杨雪，詹江辉，仲华，闫雪云，洪亚

(1.新乡医学院第一附属医院 输血科，河南 新乡 453100；2.新乡市第二人民医院 检验科，河南 新乡 453000)

新生儿溶血主要是指由于母、子血型不合导致的同种免疫性溶血，母亲血型抗体经胎盘进入胎儿体内后，导致胎儿及新生儿红细胞遭到破坏。在人类多种血型系统内，ABO 血型不合导致的溶血性疾病较为常见，Rh血型不合引起的较少见。另外，新生儿溶血还可能是由非同种免疫性因素，例如药物、感染、自身免疫性疾病、血红蛋白缺陷、红细胞先天酶缺陷等因素引起。新生儿溶血病患儿疾病轻重同溶血程度一致，主要表现为网织红细胞升高、贫血及黄疸，病情严重者还可发生胎儿水肿。新生儿溶血病通常出现在既往有新生儿溶血发病史、流产史、妊娠史的孕产妇。近年来新生儿溶血病患儿数量将逐渐升高，而对该疾病开展研究能够更好地确保疑似新生儿溶血病胎儿娩出后获得准确的诊断及治疗，降低疾病给新生儿产生的伤害及后遗症。临床对新生儿溶血病的诊断一般采用溶血三项，检验报告属于定性结果，在新生儿机体中IgG 型血型抗体水平定量检测方面的研究较少，需要以此为切入点开展深入分析。故而，本次研究针对新乡医学院第一附属医院收治的215 例新生儿溶血病患儿进行IgG 型ABO 血型系统抗体效价检测，现针对研究相关情况作出以下介绍。

1 资料与方法

1.1 一般资料

研究群体为本院2019年1月至2021年12月收治的215 例新生儿溶血病患儿。215 例患儿内，男114 例，女101 例；年龄1～6 d，平均(3.26±1.01)d；体 重2.4～4.1 kg，平均(3.22±0.21)kg；血型数目A 型112例，B 型98 例，AB 型5 例。本研究资料在本院伦理专家查看后允许继续实施研究。

纳入标准：(1) 患儿在开展各种临床项目检查后，均被确诊为新生儿溶血病；(2) 妊娠周期在37～42周者；(3) 母体病例资料完整，在妊娠过程中未出现妊娠并发症；(4) 临床病例资料完整者；(5)家长了解研究内容，同意参与试验。

排除标准：(1) 存在先天性血管、脑、心脏病变情况者；(2) 存在颅内出血、感染、窒息及胎儿窘迫等病变情况者；(3) 双胎及以上者；(4) 巨大儿、早产儿及畸形儿；(5) 母亲患有肝脏疾病、甲亢、妊娠期糖尿病及妊娠期高血压者。

1.2 研究方法

1.2.1 检测仪器和试剂

XN-10 血液细胞分析仪(采购自日本希森美康公司)，AU5800 型全自动生化分析仪(采购自贝克曼库尔特有限公司)。离心机系统、卡式孵育器(采购自美国BIO-RED)、不规则抗体筛检细胞、人ABO 红细胞、新生儿溶血病检测卡、ABO 及Rh 单克隆抗体血型检测卡采购自长春博讯生物技术有限责任公司。

1.2.2 血型鉴定和不规则抗体筛查

分别采集新生儿母亲及新生儿抗凝静脉全血，将其放置在1 000 g 离心力的离心机中进行持续3 min 离心处理，将红细胞与血浆分离后待用。依据微柱凝胶卡检测方式对不规则抗体、Rh 及ABO 血型进行检测。

1.2.3 溶血三项检测

挑选新生儿红细胞压积，使用生理盐水进行3 次洗涤，使用56℃热放散试验，并且针对新生儿血浆实施游离试验。选用洗涤后红细胞开展直接抗人球蛋白试验。

1.2.4 测定新生儿机体中抗体效价

针对游离试验及放散试验结果呈阳性的标本，依据浓度梯度稀释法对检测液进行处理，并将其滴注在凝胶卡里，放置于37℃卡式孵育器中孵育15 min，取出之后进行离心(900 r/2 min，1 500 r/3 min)，离心之后取出并记录效价结果。

1.2.5 血细胞计数

采集新生儿静脉全血，并使用乙二胺四乙酸二钾进行抗凝处理，利用XN-10 血液细胞分析仪开展红细胞、网织红细胞、血红蛋白及有核红细胞检测。

1.2.6 生化检测

采集新生儿未抗凝静脉全血，将其置入37℃温育箱内进行持续30 min 温育，随后放置在1 000 g 离心力的离心机中进行持续5 min 离心处理，选择AU5800 型全自动生化分析仪针对钾离子、白蛋白及未结合胆红素水平实施检测。

1.3 观察项目

(1) 分析患儿溶血试验结果。(2) 分析放散试验和游离抗体试验分布情况。(3) 分析不同放散试验滴度(1∶1～1∶32) 的患儿特点。(4) 分析不同游离抗体试验(1∶1～1∶4) 的患儿特点。

