赵曦雯 张玉梅 刘慧

肺癌是我国最常见的癌症，2020 年我国肺癌新发病例82 万例，肺癌相关死亡病例72 万例［1］。肺癌的早期诊断较为困难，大多数患者在出现症状时已有转移迹象，提高了治疗难度，不利于患者预后。因此，需提高早期诊断的准确率以改善患者预后。病理活检仍然是肺癌分期诊断的金标准，但在病理活检前需依靠其他检查评估病情。血清学检测因其具有非侵入性、简便、快捷等优点成为肺癌病情评估的重要参考指标。肿瘤转移相关基因1（metastasis-associated protein 1，MTA1）与肿瘤侵袭、迁移以及包括乳腺癌、前列腺癌等多种癌症患者不良预后相关［2］。研究表明，磷酸酯酶与张力蛋白同源物（phosphatase and tensin homolog，PTEN）通过抑制磷脂酰肌醇3 激酶（Phosphatidylinositol 3 kinase，PI3K）/蛋白激酶B（Protein kinase B，Akt）信号通路，发挥抑制肿瘤细胞侵袭、迁移的作用，具有癌症靶向治疗的潜力［3-4］。程序性细胞死亡配体1（programmed cell death protein ligand 1，PD-L1）是T 细胞中的膜蛋白程序性细胞死亡蛋白1（programmed cell death protein 1，PD1）的配体，二者结合能够抑制T 细胞活化，PD-L1 亦能通过与T 细胞上的抗原分化簇相互作用来达到抑制T 细胞活性的作用，进而参与癌症中的免疫调节［5］。本研究将通过检测老年肺癌患者血清MTA1、PTEN、PD-L1 表达水平，探讨其对患者术前分期及淋巴结转移中的临床价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019 年1 月至2021 年1 月于三亚中心医院就诊的老年肺癌患者217 例作为观察组。纳入标准：①年龄≥60 岁；②符合肺癌诊断标准［6］；③符合手术适应症，预计生存期≥3 个月，卡氏功能评分70 分以上；④入组前未经肺癌相关治疗；⑤患者或家属对本研究知情同意。排除标准：①合并其他恶性肿瘤；②合并其他脏器严重原发病；③合并精神系统疾病。纳入同期体检健康老年人62 名作为对照组。观察组男164 例，女53 例，年龄（69.05±3.74）岁，对照组男40 名，女22 名，年龄（68.92±3.89）。两组年龄、性别比较差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究经伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 资料收集

收集观察组患者年龄、性别、病理类型、肿瘤大小、肿瘤分化、淋巴结转移、病理分期、合并基础疾病、吸烟史等一般资料。

1.2.2 血清MTA1、PTEN、PD-L1 表达检测

入组后，采集空腹静脉血5 mL，3 000 r/min 离心15 min 收集血清，离心半径为10 cm，采用酶联免疫法检测血清MTA1、PTEN、PD-L1 表达（试剂盒上海佰利莱生物科技有限公司），按照试剂盒要求进行稀释、上样等操作后，在酶标仪上检测450 nm 处吸光度，根据标准曲线计算MTA1、PTEN、PD-L1 表达水平。

1.3 统计学分析

采用SPSS 25.0 软件分析，计数资料以n（%）表示，组间比较采用χ2检验，等级资料采用Wilcoxon秩和检验，计量资料以（）表示，两组间比较独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t检验，绘制ROC 曲线分析MTA1、PTEN、PD-L1 表达水平对老年肺癌患者淋巴结转移的诊断价值，以P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组MTA1、PTEN、PD-L1 表达比较

与对照组比较，观察组血清MTA1、PD-L1 表达水平均升高，PTEN 表达水平降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组MTA1、PTEN、PD-L1 表达比较［（），pg/mL］Table 1 Comparison of MTA1，PTEN and PD-L1 expression between the two groups［（），pg/mL］

表1 两组MTA1、PTEN、PD-L1 表达比较［（），pg/mL］Table 1 Comparison of MTA1，PTEN and PD-L1 expression between the two groups［（），pg/mL］

2.2 不同术前分期老年肺癌患者临床病理参数比较

217 例老年肺癌患者中，Ⅰ期34 例，Ⅱ期67例，Ⅲa 期116 例。不同术前分期老年肺癌患者肿瘤大小、肿瘤分化程度、淋巴结转移情况比较差异有统计学意义（P＜0.05），性别、年龄、病理类型、合并基础疾病及吸烟史情况比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 不同术前分期老年肺癌患者临床病理参数比较［n（%），（）］Table 2 Comparison of clinicopathological parameters in elderly patients with different preoperative stages of lung cancer［n（%），（）］

表2 不同术前分期老年肺癌患者临床病理参数比较［n（%），（）］Table 2 Comparison of clinicopathological parameters in elderly patients with different preoperative stages of lung cancer［n（%），（）］

2.3 不同术前分期老年肺癌患者MTA1、PTEN、PD-L1 表达比较

不同术前分期老年肺癌患者MTA1、PTEN、PD-L1 表达水平比较差异有统计学意义（P＜0.05），其中MTA1、PD-L1 表达水平随术前分期升高而升高（P＜0.05），PTEN 表达水平随随术前分期升高而降低（P＜0.05）。见表3。

表3 不同术前分期老年肺癌患者MTA1、PTEN、PD-L1表达比较［（），pg/mL］Table 3 Comparison of MTA1，PTEN and PD-L1 expression in elderly lung cancer patients with different preoperative stages［（），pg/mL］

表3 不同术前分期老年肺癌患者MTA1、PTEN、PD-L1表达比较［（），pg/mL］Table 3 Comparison of MTA1，PTEN and PD-L1 expression in elderly lung cancer patients with different preoperative stages［（），pg/mL］

