叶类蔬菜中单核细胞增生李斯特氏菌PCR快速检测方法的建立
2022-09-21李晓然张若鸿尹树仁王晓芳崔生辉郭云昌
李晓然 张若鸿 王 纯 尹树仁 王晓芳 杨 洋,* 崔生辉 郭云昌
(1 河北科技师范学院食品科技学院,河北 秦皇岛 066600;2 中国食品药品检定研究院,北京 100050;3 国家食品安全风险评估中心,北京 100022)
叶类蔬菜富含膳食纤维、维生素和矿物质,有益于人体健康。然而,随着叶类蔬菜消费量的增加,相关食源性致病菌引发的食源性疾病暴发也随之增加,对公共健康造成了严重危害[1-2]。单核细胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)是一种常见的侵袭性食源性致病细菌。人体被该菌感染后易引发败血症和脑膜炎等侵袭性疾病,病死率较高(20%~30%)[3-4]。目前国外叶类蔬菜中该菌引发的李斯特菌病暴发数量逐渐攀升,国内也存在散发事件,且该趋势仍在持续[5-6],因此急需建立一种快速可靠的单核细胞增生李斯特氏菌检测方法,以确保叶类蔬菜的质量安全,为公共卫生安全提供保障。
传统的基于细菌培养的检测方法被认为是“金标准”,可靠准确但耗时耗力(5~7 d)[7]。为克服传统方法的局限性,目前已开发多种食源性致病菌快速检测方法,其中酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)技术虽操作简便,但需目标菌与抗体进行有效的物理接触(灵敏度较低),且易受免疫原性的干扰[8]。光学/电化学生物传感器和基因芯片技术具有高通量优势,但检测成本昂贵,对设备和操作人员技能要求较高[9-10]。聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)虽已成为食源性致病菌检测发展最成熟的技术[11],但PCR方法通常需要样品前增菌处理来抑制背景微生物生长,也以提高检测精确度。……
