常 苗, 项 坤, 何佳萌, 梁安平, 花欣怡, 刘新荣, 江育虹, 茆灿泉

(西南交通大学生命科学与工程学院, 成都 610031)

叉头盒(Forkhead box, FOX)蛋白属于进化高度保守的转录因子超家族[1],在细胞稳态和发育过程中可调控多种转录途径并发挥生物学效应[2]。在FOX家族成员中,叉头盒M1 (Forkhead box M1, FoxM1)是一种重要的有丝分裂调控蛋白,在多种细胞(如上皮细胞、T细胞、B细胞和树突状细胞)的细胞周期调控中起到重要作用[3-4],如通过调控细胞周期蛋白D1(CCND1)、细胞周期蛋白B1(CCNB1)和Polo样激酶1(PLK1)参与S/G/M期转换;同时,FoxM1也能够通过上调BIRC5从而调控有丝分裂纺锤体功能及其抗凋亡活性[5]。FoxM1在肺纤维化、心脏纤维化和肝纤维化等纤维化疾病中存在潜在功能,在这些疾病中,FoxM1的表达显著增加,其下游通路及与多种纤维化效应因子相关的信号通路,如TGF-β1/Smad、PI3K/Akt、p38 MAPK或WNT/β-catenin均显著上调[6-7]。针对FoxM1的靶向调控,大多数研究均集中于大分子蛋白或非编码RNA等领域,靶向多肽的研究报道较少。

本课题组前期通过噬菌体展示技术筛选和获得能够靶向结合FoxM1的DNA结合区(FoxM1-DBD)的P201多肽并显示具有强的抗肿瘤活性[8-9]。鉴于FoxM1表达与纤维化的密切相关性,本研究基于P201的优化肽9R-P49,研究其对FoxM1的调控作用及其在成纤维细胞L929细胞中的作用机制,最后结合转录组数据,探究9R-P49在成纤维细胞中的生物学功能,为抗纤维化靶向FoxM1潜在多肽药物的研发提供重要基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞

小鼠成纤维L929细胞由四川大学华西医院教育部移植工程与移植免疫重点实验室提供。

1.1.2 试剂与仪器

多肽……