1.4 数据处理

2 结 果

2.1 患儿溶血试验结果分析

在215 例患儿中，红细胞抗体放散试验阳性率是184 例(85.6%)，游离抗体试验阳性率是176 例(81.9%)，直接抗球蛋白试验阳性率是86 例(40.0%)，三种试验方式阳性率对比。差异有统计学意义(χ=129.125，＜0.05)。见表1。

表1 患儿溶血试验结果分析[n(%)]

2.2 放散试验和游离试验分布情况分析

在患儿中，红细胞放散试验抗体效价最高的是1∶32，6 个不同放散液效价组患儿数量对比，差异有统计学意义(χ=143.738，＜0.05)。血浆游离抗体试验效价最高的是1∶4，3 个不同游离抗体效价组患儿数量对比，差异有统计学意义(χ=434.267，＜0.05)。见表2。

表2 放散试验和游离试验分布情况分析(n)

2.3 不同放散试验滴度(1∶1～1∶32)的患儿特点分析

在放散试验中，患儿机体内抗体效价越高，病情严重程度越高，治疗恢复时间越长，呈现患儿住院时间随效价上升而延长。见表3。

表3 不同放散试验滴度(1∶1～1∶32)的患儿特点分析

2.4 不同游离抗体试验(1∶1～1∶4)的患儿特点分析

在游离抗体试验中，患儿机体内抗体效价越高，病情严重程度越高，治疗恢复时间越长，呈现患儿住院时间随效价上升而延长。见表4。

表4 不同游离抗体试验(1∶1～1∶4)的患儿特点分析

3 讨 论

当前临床对新生儿溶血病进行预测的主要方式是对夫妻双方开展ABO 血型检测，当两者ABO 血型相同时，则不会出现ABO 型新生儿溶血病；当两者ABO 血型不相同时，则有发生新生儿溶血的可能性。在该种情况下，孕妇需要开展IgG 型抗-A、抗-B 效价测定，当抗体效价在64 及以上时存在临床价值。在孕妇妊娠期间，IgG 型抗-A、抗-B 效价出现明显变化，表明临床需要针对孕妇开展干预，进而确保胎儿能够正常生长发育。

直接抗人球蛋白实验、游离抗体试验及放散试验是临床诊断新生儿出生后溶血的主要方式，在敏感度方面，放散试验效果较好。通过开展本次研究后发现，在215例患儿中，红细胞抗体放散试验阳性率为85.6%，游离抗体试验阳性率为81.9%，直接抗球蛋白试验阳性率为40.0%，三种试验方式阳性率对比，差异存在统计学意义(＜0.05)。本次研究通过对新生儿溶血患儿机体中IgG 型抗-A 及抗-B 红细胞抗体效价的差异和临床效应进行对比分析，结果表明新生儿机体中放散抗体效价区间是1∶1～1∶32，游离抗体区间是1∶1～1∶4。分析结果，由于患儿机体中抗体通过胎盘屏障进入血液循环后，同红细胞结合，大部分抗体会以结合形式存在。并且本次研究放散实验选择的样本是浓缩红细胞，能够对抗体实施富集，其也是放散实验抗体效价相较于游离实验较高的主要因素。

本次研究发现，新生儿溶血病患儿ABO 血型分布无明显差异，这提示不同血型导致的新生儿溶血能力差异无统计学意义。当前临床对新生儿溶血患儿疾病严重程度的判断主要是利用血红蛋白、红细胞及胆红素，当IgG 型抗体结合红细胞后，会引起红细胞免疫性溶血，使得血液内胆红素水平逐渐升高。当胆红素在机体中的聚集远高于肝脏代偿功能时，可出现黄疸症状。红细胞出现免疫性溶血后，会发生血红蛋白水平降低及红细胞计数下降的情况，而在临床表现方面，则有缺氧及贫血症状。上述实验室检测指标改变及临床表现均是IgG 型抗体同红细胞结合达到一定程度后才会出现的，故而通过观察上述指标会对疾病及时诊断发生不利影响。

本次研究发现，患儿机体内抗体效价越高，病情严重程度越高，治疗恢复时间越长，呈现患儿住院时间随效价上升而延长。针对研究结果进行分析，患儿机体中IgG 型抗-A 及抗-B 红细胞抗体效价越高，抗体水平越多，对红细胞的破坏则越强，这使得红细胞发生溶血，机体循环血液内胆红素水平升高。胆红素在肝血窦面实施跨膜转运时，需要同白蛋白结合，因此在诊断新生儿溶血时，血红蛋白水平下降可发挥辅助作用。在新生儿溶血治疗期间，医护人员需要对血红蛋白水平进行严密监测，当发生血红蛋白水平降低时，需要合理补充，确保机体内胆红素能够获得正常代谢。

综上所述，新生儿机体中IgG 型ABO 血型系统抗体效价能够对新生儿溶血病患儿机体中抗A/B 抗体水平进行判断，进而预测患儿机体中抗体诱发红细胞溶血水平，有利于临床评估新生儿溶血病的严重程度和疾病预后。