丁 梅,田晓丰,王 刚,徐卫国

（1.唐山协和医院普外科,河北唐山 063000;2.吉林大学第二医院普外科中心,吉林长春 130041;2.开滦（集团）有限责任公司医院肿瘤科;3.华北煤炭医学院附属医院肿瘤外科）

乳腺癌是我国女性发病率最高的恶性肿瘤,有关VEGF-C在乳腺癌中的表达及意义一直存在争议。因此我们采用免疫组化染色法（SP法）,对乳腺纤维瘤和乳腺癌术后标本中的VEGF-C表达水平进行检测,并结合临床病理学特征进行分析研究。

1 材料与方法

1.1 临床资料 收集唐山协和医院1997年1月1日-2005年12月31日收治的乳腺浸润性导管癌和乳腺纤维瘤患者术后标本（蜡块）以及完整病历资料。患者均为女性,其中乳腺纤维瘤40例,乳腺癌60例,临床分期Ⅰ-Ⅲ期,术前未行放化疗等抗肿瘤治疗。

1.2 方法 主要实验试剂均购自北京中山生物技术有限公司,采用免疫组织化学染色-SP法,依试剂盒说明顺序操作。

1.3 观察指标及评判标准

VEGF-C阳性标准:VEGF-C染色阳性以细胞浆中出现棕黄色颗粒为标准,两名病理医师随机选取3个400倍视野,以每个视野中阳性癌细胞占全部癌细胞的比例计算:＜25%（-）,≥25%（+）。

1.4 统计学处理 应用SPSS10.0软件辅助计算:阳性率比较应用 χ2检验,P＜0.05为有统计学意义。

2 结果

2.1 VEGF-C在乳腺癌和乳腺纤维瘤中的检测结果 VEGF-C阳性信号定位在细胞浆中,呈棕黄色颗粒。60例乳腺癌中VEGF-C阳性41例,阳性率为68.33%。40例乳腺纤维瘤中VEGF-C阳性11例,阳性率为27.50%。乳腺癌组中VEGF-C表达水平显著高于乳腺纤维瘤组,其差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 乳腺癌组中VEGF-C表达水平与淋巴结转移相关性 36例淋巴结转移组中VEGF-C阳性为28例,阳性率为77.78%。淋巴结阴性24例中VEGF-C阳性为14例,阳性率为58.33%,淋巴结转移阳性组中VEGF-C表达水平高于未转移组,其差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.3 VEGF-C与乳腺癌分期的相关性 Ⅰ期+Ⅱa期23例中VEGF-C阳性为13例,阳性率为56.5%,Ⅱb期+Ⅲ期 37例中VEGF-C阳性为30例,阳性率为81.1%,VEGF-C在Ⅱb期+Ⅲ期组中表达水平高于Ⅰ期+Ⅱa组,其差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

1996年Joukov[1]等利用受体亲和色谱法从人类前列腺癌细胞cDNA库中克隆并分离出VEGF-C,VEGF-C是第一个被发现的淋巴管生成因子,它可以促使淋巴内皮细胞增殖。VEGF-C是VEGF家族中的一员,VEGF家族包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E和胎盘生长因子（Placenta grow th factor,PLGF）。VEGF的功能受到VEGF受体的调节 ,包 括 VEGFR-1（Flt-1）、VEGFR-2（Kdr/Flk-1）、VEGFR-3（Flt-4）和 Neuropilins（NP-1和 NP-2）[2]。VEGF-C主要与VEGFR-2及VEGFR-3结合发挥作用。目前已发现VEGF-C在头颈部鳞癌、肺癌、乳腺癌、软组织肉瘤、淋巴瘤等多种恶性肿瘤表达[3-6]。在乳腺癌中,大多数研究认为VEGF-C与淋巴结转移密切相关,评价VEGF-C表达水平有助于评价肿瘤恶性程度并且VEGF-C高表达提示患者预后较差[7-11]。但也一些国外研究持有不同观点,Gisterek[12]对98例乳腺癌术后患者进行10年的追踪随访并对术后标本进行免疫组化检测,没有发现VEGF-C与淋巴结转移、肿瘤组织学分级和患者预后有相关性。Teramoto[13]和Al-Mowallad[14]的研究结果也提示VEGF-C与淋巴结转移无相关性,无预测预后价值。

