刘文卿, 布雨鑫, 闫承慧, 赵桂英, 李 萍, 刘 丹

北部战区总医院 心血管内科,辽宁 沈阳 110016

肝功能测定对肝系统疾病与其他药物在肝代谢造成损伤的变化具有特殊的早期灵敏度,通过检测血清中的肝酶与胆红素等指标可以评估肝受损程度[1]。包括低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)在内的血脂代谢异常被认为是心血管疾病的独立危险因素[2]。降低LDL-C水平已成为降低心血管疾病发病率与病死率的基石[3-10]。既往研究多对48 h内标本保存条件进行分析,而对标本保存时间>1周的保存方式研究较少[11-16]。本研究对50例冠心病患者的血清标本分别于4℃与-20℃保存12 d后进行肝功能、血脂等生化指标检测,旨在探讨不同标本保存条件对血清生化指标的影响。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取北部战区总医院心血管内科自2022年5月至2023年2月收治的50例行常规生化检验的冠心病患者为研究对象。纳入标准:首次入院;无重大疾病手术史及过敏史。排除标准:严重的肝肾功能损伤、血液系统疾病、恶性肿瘤者;服用可能对检测指标造成异常药物者。其中,男性25例,女性25例;年龄33～57岁,平均年龄(49.32±5.55)岁。本研究经医院伦理委员会批准。所有患者均签署知情同意书。

1.2 研究方法 采集标本前1 d,告知患者空腹8 h以上。采用分离胶采血管采集血标本5 ml,应用罗氏公司Roche Cobas6000 c 501全自动生化分析仪,全部试剂均采用罗氏公司的检测试剂,并确保定标液及质控品均在有效期内,具有良好的溯源性。离心后,抽取部分血清测定生化九项检验结果作为即测值(设为即测组)。其余标本分装至2支离心管内,1管以4℃密封冷藏保存(设为A组),1管以-20℃密封冷冻保存(设为B组)。12 d后,取出2管室温平衡融化后,再次进行生化九项检验。测定并比较即测组、A组、B组丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草氨酸氨基转移酶(oryzanol aminotransferase,AST)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)、甘油三酯(triacylglycerol,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、LDL-C、超敏C反应蛋白(high sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)。计算每个标本与即测值的变异系数(variable coefficient,CV),并记录其中的最大变异系数(CVmax),并将其与室内质控允许最大变异系数(CV室内)、常规项目质量指标允许最大变异系数(CV指标)进行比较[13-14]。

2 结果

2.1 即测组、A组、B组生化九项检验结果比较 即测组、A组、B组ALT、AST、TBIL、DBIL、TG、TC、HDL-C、LDL-C、hs-CRP结果比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 即测组、A组、B组生化九项检验结果比较

2.2 CVmax、CV室内、CV指标结果比较 CVmax均小于或等于CV室内、CV指标,标本保存12 d后的CV在行业规定认可的波动范围内。见表2。

表2 CVmax、CV室内、CV指标结果比较/%

3 讨论

通常认为,血清在-80℃冰箱内各项生化指标稳定性均较为可靠,但对于-20℃或4℃情况下标本的稳定性尚存争议。有研究报道,样本于4℃保存时间>24 h,样本检测数据与即测数据偏差超出CV允许范围,不具备临床分析价值[6-8]。另有研究报道,于-20℃冷冻标本结果稳定保存至少1周[11-12]。既往研究多采用肝素抗凝或者自然凝固,血清与血细胞分离不彻底[17-20]。未完全分隔开的血清标本随时间延长细胞破坏,改变了血清成分组成,可能为结果变化的主要因素。

本研究结果显示,即测组、A组、B组ALT、AST、TBIL、DBIL、TG、TC、HDL-C、LDL-C、hs-CRP结果比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。这提示,A组、B组两种保存方式对生化九项检验结果影响轻微,结果均与即测组接近,两种保存方式下结果均足够稳定。本研究结果显示,以4℃密封冷藏保存标本12 d后CV未超过行业标准。这提示,分离冷藏标本指标精密度良好,接近抽血即测指标,不因放置时间延长发生影响临床关键诊断的判定,同样能作为疾病的诊断依据。本研究结果显示,以-20℃密封冷冻保存标本在12 d后CV同样未超过行业标准。这表明,密封的-20℃标本保留了标本的化学稳定性,并没有因为低温使有效成分破坏,可能与选用指标有关,对一些化学本质不稳定的指标可能得出不一样的结论。冷藏标本稳定性提升的主要原因可能包括:采用分离胶采血管后,分离胶可以将血清及血细胞在离心机的作用下稳定分离,避免血细胞中组分破坏,内容物释放,与血清中相同物质混合,造成结果偏差;密封离心管封闭较好,避免了血清中的水分自然蒸发,引起血清结果浓缩,导致结果异常现象的发生。

综上所述,血清标本于4℃与-20℃密封保存12 d后,血清生化检测结果依旧稳定,可作为不满足即测条件标本测定的补充方案。