注：与术前分期Ⅰ期患者比较，aP＜0.05；与术前分期Ⅱ期患者比较，bP＜0.05。

2.4 不同淋巴结转移状态老年肺癌患者MTA1、PTEN、PD-L1 表达比较

217 例老年肺癌患者中淋巴转移患者114例。与非淋巴转移组比较，淋巴结转移组患者MTA1、PD-L1 表达水平升高，PTEN 表达水平降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表4。

表4 不同淋巴结转移状态老年肺癌患者MTA1、PTEN、PD-L1 表达比较［（），pg/mL］Table 4 Comparison of MTA1，PTEN and PD-L1 expression in elderly lung cancer patients with different lymph node metastasis states［（），pg/mL］

表4 不同淋巴结转移状态老年肺癌患者MTA1、PTEN、PD-L1 表达比较［（），pg/mL］Table 4 Comparison of MTA1，PTEN and PD-L1 expression in elderly lung cancer patients with different lymph node metastasis states［（），pg/mL］

2.5 MTA1、PTEN、PD-L1 对术前老年肺癌患者淋巴结转移诊断效能分析

ROC 曲线结果显示，MTA1、PTEN、PD-L1 单一及三者联合诊断的AUC 分别为0.972、0.737、0.806 和0.934，其中三者联合诊断的敏感度、特异度最高，分别为0.904 和0.884，MTA1、PTEN、PD-L1的cut-off值分别 为202.92 pg/mL、3.26 pg/mL、345.45 pg/mL（P＜0.05）。见表5、图1。

图1 ROC 曲线图Figure 1 ROC curve

表5 MTA1、PTEN、PD-L1 对术前老年肺癌患者淋巴结转移诊断效能分析Table 5 Analysis of efficacy of MTA1，PTEN and PD-L1 in preoperative diagnosis of lymph node metastasis in elderly patients with lung cancer

3 讨论

老年肺癌患者的生存情况很大程度取决于诊断时癌症的发展阶段，晚期肺癌的生存率较低，因此亟需寻找可用于早期肺癌诊断和病情监测的非侵入性标志物，以提高患者生存率。本研究中，老年肺癌患者血清MTA1 表达水平高于健康老年人群，且随术前分期升高而升高，在淋巴结转移患者中亦呈现高表达。MTA1 调节部分参与有丝分裂调节基因的mRNA 的合成和剪接，在多种癌症中均具有促进肿瘤细胞生长和增殖的作用［7］。杨淑慧等［8］研究发现，MTA1 在肺癌组织中高表达，且能够通过调控肿瘤细胞对缺氧环境的适应性，上调异黏蛋白表达，进而达到促进肺癌细胞增殖的目的。此外，MTA1 参与肿瘤细胞上皮间质转化，促进细胞迁移和侵袭，进而促进肿瘤转移［9］。邓万宁等［10］研究发现，肺癌组织中MTA1 的表达水平与淋巴结转移以及TNM 分期相关，虽与本研究采用的血清样本来源不同，但结论相一致，表明老年肺癌患者血清MTA1 表达水平可能与肺癌术前分期以及淋巴结转移相关。

PTEN是一种抑癌基因，PTEN缺失在多种恶性肿瘤发生发展中均广泛存在。本研究中，老年肺癌患者血清PTEN 表达水平低于健康老年人群，且随术前分期升高而降低，淋巴结转移患者血清PTEN 水平低于非淋巴结转移患者。PTEN 具有介导PI3K/Akt 信号通路激活的功能，在非小细胞肺癌患者和动物模型中均存在PTEN 低表达，其抑制细胞增殖和迁移作用显著降低［11］。亦有研究表明，负调控PTEN/PI3K/Akt 信号通路能够抑制非小细胞肺癌细胞活性和迁移［12］。既往研究发现，抑制MTA1/组蛋白脱乙酰酶复合体能够增强PTEN 的乙酰化和活化水平，从而激活PI3K/Akt信号通路，促进肿瘤细胞增殖和转移［13］。结合本研究结果和既往研究，笔者认为老年肺癌患者血清PTEN 表达水平可能与肺癌术前分期以及淋巴结转移相关。

PD-L1 主要在肿瘤细胞、免疫细胞、内皮细胞中表达，其表达水平在肿瘤进展过程中通过基因突变、转录调控而上调，进而促进肿瘤细胞免疫逃避［14］。本研究中，老年肺癌患者血清PD-L1 表达水平高于健康老年人群，且随术前分期升高而升高，在淋巴结转移患者中呈高表达，提示老年肺癌患者血清PD-L1 表达水平可能与肺癌术前分期以及淋巴结转移相关。既往研究发现，非小细胞肺癌患者中PD-L1 呈高表达，与临床分期相关［15］，与本研究结果相似。肿瘤细胞外泌体中PD-L1 呈高表达，与PD-1 结合诱导T 细胞程序性死亡，机体免疫功能降低，导致肿瘤发展进程加速，促进淋巴结转移［16］。

本研究ROC 曲线结果显示，MTA1、PTEN、PD-L1 对老年肺癌淋巴结转移的AUC 经均高于0.7，其中三指标联合诊断AUC 高于单一指标，表明MTA1、PTEN、PD-L1 联合检测对老年肺癌淋巴结转移具有较好的诊断参考价值。

综上所述，不同术前分期和不同淋巴结转移状态的老年肺癌患者MTA1、PTEN、PD-L1 表达水平存在显著差异，三指标联合诊断对肺癌淋巴结转移的评估具有参考价值。