王一明 张海兰 谢鹏贵 伊犁职业技术学院 835000

1 猪精子的特点

1.1 猪精液的理化特性

正常公猪的精液单次射精量为200-500m L，密度为2-3亿/m L，颜色为乳白色或浅灰色，呈云雾状，略带腥味，PH值为7.0-7.5。

1.2 猪精子的形态和结构

猪精子分头部、颈部和尾部等三个主要部分，表面有质膜覆盖，是含有遗传物质并有活动能力的雄配子。

（1）头部

猪精子的头主要由细胞核构成，内含遗传物质DNA。

（2）颈部

猪精子的颈部位于头的基部，是头和尾的连接部，也可作为精子头的部分。精子尾部有纤丝在该部与头相连接。颈部是精子最脆弱的部分，特别是精子在成熟、体外处理和保存过程中，某些不利因素的影响极易造成尾的脱离，形成无尾精子。

（3）尾部

精子最长的部分，是精子的代谢和运动器官。精子主要靠尾部的鞭索波动推动精子向前运动，由于精子能量来自尾的中段，头部有缺陷或损伤的精子仍可有运动的能力。

（4）畸形率及畸形精子分类

畸形率是指异常精子的百分率，一般要求畸形率不超过18%，其测定可用普通显微镜,但需伊红或姬姆沙染色,相差显微镜可直接观察活精子的畸形率。公猪使用过频或高温环境会出现精子尾部带有原生质滴的畸形精子;畸形精子种类有很多,如巨型精子、短小精子、双头或双尾精子、顶体膨胀或脱落、精子头部残缺或与尾部分离、尾部变曲。要求每头公猪每2周检查一次精子畸形率。

2 实验室精液质量检测指标

2.1 感官检测

（1）颜色

正常的精液是乳白色或浅灰色，呈云雾状，精子密度越高，色泽愈浓，其透明度愈低。异常精液：如带有绿色或黄色是混有脓液或尿液;带有浅红色或红褐色是含有血液，表明精液中有炎症物，这样的精液应舍弃不用，并会同兽医寻找原应，及时治疗。

（2）气味

正常猪精液略带腥味，如果气味异常，可能是混有尿液、脓液、粪渣或其他异物的表现，应废弃不用。气味异常常伴有颜色的变化，因此可将色泽和气味检查结合进行，使鉴定结果更为准确。

（3）pH

以pH计或pH试纸测量。正常精液的pH值为7.0-7.5，呈中性或弱碱性。

（4）采精量的测定

测量精液量主要用电子天平称量法。按1g=1m L计，精液量（g）=（精子的质量+集精杯的质量）-集精杯子的质量。避免以量筒等转移精液盛放容器的方法测量精液的体积，减少精子的死亡。

猪的射精量因品种、年龄、使用频率不同有较大的差异，通常公猪的一次射精量为200-500m L。公猪射精过多或过少，应分析原因。采精次数过多，公猪生殖机能衰退，日常管理不当，采精技术不熟练均可能造成一次采精量过少；一次采精量过多则可能是由于混入过多的副性腺分泌物及尿液等。

2.2 显微镜检测

（1）精子活率的检测

精子的活率是指精液在37℃条件下呈直线运动的精子占全部精子总数的百分率，它与精子授精能力密切相关，是评定精液品质的重要指标。精子活率的评定一般用目测估测法在显微镜下观察精子活率，按0.1-1.0的十级评分法进行评估。检查活率时应在37℃条件下进行。

（2）精子密度检查

精子密度值即每毫升精液中含有的精子数量，是确定精液稀释倍数、评定精液品质的一个重要指标，正常公猪的精子密度为2-3亿／m L，有的可高达5亿/m L。检测精子密度的方法主要有估测法、精子密度仪法、血细胞计数方法等。

①估测法

在显微镜下观察精子的分布，精子与精子之间的距离少于一个精子长度为“密”，其距离相当于一个精子的长度为“中”，其距离大于一个精子的长度为“稀”。此种方法主观性强，误差大，只能进行粗略的估计。

