余楚钦，方玉婵，林华庆，邱五龙

（1.广东药学院药物研究所，广东广州 510006；2.中山大学附属第三医院，广东广州 510630；3.广州固志医药科技有限公司，广东广州 510600）

安中片由桂枝、延胡索（醋制）、牡蛎（煅）等药材组成，具有温中散寒、理气止痛、和胃止呕之功效[1]，能较好地缓解上腹症状和改善胃黏膜营养状态的功能[2]。延胡索为方中君药，其有效成分为延胡索乙素[3]，现代药理研究表明[4]，延胡索具有抗溃疡和明显镇痛作用。《中国药典》未明确安中片中延胡索渗漉提取法的工艺参数，不同工艺参数影响药物的疗效。本文在药典规定制法的基础上，通过正交试验法确定延胡索的最佳提取条件。

1 仪器与材料

美国Waters高相液相色谱仪；Sartorus BS 110电子天平；延胡索药材（广州市健琪医药有限公司）；延胡索对照品（批号：100024-200805，中国药品生物制品检定所）；甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 延胡索乙素的含量测定[5]

2.1.1 色谱条件 参照《中国药典》2005年版一部，选用色谱柱为 Hypersil BDS C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），以甲醇-0.1%磷酸溶液（三乙胺调 pH 值至 6.0）（60∶40）为流动相；检测波长为280 nm。理论板数按延胡索乙素峰计算不低于3000。

2.1.2 对照品溶液的制备 精密称取延胡索乙素对照品适量，加甲醇溶液制成约40 μg/ml的溶液。

2.1.3 药材供试品溶液的制备 取药材粉末约0.5 g，精密称定，置平底烧瓶中，精密加入浓氨试液-甲醇（1∶20）混合溶液50 ml，称量。冷浸1 h后回流1 h，放冷，称量，用浓氨试液-甲醇（1∶20）混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过。精密吸取续滤液25 ml，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.1.4 渗漉液供试品溶液的制备 精密吸取样品液25 ml，置平底烧瓶中，水浴上蒸干后，精密加入浓氨试液-甲醇（1∶20）混合溶液50 ml，称量，其余操作按“2.1.3”项下的方法制备。

2.1.5 样品测定 精密吸取“2.1.2”项下对照品溶液及“2.1.4”项下供试品溶液各10 μl，分别注入液相色谱仪，测定，按外标法以峰面积计算。

2.2 延胡索提取工艺的优化

2.2.1 提取工艺 将药材粉碎成粗粉，称取100 g，参照《中国药典》2005年版一部流浸膏与浸膏剂项下的渗漉法[6]，用70%乙醇作溶剂，进行渗漉，收集漉液，回收乙醇，得清膏。

2.2.2 正交试验设计 根据经验和预试验结果，设定浸渍时间（A）、乙醇用量（B）、渗漉速度（C）为考察因素，以 L9（34）设计正交试验，方法和结果见表1、2、3。

表1 因素水平表Tab.1 Factors and levels of the orthogonal design experiments

延胡索中延胡索乙素含量为药材量的0.08%，100 g药材含延胡索乙素为80 mg

由直观分析可知，对延胡索乙素转移率影响大小顺序依次为B＞A＞C。最佳工艺组合条件为A2B2C3，即采用以70%乙醇浸渍24 h，70%乙醇量进行渗漉，渗漉速度为0.5 ml/min，收集9倍漉液。

表2 正交设计结果分析Tab.2 Results analysis of orthogonal design experiments

表3 正交试验结果方差分析Tab.3 ANOVA of orthogonal results

由方差分析可见，乙醇用量有极显著影响，浸渍时间有显著影响，渗漉速度无显著影响。

2.3 优选工艺的验证

根据优选工艺条件进行3次验证试验，并对延胡索乙素转移率进行考察，结果延胡索乙素平均转移率为71.30%，RSD为3.16%，可见该工艺方法稳定可靠。

3 讨论

根据渗漉法的工艺特点，药材粉碎的粒度不宜太细，太细易造成填充不均匀，堵塞渗漉筒漉液流动不畅，不利于有效成分的提取，但也不宜太粗，否则亦影响浸出效果，据实际生产经验本文延胡索药材粒度定为粗粉。

本文在药典规定的工艺路线和工艺条件基础上，通过正交试验法对延胡索的提取工艺参数进行筛选，优化出最佳工艺参数，有利于提高药物疗效，同时为规范安中片生产工艺提供合理性依据。

[1]邓少伟,程显隆,马双成.安中片的质量控制标准研究[J].药物分析杂志,2006,26(8):1065-1066.

[2]简晓岑.圣阳安中片加六味地黄丸治疗慢性萎缩性胃炎60例疗效观察[J].现代医药卫生,2006,22(16):2513.

[3]苗明三,李振国.现代实用中药质量控制技术[M].北京:人民卫生出版社,2000:435.

[4]刘芳,罗跃娥.延胡索研究概况[J].天津中医学院学报,2005,24(4):240-242.

[5]余楚钦,林华庆,邱五龙.康胃胶囊有效期的评价[J].中国实用医药,2008,3(14):3-4.

[6]国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京:化学工业出版社,2005:附录17.