马钱苷联合miR-3619-5p靶向迁移侵袭增强因子1对宫颈癌SiHa细胞迁移和凋亡的影响
2022-07-21冯双苗张化莲袁有华
冯双苗,张化莲,袁有华
马钱苷联合靶向迁移侵袭增强因子1对宫颈癌SiHa细胞迁移和凋亡的影响
冯双苗1,张化莲1,袁有华2*
1. 驻马店市中心医院 产科,河南 驻马店 463000 2. 河南省人民医院 检验科,河南 郑州 450000
研究马钱苷联合靶向迁移侵袭增强因子1(migration and invasion enhancer 1,MIEN1)对宫颈癌SiHa细胞迁移和凋亡的影响。采用qRT-PCR法检测宫颈癌SiHa、Hela、CasKi细胞和正常宫颈上皮Ect1/E6E7细胞中mRNA表达。在宫颈癌SiHa细胞中转染mimics上调的表达,给予马钱苷处理,采用CCK-8法分析细胞增殖;流式细胞术分析细胞凋亡;Transwell小室分析细胞迁移和侵袭能力的变化;Western blotting法分析剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved cystein-asparate protease-3,cleaved Caspase-3)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloprotease-2,MMP-2)蛋白表达。生物信息学软件预测的靶基因,利用荧光素酶报告系统鉴定二者的靶向关系。在宫颈癌SiHa细胞中共转染mimics和MIEN1过表达载体,考察细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的变化。宫颈癌SiHa、Hela、CasKi细胞中mRNA表达水平低于正常宫颈上皮Ect1/E6E7细胞(<0.05),并且宫颈癌SiHa细胞中表达水平最低。上调、马钱苷处理或二者联合处理后的宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移和侵袭能力均下降(<0.05),细胞凋亡升高(<0.05),细胞cleaved Caspase-3蛋白表达水平升高(<0.05),MMP-2蛋白表达水平降低(<0.05),并且二者联合处理后对细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的作用更强。靶向促进MIEN1表达。MIEN1过表达载体逆转马钱苷联合对宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用(<0.05)。马钱苷联合靶向MIEN1能够抑制宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移、侵袭能力,并促进细胞凋亡。
马钱苷;宫颈癌;miR-3619-5p;迁移侵袭增强因子1;凋亡;侵袭
宫颈癌是引起女性死亡的主要恶性肿瘤之一,是目前世界范围内的第4大癌症,严重威胁着广大女性的生命健康[1-2]。……
