谢宜名 岳璐茜 李宗莉 张月君 孙向红

(青岛大学附属医院药剂科，山东 青岛 266555)

临床上慢性萎缩性胃炎(Chronic atrophic gastritis，CAG)是消化系统常见病、难治病及多发病，全球发病率呈逐年上升的趋势，患者主要临床表现为上腹部不适、胀满、嗳气、纳差等[1-3]。CAG伴肠上皮化生是胃癌的癌前病变，目前尚未发现有特异性药物可扭转CAG向胃癌的转变。近年来，传统中医药在治疗CAG方面取得了较大进展[4-5]，中药逆萎康(雪胆15 g，黄芪10 g，老龙皮10 g，朱砂七6 g，半枝莲15 g，海螵蛸10 g)是根据多年临床经验研制出的中药制剂，并且已经申请了中国专利(专利号201210315363)，经过临床应用多年，患者疗效显著[6]，但是部分患者会出现恶心等不良反应。本实验旨在通过对逆萎康组方进行优化，以消除或减轻患者服用后出现的恶心等的不良反应。现将结果报告如下。

1 材料和方法

1.1 材料来源

健康昆明种小鼠鼠130只，雌雄不限，体质量为18～22 g，由青岛市食品药品检验研究院动物中心提供。中药雪胆150 g，黄芪100 g，老龙皮100 g，朱砂七60 g，半枝莲150 g，海螵蛸100 g，生姜60 g，陈皮60 g，半夏60 g，由青岛大学附属医院药剂科提供；水杨酸钠由国药集团化学试剂有限公司提供；高岭土由北京索莱宝生物科技有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1小鼠急性胃炎模型的制备 选取小鼠10只，每天中午分别以0.2 mL水杨酸钠乙醇混合溶液(40 mg水杨酸钠溶于100 mL体积分数为0.60的乙醇溶液中)灌胃1次，每次灌胃后禁食2 h，连续灌胃10 d，期间观察小鼠精神及体质量变化情况。于第11天处死所有小鼠，取胃黏膜组织，以质量分数40 g/L甲醛溶液固定，石蜡包埋，常规切片，苏木精-伊红(HE)染色，光镜下观察胃黏膜组织的病理组织学改变。

1.2.2组方中致呕成分的筛选 选取小鼠70只，随机分为7组，每组10只。7组小鼠先按照上述方法制备急性胃炎模型，然后分别灌胃雪胆(15 g)煎煮液(雪胆组)、黄芪(10 g)煎煮液(黄芪组)、老龙皮(10 g)煎煮液(老龙皮组)、朱砂七(6 g)煎煮液(朱砂七组)、半枝莲(15 g)煎煮液(半枝莲组)、海螵蛸(10 g)煎煮液(海螵蛸组)、生理盐水(生理盐水组)，每天中午定时灌胃0.2 mL，灌胃后禁食2 h，连用14 d，每天记录所有小鼠食用高岭土和鼠粮的质量及小鼠体质量，并计算高岭土/鼠粮比值。

1.2.3组方优化 选取小鼠50只，随机分为5组，每组10只。5组小鼠先均按照上述方法制备急性胃炎模型，然后分别灌胃原逆萎康组方煎煮液(A组)、原逆萎康组方朱砂七减半煎煮液(B组)、原逆萎康组方加生姜(6 g)煎煮液(C组)、原逆萎康组方加陈皮(6 g)煎煮液(D组)、原逆萎康组方加半夏(6 g)煎煮液(E组)，每天中午定时灌胃0.2 mL，灌胃后禁食2 h，连用11 d，每天记录所有小鼠食用高岭土和鼠粮的质量及小鼠体质量，并计算高岭土/鼠粮比值。

