陈美丽,侯继鹏,邵长健

(鲁南制药集团股份有限公司 国家手性制药工程技术研究中心,山东 临沂 273400)

盐酸多奈哌齐,是一种长效的阿尔茨海默病(AD)的对症治疗药,是第二代胆碱酯酶(ChE)抑制剂,选择性强,作用时间长。盐酸多奈哌齐是日本卫材制药公司开发,1997年首次在美国上市。本品对神经元乙酰胆碱酯酶具有高度选择性,无肝脏毒性,临床用于治疗AD。口崩片为口腔速释给药系统一种,服用不需用水,为患者提供了一种新的药物服用方式,特别适用于有吞咽困难、卧床病人和老幼病人[1]。有关研究表明,口崩片临床上更容易被患者接受[2],不但方便急性发作时使用,而且还减轻了护士的负担[3]。

目前,口腔崩解片常用的制备技术最初主要有压片法和冻干法两种,其中压片法又分为直接压片法、湿法制粒压片法、干法制粒法等等,随后又出现了许多新的技术:基于预混辅料的粉末直压、微波照射、3D打印技术、固态溶液技术等,但目前上市的产品多为压片法制备[4]。目前欧美日上市的口腔崩解片主要采用冻干法或直接压片法,直接压片法是制备崩解片为简单的方式,但对于原辅料的粉体学性质尤其是流动性存在特定要求,为了获得较好的流动性辅料用量较大,片重较大。冷冻干燥法是在低温条件下,将药物定量分装于一定模具中冷冻成固态,再通过升华作用去除水分。使用该种方法制备的口崩片因富含孔隙及可溶性基质,崩解更迅速,改善服药顺应性,更方便老人及儿童服用。并对本法制得的盐酸多奈哌齐口崩片进行了初步质量评价[5]。

1 仪器与试药

1.1 仪器

冷冻干燥机(宁波新芝生物科技股份有限公司);T25高剪切混合乳化机(德国IKA 公司);HD2004W电动搅拌机(上海司乐仪器有限公司);KB-1口崩片崩解时限测定仪(天津市天大天发科技有限公司);1200型高效液相色谱仪(美国Agilent公司);RC806型溶出度测定仪(天津市天大天发科技有限公司)。

1.2 试药

盐酸多奈哌齐(迪嘉药业集团股份有限公司);明胶200LB(罗赛洛明胶有限公司);普鲁兰多糖(山东康纳馨生物科技股份有限公司);右旋糖酐40(山东金洋药业有限公司);甘氨酸(天津天药药业有限公司);甘露醇(石家庄华旭药业有限责任公司);阿斯巴甜(湖南九典宏阳制药有限公司)。

2 处方筛选

2.1 制备工艺

按照处方量称取明胶(或其他骨架支撑剂)及适量纯化水,将明胶(其他骨架支撑剂)加入到纯化水中,经65 ℃水浴加热(其他骨架支撑剂搅拌500 r/min)溶解,溶液冷却至25 ℃以下;称取处方量甘露醇和盐酸多奈哌齐,加入到上述溶液中,剪切4 000 r/min,剪切5 min使其完全溶解;加纯化水定容,搅拌速度调至500 r/min,搅拌5 min。对溶液进行真空脱气后灌装,灌装结束后放入-40 ℃冰箱预冻20 min。随后将样品放入冻干机中进行真空干燥。

2.2 盐酸多奈哌齐口崩片评价指标

2.2.1 外观性状

表面平整,外观应饱满,色泽均一。

2.2.2 口感

选3名志愿者进行评价,将自制制剂置于舌上,待药片完全崩解后,吐出,温水漱口,记录口感。

2.2.3 崩解时限[6]

口崩片与普通片剂的主要质量控制指标区别为崩解时限,国外对口崩片的崩解时限一般要求在15 s,我国要求在1 min内完全崩解。参考国内外口崩片崩解时限相关文献[7-9],最终确定按《中国药典》2020年版四部通则0921口崩片崩解时限检查法进行测定,应在60 s内崩解。每个处方测6片。

2.2.4 溶出曲线[10]

照日本仿制药厂家盐酸多奈哌齐口崩片溶出度测定方法要求,第二法(桨法),转速:50 r/min,介质:pH值1.2盐酸介质、pH值3.0醋酸盐缓冲液、pH值6.8磷酸盐缓冲溶液,体积900 mL,水浴温度:(37±0.5) ℃,分别在5,10,15,20,30,45,60 min取样,取样5 mL,经0.45 μm微孔滤膜过滤,取续滤液作为供试品溶液;另取对照品适量,配制成浓度为5.5 μg/mL。分别取上述两种溶液,按照如下色谱条件:C18(150 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈-水-高氯酸(V乙腈∶V水∶V高氯酸=350∶650∶1),流速:1.0 mL/min;检测波长:271 nm;进样量:20 μL,计算溶出度。

