傅文婷,江惠华,钟文谣,李铭臻

脆性位点是人类基因组中的特定染色体区域,在缺乏叶酸和胸苷的培养基中易形成如缺失、裂隙和无着丝粒片段等染色体异常。脆性位点根据其在群体中的频率分为罕见型和普通型两大类。罕见型脆性位点在人群中的发生率<5 %[1]。有学者认为脆性位点是染色体正常变异,但有报道认为脆性位点携带者的流产率和后代的染色体异常率增高[2]。在16号染色体上有三类脆性部位,包括对叶酸敏感的FRA16A、可用远霉素A诱导的FRA16B和FRA16E[3],其中FRA16B(16q22.1)最为常见。有研究认为FRA16B与hsa-mir-328、hsa-mir-140 miRNA有关联[4],并与复发性流产和男性不育相关[5]。本文应用染色体G显带技术和基因组拷贝数变异测序,确诊1例男性fra16q22携带患者,现报道如下。

1 病例资料

患者,男,37岁,身高172 cm,体重68 kg,平素体健,无既往病史。2017年结婚,性生活正常,未避孕未育。精子总数417.54百万/mL,精子存活率41%,精子浓度102.2百万/mL,总活力(PR+NP)百分率32.7%,正常形态10个(4.8%),异常形态197个(95.2%),头部缺陷190个(91.8%),颈部和中段缺陷92个(44.4%),主段缺陷45个(21.7%)。临床诊断为不育症和畸形精子症。内分泌激素、Hb电泳、地中海贫血基因和致畸4项结果未见异常。妻子染色体核型、地中海贫血、内分泌激素、抗子宫内膜抗体和抗精子抗体等检查均未见异常。

1.1 检测方法

1.1.1 染色体G显带分析 采用常规染色体G显带核型分析技术,按照《人类细胞基因组学国际命名体系》(ISCN2020)的标准进行核型分析,计数20个分裂相,分析5个核型,如怀疑嵌合体,则加数到100个分裂相。第一次培养分析发现核型异常后,考虑脆性位点易受培养液和实验过程的影响,遂通知患者重新采血,用两个不同厂家的培养液进行第二次常规培养,加大计数到131个分裂相,并分析了13个核型。

1.1.2 基因组拷贝数变异测序 将患者外周血进行核酸提取和纯化;对血液中提取的人基因组DNA酶切打断,在其两端添加测序接头,再通过磁珠分选富集200～500 bp大小的文库片段,构建好测序文库。利用DNA纳米球技术对测序文库进行扩增,形成测序模板,通过基于联合探针锚定聚合测序技术的基因测序仪进行测序。……