本组试验结果显示乳腺癌组织中VEGF-C阳性表达率为68.33%,显著高于乳腺纤维瘤,乳腺癌Ⅱb-Ⅲ期组中VEGF-C的表达水平高于Ⅰ-Ⅱa期组,淋巴结转移阳性组中VEGF-C表达水平明显高于未转移组,与近期国内外研究报道基本一致。本组试验结果表明VEGF-C表达水平可以反映乳腺浸润性导管癌的恶性程度,可作为反映乳腺癌生物学行为的指标之一。在乳腺癌淋巴结转移过程中VEGF-C可能发挥重要促进作用。Kodama[15]指出VEGF-C主要表达于肿瘤细胞中,VEGFR-3在肿瘤细胞及癌周淋巴管内皮细胞中均有表达,VEGF-C通过自分泌和旁分泌机制与VEGFR-3结合,促进肿瘤进展。由于本组实验设计没有进行随访调查,故对VEGF-C是否具有预测预后价值无法做出评价。

总之,本组试验结果表明VEGF-C的表达水平与乳腺癌恶性程度及淋巴结转移密切相关。综合评价VEGF-C的表达水平和腋窝淋巴结状态,或许对预测淋巴转移风险和评价患者预后能提供一定帮助。

[1]Joukov V,Pajusola K,Kaipainen A,et al.A novel vascular endothelial growth factor,VEGF-C,is a ligand for the Flt4（VEGFR-3）and KDR（VEGFR-2）receptor tyrosine kinases[J].EMBO J,1996,15（2）:290.

[2]王 刚,代小菊,徐卫国.血管内皮生长因子与肿瘤的抗血管生成治疗[J].中国医药,2006,1（9）:574.

[3]Benke EM,Ji Y,Patel V,et al.VEGF-C contributes to head and neck squamous cell carcinoma growth and motility[J].Oral Oncol,2010,46（4）:e19.

[4]LahatG,Lazar A,Wang X,et al.Increased vascular endothelial growth factor-C expression is insufficient to induce lymphaticmetastasis in human soft-tissue sarcomas[J].Clin Cancer Res,2009 15（8）:2637.

[5]Paydas S,Seydaoglu G,Ergin M,et al.The prognostic significance of VEGF-C and VEGF-A in non-Hodgkin lymphomas[J].Leuk Lymphoma,2009,50（3）:366.

[6]BogosK,Renyi-Vamos F,Dobos J,etal.High VEGFR-3-positive circulating lymphatic/vascular endothelial progenitor cell level is associated with poor prognosis in human small cell lung cancer[J].Clin Cancer Res,2009,15（5）:1741.

[7]Eccles S,Paon L,Sleeman J,Lymphaticmetastasis in breast cancer:importance and new insights into cellularandmolecularmechanisms[J].Clin Exp Metastasis,2007,24（8）:619.

[8]胡帅尔,张雅洁,崔玉梅,等.VEGF-A和VEGF-C在乳腺癌组织中的表达及其意义[J].癌症,2005,24（9）:1076.

[9]Gu Y,Qi X,Guo S.Lymphangiogenesis inducedby VEGF-C and VEGF-D promotesmetastasisand a poor outcome in breast carcinoma:a retrospective study of 61 cases[J].Clin ExpMetastasis.2007,24（8）:619.

[10]曹桂明,杨 梅.VEGF-C和VEGFR-3对乳腺癌淋巴管生成和淋巴结转移的影响[J].中国肿瘤临床,2006,33（6）:310.

[11]李 鹏,滕月娥,仆 欣,等.COX-2和VEGF-C在乳腺癌组织中的表达与预后的关系[J].中国肿瘤临床,2009,36（9）:207.

[12]Gisterek I,Matkowski R,Kolak J,et al.Evaluation ofprognostic value of VEGF-C and VEGF-D in breast cancer-10 years follow-up analysis[J].Anticancer Res,2007,27（4C）:2797.

[13]Teramoto S,Arihiro K,KosekiM,et al.Role of vascular endothelial growth factor-C and-D mRNA in breast cancer[J].Hiroshima JMed Sci,2008,57（2）:73.

[14]A l-Mowallad A,Kirwan C,Byrne G,et al.Vascular endothelial growth factor-C in patientswith breast cancer[J].In Vivo,2007,21（3）:549.

[15]KodamaM,Kitadai Y,Tanaka M,et al.Vascular endothelial growth factor C stimulates progression of human gastric cancer via both autocrine and paracrinemechanisms[J].Clin Cancer Res,2008,14（22）:7205.