陈绍初 潘 京 张美兰

（广东蓝宝制药有限公司，广东 清远 511515）

图1 空白溶液色谱图

图2 对照品溶液色谱图

图3 供试品溶液色谱图

麦考酚酸属于微生物来源的具有抑制作用的抗生素，是一种高效、选择性、非竞争性、可逆性的次黄嘌呤单核苷酸脱氢酶抑制剂，可抑制鸟嘌呤核苷酸的合成途径，使鸟嘌呤核苷酸耗竭，进而阻断DNA的合成；选择作用于T、B淋巴细胞，抑制其增殖。起初主要作为抗生素使用，后面作为器管移殖的多种新型免疫制剂的使用，近年又发现它还具有抗肿瘤、抗HIV等新的用途[1]。由于其作用范围的越来越大，有必要对其产品中残留的有机溶剂进行严格控制。本文采用顶空气相色谱法[2]测定麦考酚酸中有机溶剂残留，报道如下。

1 实验部分

1.1 仪器与试药

1.1.1 仪器气相色谱仪

FID检测器，Agilent 6890N，Agilent Chemstation RevA.09.03气相工作站。

1.1.2 试药

麦考酚酸由广东蓝宝制药有限公司提供。二甲基亚砜、2-己酮（密度0.810g/mL）、甲醇（密度0.791g/mL）、无水硫酸钠均为色谱纯试剂。

1.1.3 试液制备

①内标储备液：吸取250μL 2-己酮于50mL容量瓶中，加入二甲基亚砜至刻度，摇匀即得。②空白溶液：称取无水硫酸钠约200mg于顶空进样瓶中，加入0.1mL内标储备液，加1.9mL二甲基亚砜，摇匀即得。③对照品溶液：精密量取甲醇18μL（14.22mg）至50mL容量瓶中，加二甲基亚砜溶液稀释至刻度，摇匀即得对照品储备液。称无水硫酸钠约200mg于每个顶空进样瓶中，分别加入上述对照品储备液0.5、0.8、1.0、1.2、1.5mL和0.1mL内标储备液，再分别加入适量二甲基亚砜，摇匀即得50%、80%、100%、120%、150%浓度对照品溶液。④供试品溶液：称取100mg样品、200mg无水硫酸钠置于顶空进样瓶中，加入0.1mL内标储备液，再加入1.9mL二甲基亚砜，加塞，密封。

1.2 色谱条件色谱柱

柱温：初始温度为40℃，保持5min后，以升温速率为2℃/min升至90℃，保持0min，以升温速率为30℃/min升至160℃，保持2min；进样口温度：220℃；检测器温度：260℃；检测器：FID检测器；载气：氮气；流速：7mL/min；分流比：10∶1。

1.3 测定方法

取制备好的供试品溶液或对照品溶液，用顶空进样器进样测定，记录色谱图。

2 实验结果

2.1 系统适用性试验

取100%浓度对照品溶液好热空白溶液，按测定方法测定。两峰的分离度＞1.5，理论塔板数＞5000，拖尾因子＜1.5（表1）。色谱图见图1～图3。

表1 系统适用性试验结果

2.2 线性试验

按测定方法测定50%、80%、100%、120%、150%浓度的对照品溶液，以各溶剂与内标物质峰面积的比值R为纵坐标（y），以各溶剂的浓度C（mg/L）为横坐标（x），拟合线性回归方程（n＝5）为y =0.000165 x + 0.004，相关系数为0.9999。结果表明，比值R与浓度C成较好线性关系。

2.3 回收率试验

按测定方法测定制备供试品溶液和加料供试品溶液，平均回收率（n=9）在99.6%，RSD%为1.3%。

2.4 精密度试验

按测定方法连续测定6次100%浓度的对照品溶液，结果各溶剂与内标物质峰面积比值RSD为1.3%。结果表明，该方法具有良好的精密度。

2.5 定量限试验

按测定方法进样测定系列低浓度对照品溶液，取信噪比为10∶1时相应的浓度确定为甲醇定量限为0.0028mg/mL。结果表明，灵敏度良好。

2.6 样品测定

按测定方法测定制备的3个批次的供试品溶液，按内标法计算甲醇的含量分别为0.092%、0.109%和0.097%。

3 讨 论

3.1 本文还进行过溶液稳定性试验，研究表明溶液在室温密闭条件下，3d内能保持相对稳定。

3.2 因生产工艺不同，生产过程工序则可能会用到乙酸乙酯或乙酸丁酯，本方法也适用测定其残留。

[1]Ronald B.Mycophenolic acid: a one hundred year odyssey from antibiotic to immunosuppressant[J].Chem Rev,2000,100(10):3801.

[2]国家药典委员会.中国药典(2010版第二部)[S].北京:中国医药科技出版社,2010:附录31-32,194-195.