison of pharmacodynamics of rocuronium(s，±s，n＝8)

表4 各组大鼠罗库溴铵肌松恢复指标比较(s，±s，n＝8)Tab 4Comparison of pharmacodynamics of rocuronium(s，±s，n＝8)

与药物对照组比较:aP＜0.05，bP＜0.01；与预处理对照组比较:cP＜0.05，dP＜0.01；与药物早期组比较:eP＜0.05，fP＜0.01；与药物晚期组比较:gP＜0.05，hP＜0.01；与预处理早期组比较:iP＜0.01vs.drug control group::aP＜0.05，bP＜0.01；vs.pretreatment control group:cP＜0.05，dP＜0.01；vs.drug early-therapy group:eP＜0.05，fP＜0.01；vs.drug advanced-treatment group:gP＜0.05，hP＜0.01；vs.pretreatment early-stage group:iP＜0.01

组别药物对照组假手术早期组假手术晚期组预处理对照组药物早期组药物晚期组预处理早期组预处理晚期组恢复指数303±40275±46263±38191±26b 241±64210±38b 186±19b 145±22bcgi T110%恢复时间972±124977±81953±133812±138b 739±92b 693±47b 630±59bde 437±78bdfhi T125%恢复时间1086±1291087±861045±153900±139823±84a 779±31bc 720±81bd 490±80bdfgi T150%恢复时间1225±1151188±1251153±1641000±136b 919±110b 863±38b 794±83bde 554±88bdfhi T175%恢复时间1381±1241357±1131310±1651094±152b 1071±82b 990±41b 908±88bde 635±82bdfhi T190%恢复时间1542±1701488±1201457±1521184±135b 1174±98b 1120±44b 992±95bdfh 724±82bdfhi

4 讨论

罗库溴铵具有起效快、恢复迅速及对血流动力学影响小的特点，主要经肝肾代谢，由活性转运载体摄取和清除。

关于脓毒血症减弱肌松效应的临床报道少。大鼠离体肌肉试验已证实脓毒血症可减弱筒箭毒碱的肌松效应[5]，且随脓毒血症的进展而加重[6]。本文为大鼠体内实验，也证实脓毒血症减弱肌松效应，表现为罗库溴铵起效时间延长，肌松作用持续和恢复时间缩短。脓毒血症可能易化终板电位及增加其幅度，增加突触前胆碱能神经递质(Ach)的量子化释放，增加突触后乙酰胆碱受体的数量，提高肌膜的兴奋性，从而降低肌松药对受体的敏感性[6]。

国外关于糖皮质激素对肌松效应的影响也有研究。克罗恩病患者术前连续4周服用大剂量泼尼松龙可使阿曲库铵肌松效应恢复时间缩短20%[7]。本实验主要是术前单次大剂量注射甲泼尼龙，结果表明单次大剂量甲泼尼龙使罗库溴铵肌松效应起效时间延长、持续缩短及恢复加快，而且单次大剂量甲泼尼龙强化了脓毒血症对罗库溴铵肌松效应的减弱作用。

甲泼尼龙广泛用于临床，其母体结构与罗库溴铵母体结构相似。罗库溴铵和糖皮质激素具有相同的活性转运载体膜转运蛋白家族(Oatp)。糖皮质激素可直接作用于膜受体调节蛋白激酶C，蛋白激酶C的活化能短期使大鼠Oatp1、2蛋白磷酸化而失活[8]。因此，糖皮质激素可能具有上调大鼠Oatp1、2蛋白的功能。甲泼尼龙可能通过诱导罗库溴铵活性转运载体，加快罗库溴铵的代谢，从而减弱其肌松作用。

[1]毛健，李荣亨.复原胶囊对脓毒血症大鼠肾组织HIF-1α表达的影响[J].中国药房，2010，21(15):1354.

[2]Zanotti-Cavazzoni SL，Goldfarb RD.Animal models of sepsis[J].Crit Care Clin，2009，25(4):708.

[3]Osawa T.Different recovery of the train-of-four ratio from rocuronium-induced neuromuscular blockade in the diaphragm and the tibialis anterior muscle in rat[J].Journal of Anesthesia，2008，22(3):236.

[4]徐叔云，卞如濂，陈修主编.药理实验方法学[M].第3版.北京:人民卫生出版社，2002:203-204.

[5]Nishikawa K，Narimatsu E，Igarashi M，et al.Effects of sepsis on the neuromuscular blocking actions of d-tubocurarine on rat adductor and abductor laryngeal muscles[J].Journal of Anesthesia，2009，23(4):522.

[6]Narimatsu E，Niiya T，Kawamata M，et al.Sepsis stages dependently and differentially attenuates the effects of nondepolarizing neuromuscular blockers on the rat diaphragm in vitro[J].Anesth Analg，2005，100(3):825.

[7]Soltesz S，Mencke T，Mey C，et al.Influence of a continuous prednisolone medication on the time course of neuromuscular block of atracurium in patients with chronic inflammatory bowel disease[J].British Journal of Anaesthesia，2008，100(6):800.

[8]Guo GL，Klaassen CD.Protein kinase C suppresses rat organic anion transporting polypeptide 1-and 2-mediated uptake[J].JPET，2001，299(2):552.