②血细胞计数方法

该方法最准确，但速度太慢，生产实践中主要用于校正精子密度仪的读数。

血细胞计数方法：①以微量加样器取具有代表性原精液200μ1，用3%Nac1稀释10倍；②在血细胞计数板上放一块盖玻片，取一滴稀释液后精液置于计数板的槽中，靠虹吸将精液吸入计数室内；③在高倍镜下计数5个中方格内的精子总数，将该数乘以50万，即得原精液每毫升的精子数（即精液密度）。

（3）精子畸形率检测

精子畸形率的大小对精子的受精能力存在一定的影响。先前的研究指出，精液中畸形的精子比率过高将会减少精液的受精能力，但对于畸形率过高的精液通过增加精液的用量也可以提高其受精效果。

精子畸形率的测定可以用伊红或姬姆萨等染料对精子进行染色后用普通显微镜观察，或者用相差显微镜直接观察或精子的畸形率。

3 精液体外处理过程中的注意事项

3.1 精液稀释注意事项

（1）稀释液在精液稀释前1-2h配置，均匀搅拌，再过滤一次，密封，置于37℃恒温水浴箱中。在精液稀释前几分钟添加抗生素，太早易失效。

（2）精液稀释要求与精液直接接触的器材，用蒸馏水清洗并进行高温消毒。

（3）精液稀释要在25℃的恒温室内进行，新鲜精液未经品质检查或检查不合格 （直线运动活率＜0.7，区别于活力）的精液不能稀释。

（4）新鲜精液采集后应尽快稀释，原精贮存时间不宜超过3m in。

（5）稀释时严禁太阳光照射精液，应处于暗处操作。

（6）精液要求等温稀释。精液与稀释液的温差不能超过1℃，以精液温度为标准，来调节稀释液的温度。

（7）稀释时，将稀释液沿杯（瓶）壁缓慢加入到精液中，然后轻轻摇动或用消毒玻璃棒沿一个方向缓慢搅拌，使其混合均匀。

（8）高倍稀释时，应先进行低倍稀释（1：1-2），稍待片刻后将余下的稀释液沿壁缓慢加入，以防造成“稀释打击”。

（9）稀释倍数的确定：精液稀释的比例应根据原精液的品质、输精量、配种母猪头数以及是否需要运输和贮存而定。一般以每个输精计量含有效精子数40亿以上，输精量为80-100m L来确定稀释倍数。

（10）稀释后要求静置片刻再作精子活率检查。如果稀释前后精子活率无太大变化，即可进行分装与保存；如果活率下降过快，说明稀释液的配置或稀释操作有问题，不宜使用，并应查明原因加以改进。

3.2 精液保存注意事项

（1）将分装完的精液置22-25℃的室温1-2h后，放入17℃恒温箱贮存，也可以将精液瓶用几层纱布或干毛巾包好后直接放置于17℃恒温箱中，让其温度缓慢下降，避免因温度下降过快造成死精子数增多等。

（2）保存过程中要求每12h将精液摇匀一次，防止精子沉淀而引起死亡。每次摇匀时动作要轻缓均匀，同时观察精液的色泽状态，并做好记录，发现异常及时处理。

（3）保存过程中要切实注意冰箱内温度的变化（通过温度计的显示），以免因意想不到的原因而造成电压不稳而导致温度升高或降低。

（4）尽量减少精液保存箱开关次数，以减少对精子的影响。

（5）使用前对保存的精液进行活率检查，活率＜0.6的精液应弃之不用。

（6）用短效稀释液稀释的精液可保存3天，中效稀释液可保存4-6天，用长效稀释液稀释的精液可保存7天以上。但无论何种稀释液保存精液，都应尽快用完，否则会影响使用效果。

3.3 精液运输应注意的事项

（1）精液在运输前必须经过严格的检查，活率＜0.7的精液严禁调出。

（2）包装瓶或包装袋中应尽量排出空气，以减少在运输过程中的震荡。

（3）在运输过程中，应严格避光。

（4）精液运输到达目的地后，检查精子活率，合格后方可接收。

4 小结

精子检测的主要目的就是快速、准确地确定其精液活率，以满足生产的需要。利用目测及光学显微镜来评价精液的常规指标，保证了输精质量，减少了因精液质量差而引起的空怀；反映了种公猪精液品质的好坏，精液品质好的就充分发挥其遗传潜力，反之做以治疗或淘汰，从而减少成本，减少母猪返情，提高受胎率和产仔数等。

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