1.3 统计学分析

2 结 果

小鼠急性胃炎模型制备过程中，每次灌胃液灌胃后，小鼠表现为明显不安，连续灌胃数天后小鼠严重萎靡，毛发灰暗，体质量减轻。第11天时处死小鼠，病理切片示小鼠胃黏膜下水肿，甚至部分黏膜出现炎细胞浸润(图1A)、糜烂(图1B)、浅溃疡(图1C)等急性炎症改变。

A:胃黏膜炎细胞浸润，B：胃黏膜糜烂，C：胃黏膜浅溃疡，HE染色，200倍

7组急性胃炎模型制备成功的小鼠再连续灌胃各组药物14 d后，雪胆组、黄芪组、老龙皮组、朱砂七组、半枝莲组、海螵蛸组、生理盐水组小鼠食用高岭土/鼠粮的比值分别为1.58±1.42、1.92±1.13、0.98±0.73、5.40±2.49、1.17±1.75、2.17±1.40、1.81±0.83，单因素方差分析结果显示，7组小鼠食用高岭土/鼠粮的比值比较差异有统计学意义(F=13.92，P<0.05)；与生理盐水组比较，仅朱砂七组小鼠该比值差异具有显著性(P<0.05)，其他组小鼠该比值差异无显著性(P>0.05)。

5组急性胃炎模型制备成功的小鼠再连续灌胃各组逆萎康药物11 d后，A～E组小鼠食用高岭土/鼠粮的比值分别为9.34±4.95、6.10±2.99、5.65±4.57、3.33±1.67、6.50±3.59，单因素方差分析结果显示，5组小鼠食用高岭土/鼠粮的比值比较差异具有统计学意义(F=3.63，P<0.05)；D组小鼠该比值与A组比较，差异有显著性(P<0.05)，其他组小鼠该比值比较差异无显著性(P>0.05)。

3 讨 论

CAG是一种以胃黏膜固有腺体数量减少或消失为病理特点的消化系统常见病，世界卫生组织已经认识到CAG与胃癌的发生发展密切相关[7-9]。因此，此病被定义为胃癌的癌前病变，近年来本病的发病率呈逐年上升趋势[10-12]。

中医认为，胃炎多属中医学“胃脘痛”“痞证”范畴，其病机主要由脾胃升降失司、寒热虚实错杂、气机痞塞所致，气机升降不利，胃气不降而生热，中焦痞塞，脾气不升而生寒，饮邪扰胃而作呕，胃气虚弱而上下不能斡旋而作痛[13]。中药逆萎康组方(雪胆15 g、黄芪10 g、老龙皮10 g、朱砂七6 g、半枝莲15 g、海螵蛸10 g)正是根据CAG的病机而设计，其中雪胆具有清热解毒，健胃止痛之功效，可消除胃气不降而生之热，缓解疼痛，消除症状为主药；黄芪补气升阳，利水消肿，老龙皮健脾利水，两者助主药补气健脾为辅药；朱砂七、半枝莲清热祛毒，利水消肿，朱砂七理气活血止血通络消积；海螵蛸制酸、敛疮，收敛止血，可以中和胃酸以达到制酸止痛之目的，本治法以益气健脾、清胃热祛瘀毒为主，兼以补脾理气活血制酸，标本兼治，虚实共调[14-15]。全方共凑健脾益气、清热导滞、和胃止痛之功，前期的临床研究和药理试验也证实逆萎康组方对胃黏膜有明显的保护作用[16]，临床应用多年，疗效也非常显著，但部分患者会出现恶心等不良反应情况。

