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青蛤I型溶菌酶在毕赤酵母中的重组DNA表达

2022-09-21冯付霭钱韻芳

水产科学 2022年5期

冯付霭,赵 震,陶 妍,2,谢 晶,2,钱韻芳,2

( 1.上海海洋大学 食品学院,上海 201306;2.上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心,上海 201306 )

溶菌酶在大多数生物先天性免疫系统中发挥重要作用,其主要包括植物、动物和微生物来源的溶菌酶[1];而动物来源的溶菌酶则可分为鸡型(C型)、鹅型(G型)和无脊椎动物型(I型),其中研究最多、最具代表性的是C型,即鸡蛋清中的天然C型溶菌酶。水产动物溶菌酶的研究起步较晚,但因其特殊的作用机理及其在动物免疫中的重要作用而越来越受到关注[2]。鱼类等脊椎动物中仅存在C、G型溶菌酶,而贝类等无脊椎动物中3种类型溶菌酶均存在[3]。三者之间在一级结构上存在较大差异,C型溶菌酶含保守的8个半胱氨酸残基,鱼类G型溶菌酶大多数缺乏半胱氨酸残基;而I型溶菌酶含多至14个的半胱氨酸残基,以致在空间上可形成7对二硫键而赋予其结构的高稳定性[4-5]。自1975年Jollès等[6]从海星Asteriasrubens中分离出第一个I型溶菌酶以来,已从斑节对虾(Penaeusmonodon)[7]、仿刺参(Apostichopusjaponicus)[8]、青蛤(Cyclinasinensis)[9]、剃刀蛤(Sinonovaculaconstricta)[10]和文昌鱼(Branchiostomajaponicum)[3]等无脊椎动物中克隆到I型溶菌酶基因。

曾有学者对文昌鱼施行鳗弧菌(Vibrioanguillarum)挑战试验,发现其鳃中C型和G型溶菌酶基因的mRNA转录水平并无明显变化,但I型溶菌酶的转录水平在24 h后明显提高[3];有研究显示,将菲律宾蛤仔(Ruditapesphilippinarum)置于人为设置的鳗弧菌污染的养殖环境中,其I型溶菌酶基因在血细胞中的转录水平显著提高[11];此外,当剃刀蛤在有副溶血性弧菌(V.parahemolyticus)的环境中生长时,其鳃和肝胰腺中I型溶菌酶基因的转录水平显著增加[10]。……

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