成积儒 蔡永林 郑裕明 李 军 莫永坤 钟青燕

摘要: 目的:探讨EB病毒EBNA1/IgA抗体与鼻咽癌临床分期的关系。方法:用酶联免疫吸 附法(ELISA)检测211例未┚治疗的鼻咽癌患者血清中狤BNA1/IgA抗体,按“92分期法 ”进 行分期,分别计算各T､N､M分期及临床分期的EBNA1/IgA抗体阳性率及抗体水平并进行统计 学分析。结果:鼻咽癌患者的EBNA1/IgA抗体表达与性别和各年龄组没有相关性。EBNA1/IgA 抗 体rA值与原发灶T分期及颈淋巴结转移N分期差异均有统计学意义(P<0.05);与远处转移 M分期差异无统计学意义(P>0.05)。鼻咽癌早期(Ⅰ､Ⅱ期)患者的EBNA1/IgA抗体rA值 显著低于晚期(Ⅲ､Ⅳ期)(P<0.05)。结论:EBNA1/IgA抗体在早期鼻咽癌表达水平相 对较低。对于评估鼻咽癌临床分期有一定的参考价值。

关键词:鼻咽癌;EB病毒;EBNA1/IgA;临床分期

中图分类号: R739.63 文献标识码: A 文章编号: 1008-2409(2009)05-0829-03

Relationship between Epstein-Barr virus EBNA1/IgA antibody and clinical stagesof nasopharyngeal carcinoma/CHENG Ji-yu, CAI Yong-lin, ZHENG Yu-ming, et a l.∥Wuzhou Red Cross Hospital, Wuzhou 543002, China

Abstract:Objective: To evaluate the relationship between E pstein-Barr virus(EBV)EBNA1/IgA antibody and clinical stages of nasopharyngea lcarcinoma(NPC). Methods: Serum samples derived from 211 untreated patients withNPC,who were categorized by the project of 92' stage,were examined for the pr esence of antibodies directed against EBNA1/IgA by using enzyme-linked immnunos o rbent assay(ELISA). The positive rate and antibody level of EBNA1/IgA of differ ent TNM stages and clinical stages were analyzed statistically. Results: The exp r ession of EBNA1/IgA antibody was not significantly associated with gender and ag e. The differences in rA of EBNA1/IgA among the stage T and N of NPC were statis tically significant(P<0.05). No significant difference of rA of EBNA1/IgA w as f ound in stage M(P>0.05). The rA of EBNA1/IgA was significantly lower at ear ly s tage(stage Ⅰ and Ⅱ)than at late stage(stage Ⅲ and Ⅳ)of NPC(P<0.05).Con clusion: It is relatively low in early NPC for the expression of EBNA1/IgA, whi ch may be helpful to classify the clinical stage of NPC.

Key words: nasopharyngeal carcinoma; Epstein-Barr virus; EBNA1/IgA; clinical stage

鼻咽癌的发生与EB病毒密切相关,检测血清中EB病毒抗体水平对鼻咽癌的早期诊断有着重要 意义[1]。在鼻咽癌细胞里不但有EB病毒基因组,而且有多种EB病毒特异性抗原,E BNA1是 一个DNA核结合性磷酸蛋白,由病毒基因组BKRF1基因编码,641个氨基酸组成,富含甘氨酸 - 丙氨酸重复序列,其主要作用是有助于EBV潜伏感染,对游离EBV基因组的保持与复制是必须 的[2]。EBNA1还可能在EBV潜伏状态的维持和DNA复制中和阻止蛋白酶对其自身的降 解中发 挥作用。目前在国内外逐渐推广应用检测EBNA1抗原抗体作为鼻咽癌的血清学指标取得较好 的效果[3-5],而对其与临床分期的关注则较少。笔者就EB病毒EBNA1/IgA抗体与 鼻咽癌患者的性别､年龄､TNM分期和临床分期的关系进行研究。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2008年在梧州市红十字会医院肿瘤科住院的未经治疗鼻咽癌患者211例,所有患 者均经鼻咽活检病理检查确诊,病理类型以非角化性癌为主(200/211,占94.8%)。其中 男156例,女55例;年龄22~83岁,中位年龄48岁。所有患者均按1992年福州全国鼻咽癌会 议推荐的鼻咽癌临床TNM分期法(92分期法)[6]进行分期。

1.2 酶联吸附试验

EBNA1/IgA试剂盒由中山生物工程有限公司生产提供,严格按照试剂使用说明书执行操 作。酶标仪450nm波长读出每孔吸光度(A)值。取每个标本双孔的平均值为该标本的A值,标 本的A值除以该反应板阳性对照的A 值即为该样品的相对A值(rA值)。

