雷 雯， 解 龙， 宋明鸣

（上海化工研究院有限公司 上海市稳定同位素检测及应用研发专业技术服务平台, 上海 200062）

尿素-13C 是尿素[13C]呼气试验诊断试剂的有效成份，被广泛应用于临床诊断幽门螺杆菌（helicobacter pylori, Hp）感染[1-2]，Hp 是目前已知胃中唯一存活的微生物，当患者口服尿素-13C 药物后，胃中的Hp 含有人类细胞中不存在的高活性脲酶，在胃酸存在下可以将尿素-13C 分解成13CO2，13CO2被小肠上段吸收后进入血液循环，到达肺部随呼气排出[3-4]。使用专业的质谱仪或13C 红外光谱仪分析服药前后呼气样本，当基线差值（delta over baseline，DOB）≥4 可判定为阳性[5-7]，即患者感染Hp，该方法因具有特异性高、无损伤、无放射性、快速等优势被公认为胃部感染Hp 诊断的金标准[8-9]。呼气试验诊断试剂及原料药尿素-13C 中同位素丰度的准确测定直接影响到临床检测结果，因此准确测定尿素-13C 的同位素丰度显得尤为重要。

现有尿素-13C 同位素丰度检测方法主要有液相色谱串联质谱法[10]、气相色谱串联质谱法[11]、傅立叶变换-离子回旋共振质谱法[12]和气体同位素质谱法[13]等。尿素-13C 原料药同位素丰度检测标准主要有美国药典方法和行业标准方法[14]，美国药典方法采用气相色谱串联质谱法，早期的2014 版美国药典[15]方法中无需衍生化处理，直接测定尿素-13C 的同位素丰度，但现行2022 版的美国药典方法[16]中采用衍生化的方法，衍生化步骤相对繁琐。行业标准方法的原理是利用亚硝酸具有强氧化性[13]，将尿素-13C 氧化生成13CO2，但在反应过程中亚硝酸易分解生成NO2等杂质气体，同时该方法也不具有选择性。……