恶心是一种内脏不舒适的感觉，最终以呕吐达到高潮，目前国内外应用较多的呕吐动物模型主要有雪貂、水貂、小型猪、钱鼠类等异食癖模型，其中雪貂是目前公认较为理想的呕吐模型动物。钱鼠是目前具有与人相似呕吐现象的体质量最小的哺乳动物呕吐模型[17-18]。啮齿类动物虽然没有呕吐反射，但在受到放射线照射、旋转、催吐剂等能引起呕吐的刺激时，表现出异食癖行为，研究证明其异食行为等同于其他种属动物的呕吐行为，因而可以将该异食癖行为视为恶心呕吐反应的表现，因该类动物易得、操作方便,目前较为常用[19-20]。本实验中使用常用的水杨酸钠乙醇混合液灌胃小鼠[21-22]，连续10 d，病理切片可见小鼠胃黏膜下水肿，甚至部分黏膜出现炎细胞浸润、糜烂、浅溃疡等急性炎症改变，说明小鼠急性胃炎模型制作成功。

为确定组方中的致呕成分，本研究首先制备小鼠急性胃炎模型，然后将组方中的6种成分分别煎煮后灌胃小鼠，结果显示与生理盐水组比较，仅朱砂七组小鼠食用高岭土/鼠粮的比值差异具有显著性，其他组小鼠食用高岭土/鼠粮的比值差异均无显著性，因此可初步判断原组方中引起恶心呕吐的主要成分是朱砂七，以此为基础进行后续的组方优化。

中医研究发现，生姜、陈皮和半夏均具有止呕的作用[23-25]，生姜抗呕吐机制可能与参与调节神经递质P物质和5-HT有关[26]；陈皮对动物胃肠运动主要表现为抑制作用，其抑制效应主要通过胆碱能受体、5-HT受体、肾上腺素受体介导及对平滑肌的直接抑制作用[27]；半夏止呕可能与其提高Cajal间质细胞(ICC)水平有关[28]。因此，本研究采取的逆萎康组方优化方案如下：在原逆萎康组方的基础上减少朱砂七的含量，或者分别加入生姜、陈皮、半夏(姜半夏)，共获得4组优化组方，分别是原逆萎康组方朱砂七减半、原逆萎康组方加生姜6 g、原逆萎康组方加陈皮6 g、原逆萎康组方加半夏6 g。本研究首先制备小鼠急性胃炎模型，然后分别将4组优化组方煎煮后灌胃小鼠，结果显示，与A组相比较，D组小鼠食用高岭土/鼠粮的比值差异有显著性，其他组小鼠食用高岭土/鼠粮的比值差异均无显著性，因此可判断原逆萎康组方中加入陈皮的效果最好。分析原因可能为陈皮性温，可中和朱砂七寒性，并抑制动物的胃肠运动。朱砂七导致恶心呕吐的原因，可能与朱砂七性寒有关，原逆萎康组方朱砂七的剂量减半后，其致恶心程度并没有明显改善，因此新组方中仍保留朱砂七的原来剂量。

总之，本研究通过模型小鼠筛选出逆萎康组方中导致恶心的主要成分，并优化了逆萎康组方，配制出治疗慢性萎缩性胃炎的新组方。在新组方中加入陈皮后是否会影响其原有疗效，或者对CAG患者是否更加有效，还需后续进行更深入的研究，为逆萎康临床应用的安全性与有效性提供更多的实验和理论依据。

利益冲突声明：所有作者声明不存在利益冲突。

ConflictsofInterest：All authors disclose no relevant conflicts of interest.

伦理批准和动物权利声明：本研究涉及的所有动物实验均已经通过青岛大学附属医院实验动物福利与伦理委员会的审核批准(文件号AHQU-MAL20180328)。

EthicsApprovalandAnimalRight：All experimental animal protocols in this study were reviewed and approved by The Animal Care and Welfare Committee of The Affiliated Hospital of Qingdao University(Approval Letter No.AHQU-MAL20180328).

作者贡献：谢宜名、孙向红、李宗莉参与了研究设计；谢宜名、岳璐茜、张月君参与了论文的写作和修改。所有作者均阅读并同意发表该论文。

Contributions：The study was designed byXIEYiming,SUNXianghong, andLIZongli.The manuscript was drafted and revised byXIEYiming,YUELuxi, andZHANGYuejun.All the authors have read the last version of the paper and consented submission.