1.3 临界值的设定

以非鼻咽癌的其他相似症状病例者为对照组,应用受试者工作特征(ROC)曲线确定EBNA1/IgA 抗体检测的临界rA值为0.26,即EBNA1/IgA rA≥0.26为阳性。

1.4 统计学处理

应用SPSS 13.0软件对变量进行正态性检验,多组中位数比较采用Kruskal-Wallis检验,两 组中位数比较采用Mann-Whitney检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

鼻咽癌患者不同分组EBNA1/IgA抗体rA值分布经正态性检验,资料属非正态分布(P<0.0 5)。鼻咽癌患者不同性别､年龄组EBNA1/IgA抗体水平见表1。鼻咽癌患者TNM分期及临床分 期EBNA1/IgA抗体水平见表2。

鼻咽癌患者男女间EBNA1/IgA抗体rA值比较,差异无统计学意义(z=1.801,P =0.072)。各年龄组EBNA1/IgA抗体rA值比较,差异无统计学意义(χ²=2.698,P=0. 441)。

鼻咽癌患者EBNA1/IgA抗体rA值,各T分期､N分期及临床分期间比较,差异有统计 学意义(χ 2=12.721,9.723,9.418;P=0.005,0.021,0.024);各M分期间比较,差异无统计学 意义( z=0.910,P=0.363)。早期鼻咽癌(临床Ⅰ､Ⅱ期)患者的EBNA1/IgA抗体rA值显 著低于晚期(临床Ⅲ､Ⅳ期)(z=2.482,P=0.013)。

3 讨论

鼻咽癌的特点是恶性程度高,发展快,常可在短期内或尚未出现耳鼻症状时,已经发展到了 晚 期,有些患者在鼻咽镜检查尚未见原发灶时,就有了颈淋巴结的转移。肿瘤部位的隐蔽或取 活检组织技术的差异,使鼻咽癌患者往往难以得到早期确诊和治疗。EBNA1作为EB病毒潜伏 期抗原之一,在鼻咽癌癌变前即可检测出,是人类B淋巴细胞受EB病毒感染后最早出现的抗 原之一[7]。因此,检测EB病毒潜伏抗原抗体EBNA1/IgA具有早期诊断的意义。

为探索鼻咽癌血清中EBNA1/IgA抗体及其临床分期的关系,笔者将211例鼻咽癌患者按“92分 期法”进行临床分期,用ELISA方法检测血清中EBNA1/IgA抗体,对其表达水平进行统计学分 析,发现EBNA1/IgA抗体表达与鼻咽癌患者性别､年龄无关,提示不同性别患者的血清EBNA1 /IgA含量基┍鞠嗤,不同年龄组的EBNA1/IgA抗体水平在统计学上均无差别。但鼻咽癌 患者 男性明显多于女性,显然鼻咽癌的发生可能与遗传因素有关,是否说明男性的鼻咽癌易感基 因容易受到EB病毒或其他因素诱发而突变值得探讨。

本研究中原发灶T1期的EBNA1/IgA抗体rA值明显低于T2､T3及T4期,淋 巴结转移N0期明显低 于N1､N2及N3期,可能是因为血清中EBNA1/IgA抗体与鼻咽癌组织负荷量和淋巴结转 移时刺 激特异性抗体的产生有关。临床Ⅰ､Ⅱ期的EBNA1/IgA抗体水平明显低于Ⅲ､Ⅳ期,显示在 早期鼻咽癌患者其临床表现较轻时,EBNA1/IgA抗体的表达相对较低。其原因可能是由于未 分化型非角化性癌(我国鼻咽癌高发区占绝大多数的病理类型)细胞内的EB病毒基本处于潜 伏期,并恒定表达EBNA1､EBERs等蛋白以维持其潜伏感染的状态[8];早期鼻咽癌 患者原 发病灶较小,颈部淋巴结转移程度较轻,因而EB病毒的EBNA1抗原表达可能也相对较少。在 有无远处转移M0､M1两组病例间差异无统计学意义,是否与两组病例数差距或是其他因 素影响有关,有待进一步研究。

参考文献:

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[8] BROOKS L,YAO Q Y,RICKINSON A B,et al.Epstein-Barr virus latent gene trans cription in nasopharyngeal carcinoma cells:coexpression of EBNA1,LMP1,and LMP 2 transcripts[J]. J Virol,1992,66(5):2689-2697.

(收稿日期: 2009-08-11)

[责任编辑 王慧瑾 邓德灵]