闫 圆 李小全

河南大学第一附属医院检验科，河南省开封市 475001

原发性肝癌是临床常见的恶性肿瘤，发病率和死亡率均居高不下，严重影响患者生命健康[1-2]。血清甲胎蛋白(Alpha fetoprotein，AFP)是临床常用于诊断原发性肝癌的标志物，但有15%～30%的早期原发性肝癌患者因癌病灶体积较小、癌组织液化坏死程度较低，使AFP表达呈低水平状态(AFP<200ng/ml)，使此类人群应用AFP、AFP-L3等辅助诊断时灵敏度、特异度下降[3-5]。为此，寻找AFP低水平原发性肝癌的早期诊断指标对该疾病患者的早期干预具有重要意义。α-L-岩藻糖苷酶(α-L-Fucosidase，AFU)是一种水解酶，是原发性肝癌诊断的新肿瘤标志物[6]。高尔基体蛋白73(Golgi protein 73，GP73)是一种跨膜蛋白，在肝脏损伤、炎性反应、癌病灶等表达升高[7]。GP73、AFP、AFU等均常用于原发性肝癌诊断之中，但原发性肝癌患者的AFP表达水平是否影响上述指标的诊断效能相关研究报道罕见。本研究以60例AFP低水平原发性肝癌患者作为研究对象，探讨GP73、AFP、AFU单一诊断和联合诊断对该疾病的诊断效能，以期为临床早期发现和干预此类患者提供参考。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取我院2018年2月—2020年1月收治的AFP低水平的原发性肝癌患者、肝脏良性疾病患者和健康体检者,各60例，分别作为AFP低水平肝癌组(n=60)、肝脏良性疾病组(n=60)和对照组(n=60)。AFP低水平肝癌组男35例，女25例；年龄47～67岁，平均年龄(55.75±5.33)岁。肝脏良性疾病组男33例，女27例；年龄51～70岁，平均年龄(55.93±5.10)岁；疾病类型：肝硬化13例、慢性乙型肝炎43例、慢性丙型肝炎4例。对照组男37例，女23例；年龄47～73岁，平均年龄(55.37±5.82)岁。本研究经我院伦理委员会批准，所有患者及家属均知情同意。

1.2 入选标准 纳入标准：原发性肝癌患者符合《原发性肝癌的诊疗规范(2017)》[8]诊断要求，且血清10ng/ml

1.3 方法 从我院自制的《原发性肝癌诊断效能分析相关数据记录表》中收集三组患者的性别、年龄、肝脏良性疾病组疾病类型、GP73、AFP、AFU等指标情况。所有患者均晨起空腹采血5ml，3 000r/min离心10min得血清，采用酶联免疫吸附法测定三组患者血清GP73水平(参考范围：GP73<150ng/ml)；采用微粒子酶联免疫法测定三组患者血清AFP水平(参考范围：AFP<20ng/ml)；采用化学闭塞速率法测定三组患者血清AFU水平(参考范围：11.3U/L

1.4 统计学方法 采用SPSS21.0软件处理数据。采用F检验分析三组正态性、方差齐性的计量资料差异；采用LSD-t检验分析组间差异；绘制GP73、AFP、AFU以及联合诊断的ROC曲线，分析指标的诊断效能；采用Delong检验分析指标诊断效能的差异，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组GP73、AFP、AFU水平变化情况 AFP低水平肝癌组GP73、AFP水平均高于肝脏良性疾病组和对照组，组间比较差异显著(P<0.05)；AFP低水平肝癌组AFU水平高于对照组，组间比较差异显著(P<0.05)；AFP低水平肝癌组与肝脏良性疾病组AFU水平差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 三组GP73、AFP、AFU水平变化情况

2.2 GP73、AFP、AFU诊断AFP低水平原发性肝癌的诊断效能 联合诊断的准确度为87.78%，灵敏度为82.76%，特异度为90.16%，曲线下面积为0.892(0.791～0.953)。经Delong检验发现，联合诊断的诊断效能高于GP73、AFP、AFU单独诊断效能，差异具有统计学意义(Z=-2.810、-2.577、-2.371，P<0.05)，见表2、图1。

表2 GP73、AFP、AFU诊断AFP低水平原发性肝癌的诊断效能

图1 GP73、AFP、AFU诊断AFP低水平原发性肝癌的ROC曲线图

3 讨论

早期原发性肝癌因疾病病灶体积、液化及患者自身因素等影响，使该疾病部分患者血清AFP表达水平低于200ng/ml，导致AFP、AFU等原发性肝癌特异性指标诊断效能下降。本研究中，AFP、AFU的灵敏度分别为67.16%、54.93%，均处于较低水平，提示临床应用AFP、AFU诊断AFP低水平原发性肝癌患者发生漏诊、误诊的可能性较高，影响临床医师判断患者具体肝脏疾病进展情况的准确性，使患者错失早期诊断时间[11-12]。为此，寻找更为灵敏的指标诊断AFP低水平原发性肝癌具有重要意义。

GP73是一种跨膜蛋白，在各类肝炎病毒感染、肝炎肝硬化、肝损伤等影响下，其扩散进入患者血循环，进而导致表达升高，是临床常用于诊断原发性肝癌的特异性指标。粟劲松等[13]对40例原发性肝癌患者血清谷氨酰转肽酶(Glutamyltranspeptidase，GGT)、GP73、AFP进行分析，发现GP73诊断原发性肝癌准确率达75.0%，AFP准确率为70.0%，两者联合诊断的准确率高于单一诊断。郭鸿雁等[14]研究表明，GP73诊断原发性肝癌的灵敏度为78.5%、特异度为88.8%、准确度为81.6%，均高于AFP单一诊断效能。本研究也证实上述结论，发现GP73诊断效能均高于单一AFP、AFU诊断，提示GP73对AFP低水平原发性肝癌的诊断效能较好，更适用于AFP低水平原发性肝癌患者的临床诊断，但GP73诊断的最佳临界值以及混杂因素校正方法探讨等仍需进一步大样本、多中心研究。

本研究发现，AFP低水平肝癌组GP73、AFP水平均高于肝脏良性疾病组和对照组，AFU水平高于对照组，符合原发性肝癌的生物学特征[15]，并提示GP73、AFP、AFU升高对AFP低水平原发性肝癌诊断具有提示性作用。本研究发现，GP73联合AFP、AFU诊断AFP低水平原发性肝癌的诊断效能高于单一使用GP73、AFP、AFU的诊断效能，提示联合诊断能互补各指标的不足，改善单一指标灵敏度、特异度、准确度等一项或多项指标无法满足临床的局限，减少漏诊、误诊的发生，也表明AFP低水平原发性肝癌患者需多项指标同时监测，以减少AFP、AFU等单一指标的应用局限，避免患者错失早期诊断时间，利于患者的康复。

综上所述，GP73联合AFP、AFU能提高AFP低水平原发性肝癌诊断效能，对临床诊断此类疾病具有指导意义，本研究下一步将扩大样本量，借鉴国外多因素分析在ROC曲线的应用，减少年龄、性别、疾病进展等对诊断效能的影响，进一步验证GP73联合AFP、AFU诊断AFP低水平原发性肝癌的可靠性。