2.3 处方的初步筛选与优化

冻干口崩片的处方组成为主药,骨架支撑剂及其他辅料。常见的骨架支撑剂包括:多元醇类(甘露醇、山梨醇等)、多糖类(普鲁兰、蔗糖、乳糖等)、氨基酸类(甘氨酸等)、胶类(明胶、阿拉伯胶、黄原胶)、聚合物类(右旋糖酐、聚乙烯吡咯烷酮等)。在实际生产中常选择一种或合适比例的几种混合物进行添加,用以保持药物混悬液的稳定性、支撑骨架结构、增加成品硬度。

2.3.1 冻干骨架支撑剂的筛选

参考已上市冻干口崩片处方,多选用明胶、甘露醇做骨架支撑剂。考虑到明胶容易产生交联,并且存在传播病毒风险,对其他类型的骨架支撑剂也进行了筛选。

对盐酸多奈哌齐10 mg规格口崩片进行处方筛选,初步确定片重为35 mg,甘露醇作为其中骨架支撑剂之一,对其他骨架支撑剂明胶、普鲁兰多糖、甘氨酸、右旋糖酐40进行了考察,结果见表1。

表1 冻干骨架剂的选择

表1结果显示,明胶成型性好,但口感稍差,黏腻感较重;普鲁兰多糖成型性与口感均较好;甘氨酸和右旋糖酐40成型性一般,口感一般。综合比较,最终选择普鲁兰多糖作为另一骨架支撑剂。

2.3.2 处方用量的筛选

在辅料选择的基础上,对影响口崩片质量的主要因素普鲁兰多糖用量(A)、纯化水用量(B)、阿斯巴甜用量(C)以此三个因素,取3个水平(因素水平见表2)。

表2 因素水平表

本实验进一步采用正交设计法按L9(33)正交表设计三因素三水平的正交试验,以口崩片外观、口感、崩解时间为主要考察指标,优化处方;外观评价指标为表面是否平整及评分1～5分;口感评价指标为口腔内崩解时间及味道评分1～5分;崩解时限评价指标为崩解快慢1～5分;所有考察项目5分最优。试验结果与分析见表3。

表3 正交试验结果与分析

由表3见,实验5对应的制剂各项指标最好,本实验中普鲁兰用量为主要因素,处方最优组合为A2B2C3。

2.4 工艺优化

在冷冻干燥过程中,物料的共晶点和共熔点是冻干工艺中最为重要的两个参数。物料预冻温度要低于物料共晶点5～10 ℃,保证物料完全冻结,预冻温度过低,增加生产成本;预冻温度高于共晶点,则物料中的水分不能完全冻结,以至于水分不能完全以冰的形式升华,干燥过程容易发生局部沸腾和起泡现象,导致物料发生收缩和失形等质量问题。干燥过程中,随温度逐渐升高,完全凝固的溶质和溶剂开始融化,此时温度即为共熔点。升华干燥时物料温度不能高于其共熔点,否则物料会融化,导致物料沸腾,在物料内部产生气泡、充气膨胀或干缩等现象,影响冻干制品的质量[11-12]。

对处方确定后的样品进行DSC检测,共晶点检测结果如图1所示。

图1 DSC检测图

根据检测数据设定冻干曲线,以外观,崩解时限及水分为检测指标,对比不同冻干曲线样品,见表4。

表4 冻干曲线设置

由表4可见,-30 ℃进箱,温度稍高,与共晶点接近,片子在进箱过程中有融化现象,维持30 min过程中,仍未冻实,干燥过程中发生气泡现象。-40 ℃进箱,温度合适,曲线2与曲线3相比,水分差别不大,选用曲线2作为最终曲线。

3 考察

3.1 放大三批检测结果

采用冷冻干燥法制备的口崩片,崩解明显比普通压片法制备的口崩片快。采用最终确定的处方工艺平行制备三批样品,对样品进行口感,崩解时限及溶出度检测[7]。各检测指标如表5所示。

表5 放大三批样品质量研究结果

3.2 本品与上市品进行溶出曲线比较

考察自研制剂,对比不同溶出介质中的溶出曲线。结果表明,自研制剂崩解及溶出均快于市售制剂[10],见图2。

图2 自研制剂与市售制剂不同介质中的溶出曲线图

4 讨论

盐酸多奈哌齐口崩片采取冻干工艺试制,无需添加大量填充剂与崩解剂,辅料用量少,片型小,可实现无水吞服,服用更方便。通过放大生产及稳定性考察,验证了处方工艺的重现性及稳定性,结果令人满意,可用于大规模生产。