林姿 何卫东 杜思哲

*基金项目：福建省自然科学基金（2021J01896）；福建省卫生健康青年科研课题（2021QNA054）

第一作者简介：林姿（1987-），女，主治医师，研究方向：糖尿病及其并发症中医药防治。

摘要：目的  研究地红方对糖尿病肾病细胞模型氧化应激损伤的影响。方法  地红方含药血清制备，小鼠肾小球系膜细胞常规培养、传代。按以下分组：对照组（5.5mmol/L葡萄糖+正常血清）、高糖组（30mmol/L葡萄糖+正常血清）、地红方低剂量组（30mmol/L葡萄糖+5%地红方含药血清）、地红方中剂量组（30mmol/L葡萄糖+10%地红方含药血清）、地红方高剂量组（30mmol/L葡萄糖+20%地红方含药血清）。采用实时荧光定量PCR检测miR-133b、DUSP1 mRNA表达。Western blotting检测DUSP1、p-JNK、Drp1、Fis1蛋白表达。Elisa检测SOD、MDA表达。结果  与高糖组比较，地红方组miR-133b、MDA、p-JNK、Drp1、Fis1表达明显下降（P<0.05），而DUSP1、SOD表达显著升高（P<0.05）。结论  地红方可通过miR-133b/DUSP1/JNK通路调控线粒体分裂改善糖尿病肾病氧化应激损伤。

关键词：地红方；糖尿病肾病；miR-133b；DUSP1；JNK；氧化应激

中图分类号：R587.1    文献标志码：A    文章编号：1007-2349（2024）05-0080-05

Study on the Intervention of Didong Decoction on Oxidative Stress Injuryof Diabetic Nephropathy through miR-133b/DUSP1/JNK Pathway

LIN Zi， HE Wei-dong， DU Si-zhe

（The Peoples Hospital Affiliated to Fujian University of Traditional Chinese Medicine， Fuzhou 350004， China）

【Abstract】Objective： To study the effect of Dihong Decoction on oxidative stress injury of diabetic nephropathy cell model. Methods： The serum containing Dihong Decoction was prepared， and mouse mesangial cells were cultured and passed through routine. Groups were divided as follows， control group （5.5mmol/L glucose+normal serum）， high glucose group （30mmol/L glucose+normal serum）， low dose Dihong Decoction group （30mmol/L glucose+5% Dihong Decoction containing serum）， medium dose Dihong Decoction group （30mmol/L glucose+10% Dihong Decoction containing serum）， and high dose Dihong Decoction group （30mm ol/L glucose +20% Dihong Decoction containing serum）. Real-time fluorescent quantitative PCR was used to detect the mRNA expression of miR-133b and DUSP1. Western blotting to detect the expression of DUSP1， p-JNK， Drp1 and Fis1 proteins. The expressions of SOD and MDA were detected by Elisa. Results： Compared with that of the high glucose group， the expressions of miR-133b， MDA， P-JNK， Drp1 and Fis1 in Dihong Decoction groups were significantly decreased （P<0.05）， while the expressions of DUSP1 and SOD were significantly increased （P<0.05）. Conclusion： Dihong Decoction can regulate mitochondrial division through miR-133b/DUSP1/JNK pathway to improve oxidative stress injury in diabetic nephropathy.

【Key words】Dihong Decoction; Diabetic Nephropathy; miR-133b; DUSP1; JNK; Oxidative Stress

糖尿病腎病（diabetic nephropathy，DN）是由糖尿病（diabetes mellitus，DM）所致的慢性肾脏病（chronic kidney disease，CKD），已成为 CKD 和终末期肾病的主要病因，增加了 DM 的死亡率［1-2］，因此及时防治对于延缓 DN具有极其重大意义。地红方（滋阴活血调糖饮）是我院多年来用于防治 DN 验方，临床效果显著。地红方由六味地黄汤、桃红四物汤化裁而来，滋阴活血之力强，可作为 DN 滋阴活血的代表方。我们团队在前期临床研究中表明地红方可改善DM患者氧化应激指标及炎症因子［3］，发现地红方能够改善DM血管内皮细胞氧化应激损伤［4］。在前期研究的基础上，本研究探讨地红方基于miR-133b/双特异性磷酸酶1（dual specificity phosphatase 1，DUSP1）/c-Jun氨基端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK）通路调控线粒体分裂改善DN氧化应激损伤的机制。

1  材料与方法

1.1  实验动物  SPF 级雄性SD大鼠14只，体质量（180±20）g，适应性喂养1周后，分笼饲养。……