王　慧　黄和赞

【摘要】 目的 了解鼻腔-鼻窦葡萄球菌感染及耐药状况，为临床诊断治疗及防止医院感染提供依据。方法 对鼻腔-鼻窦分泌物标本分离葡萄球菌经API 20STAPH证实，再采用K-B纸片法头孢西丁（FOX）纸片法、苯唑西林（OXA）纸片法和肉汤稀释（MIC）法GPS药敏卡对耐甲氧西林葡萄球菌检测比较，并进行耐药性分析。结果 340株葡萄球菌中MRSA占67.54%（129/191），MRCNS占65.10%（97/149）（P>0.05）。FOX纸片法与OXA纸片法、MIC法检测MRSA的敏感性和特异性差异无统计学意义（P>0.05）；检测MRCNS的特异性FOX纸片法明显优于OXA纸片法（69.23%）和MIC法（59.62%）（P＜0.01），敏感性差异无统计学意义（P>0.05）。替考拉宁和万古霉素无耐药，替考拉宁有11株中敏；MRSA+MRCNS耐药率为11.5-97.34%高于MSSA+MSCNS耐药率3.51%～86.84%（P＜0.01），且多重耐药。结论 鼻腔-鼻窦耐甲氧西林葡萄球菌检出率高，而且耐药压力增大，检测MRSA和MRCNS应选择操作简单、敏感性和特异性高的FOX纸片法，治疗应根据药敏结果选择抗菌药物。

【关键词】 鼻窦;感染; 耐甲氧西林葡萄球菌; 耐药性

葡萄球菌是引起鼻腔、鼻窦和伤口感染的常见病原菌，近年来随着β-内酰胺类广谱抗菌药物广泛使用，导致产生mecA基因介导的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）增多，耐药程度日益严重并呈多重耐药，引起医院感染，给临床治疗带来极大困难^[1]。为了解鼻腔-鼻窦葡萄球菌感染状况，笔者从临床患者鼻腔-鼻窦分泌物标本分离葡萄球菌340株，经鉴定后采用K-B纸片法头孢西丁（FOX）纸片法，苯唑西林（OXA）纸片法和微量肉汤稀释（MIC）法GPS药敏卡检测），并对其耐药性进行比较分析。

1 资料与方法

1.1 菌株来源 2007年3月至2008年5月从南昌市第二医院耳鼻喉科-头颈外科鼻-鼻窦分泌物及鼻内镜手术的患者鼻-鼻窦分泌物标本中分离出葡萄球菌340株，其中金黄色葡萄球菌191株，凝固酶阴性葡萄球菌149株。质控菌株：金黄色葡萄球菌ATCC25923（甲氧西林敏）、ATCC433300（甲氧西林耐药）购自卫生部临床检验中心。

1.2 抗菌药物 FOX纸片（30μg/片）、OXA纸片（1μg/片）、青霉素、头孢唑啉、头孢三嗪、阿奇霉素、红霉素、庆大霉素、四环素、氯霉素、利福平、环丙沙星、左氧氟沙星、复方新诺明、替考拉宁、万古霉素共16种抗菌药物，购自天坛药物生物技术开发公司。API 20STAPHGPS药敏卡购自生物梅里埃公司。

1.3 耐甲氧西林葡萄球菌检测 ①菌株分离鉴定及药敏试验按操作常规进行，葡萄球菌再用API 20STAPH证实；②FOX纸片法、OXA纸片法、MIC法根据CLSI 2007年标准判断结果，FOX纸片法抑菌环直径≤19 mm 为MRSA，≥20 mm为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）；≤24 mm 为MRCNS，≥25 mm为甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌（MSCNS）。OXA纸片法抑菌环直径≤10 mm为MRSA，≥13 mm为MSSA；≤17 mm为MRCNS，≥18 mm为MSCNS；MIC法以≥4 μg/ml为MRSA，≤2 μg/ml为MSSA；≥0.5 μg/ml为MRCNS，≤0.25 μg/ml为MSCNS。

１.4 统计学方法 计数资料采用χ²检验。

２ 结果

2.1340株葡萄球菌FOX纸片法MRSA和MRCNS检出率（%）见表1。

2.2 FOX纸片法、OXA纸片法、MIC法检测MRSA、MRCNS敏感性和特异性结果 FOX纸片法、OXA纸片法、MIC法检测MRSA敏感性分别为100%、99.22%、97.67%，差异无统计学意义(χ²=1.004；3.035，均P>0.05)，检测MRCNS敏感性分别为100%、96.77%、98.39%差异无统计学意义(χ²=3.047；2.021，均P>0.05) 检测MRSA特异性分别为100%、96.91%、97.94%,差异无统计学意义(χ²=2.033；1.008，均P>0.05)检测MRCNS特异性分别为100%、69.23%、59.62%差异有统计学意义(χ²=18.909；26.313，均P＜0.01)见表2。

2.3 340株葡萄球菌对14种抗菌药物耐药结果 MRSA+MRCNS耐药率明显高于MSSA+MSCNS（P＜0.01） (红霉素差异无统计学意义P>0.05)。有6种抗生素同时耐药占52.3%。对替考拉宁有11株中敏，未检出替考拉宁和万古霉素耐药菌株。见表3。

3 讨论

葡萄球菌在20世纪80年代后感染率、耐药范围及程度逐年增加，特别是MRSA+MRCNS具有毒性、耐药广泛、疗效差易于传播等特点，引起急性、亚急性、慢性、急性复发性、慢性急性发作各型鼻腔、鼻窦炎症，成为院内感染和社区感染重要致病菌。MRSA、MRCNS检出率文献报道不一，陈俊^[2]等为37.6%、38.3%；张卉^[3]为53.85%、61.76%；本试验结果为67.54%、65.10%。检出率相互存在差异其原因可能与检测方法敏感性和特异性差异，病程标本选择差异及区域性差异有关。目前检测MRSA和MRCNS方法普遍采用OXA纸片法和MIC法（GPS药敏卡），检测MRSA的敏感性和特异性与陈颖^[4]报道的99.10%、100.00%和97.10%、100.00%结果相近，与FOX纸片法比较差异无统计学意义（P>0.05）。但FOX纸片法能检出低水平异质性MRSA，敏感性高。OXA纸片法和MIC法检测MRCNS特异性低，分别为69.23%和59.62%，有较高假阳性，临床容易导致误诊和耐药菌株产生，应引临床高度起重视。FOX纸片法检测MRCNS特异性明显优于OXA纸片法和MIC法（P＜0.01），但其敏感性差异无统计学意义（P>0.05），与文献报道相同^[5]。

染色体介导的基因编码PBP2a和质粒转导、转化或插入是导致葡萄球菌的耐药主要原因。340株葡萄球菌药敏结果显示，MRAS和MRCNS对14种抗菌药物耐药率>50%有7种（青霉素、阿奇霉素、红霉素、四环素、氯霉素、环丙沙星、左氧氟沙星），青霉素类、头孢菌素类、氯霉素类、多数氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类、喹诺酮类）体外敏感，临床治疗无效；MSSA+MSCNS耐药率>50%有3种（青霉素、阿奇霉素、红霉素）；葡萄球菌对利福平有较高敏感性。MRSA+MRCNS耐药率明显高于MSSA+MSCNS（P＜0.01），且多重耐药。有11株对替考拉宁中敏，提示对糖肽类抗生素耐药压力增大^[6]，未检出替考拉宁和万古霉素耐药菌株。

总之，鼻腔-鼻窦葡萄球菌MRSA和MRCNS检出率高，对多种抗生素耐药压力增大，应引起耳鼻咽喉-头颈外科医师的重视。鼻腔-鼻窦感染治疗前或术后出现不明原因发热、头痛、鼻分泌物明显增多的患者及时进行分泌物微生物培养，对MRSA和MRCNS分离鉴定，选择有效药物治疗，防止MRSA和MRCNS医源性感染。

参 考 文 献

［1］ 张文红. 耐甲氧西林葡萄球菌医院感染耐药性分析. 中华医院感染学杂志,2007，17（8）：998-999.

［2］ 陈俊，傅爱清，朱秋萍，等.慢性鼻窦炎耐甲氧西林葡萄球菌对抗生素的耐药分析.山东大学耳鼻喉眼学报,2007，21（2）:130-135.

［3］ 张卉. 葡萄球菌耐药性监测及分析. 实用医技杂志, 2006，13（08）：1284.

［4］ 陈颖，周建党，郭建军. 头孢西丁扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌异质性耐药菌株的评价.中南大学学报（医学版）,2007， 32(1): 179-181.

［5］ 赵瑞珍，陈乾，刘彬，等. 头孢西丁纸片法检测mecA基因介导的MRS. 中华医院感染杂志, 2006，16（07）：839-840.

［6］ 张远春，李爽，李凤莲，等.耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌对糖肽类耐药的检测与分析. 中华医院感染杂志,2007，17（9）:1152-1155.