黄承志，陈玲玲，修宝林，孙笠维，高 晶，王朝红，叶凤娴，MUBASHER Hussain，申宝营，邱栋梁，毛润乾*

（1.福建农林大学园艺学院，福州 350002；2.广东省科学院动物研究所/广东省动物保护与资源利用重点实验室/广东省野生动物保护与利用公共实验室/广东省矿物油农药工程技术研究中心，广州 510260）

亮腹釉小蜂Tamarixiaradiata(Waterston)是柑橘木虱Diaphorinacitri(Kuwayama)优势寄生蜂，寄生4～5龄的柑橘木虱若虫[1,2]。一头亮腹釉小蜂通过取食和寄生的方式杀灭柑橘木虱若虫多达500头[3]。1998年美国佛罗里达州引进亮腹釉小蜂进行释放，到2006年，该蜂已遍及佛罗里达的所有橘园，通过调查发现，亮腹釉小蜂在佛罗里达州春夏季寄生率相对较低，秋季最高，平均寄生率达60%以上，防治效果良好[4]。在巴西，寄生率为43.3%～88.8%[5]。在墨西哥西部的城市地区，寄生率达60.58%[6]。在美国得克萨斯州，释放亮腹釉小蜂使柑橘木虱种群数量降低91.2%[7]。

亮腹釉小蜂已成功地引入法国留尼汪[8]、中国台湾[9]、印度尼西亚[10]、菲律宾[11]、沙特阿拉伯[8]、哥伦比亚瓜达卢普[12]、美国加利福尼亚州[13]和佛罗里达州[14]，已经在美国蔓延[4]。在巴西[15]、阿根廷[16]、委内瑞拉[17]、墨西哥[18]也能发现亮腹釉小蜂。

产业化方面，亮腹釉小蜂已在巴西[5]、墨西哥[19]、美国加利福尼亚州[20]、美国得克萨斯州[7]和美国佛罗里达州[21]规模化生产。目前，我国已有多个高校及科研单位对亮腹釉小蜂展开了发育、形态学及寄生行为等相关研究，但都集中于基础研究，对于该寄生蜂生产与应用尚未见报道[22,23]，为填补我国在该领域中的空白，加强天敌生物的绿色防控，减少化学农药的使用，广东省科学院动物研究所与广州市农业技术推广中心合作，建立国内首个亮腹釉小蜂规模化生产工厂，借鉴国外生产经验和结合我国华南地区特有的环境情况，开发出一套适合本地寄生蜂规模化生产的新技术[24,25]。2020年开始寄生蜂的规模化生产，于7月完成养虫厂地改造，截止到12月，已生产寄生蜂12万头，并分别在广州从化区、黄埔区、白云区柑橘果园进行释放，在随后调查中发现各地区果园内柑橘木虱数量明显下降。经过1年来的生产并提供用户试用，目前该产品的生产工艺稳定，产品质量符合标准。本文对生产中关键技术研究进行报道。

1 材料与方法

1.1 载体植物与供试虫源

年橘：购自广州，此后种植于广州农业技术推广中心温室内，保证室内阳光充足，定时浇水，定期施肥，根据生产需要对其进行修剪，让其有充足的嫩梢和嫩枝供试验使用。

柑橘木虱：初始种群采自广东省科学院动物研究所实验室，以年橘为植物载体饲养于网室内，繁殖后代种群作为试验用虫。

亮腹釉小蜂：初始采集于广东省科学院动物研究所实验室，然后种群饲养于广州农业技术推广中心寄生蜂室。

1.2 主要设备

恒温恒湿培养箱（天津赛得利斯实验分析仪器制造厂）、吸虫器（湖北广之应科技有限公司）、LED灯、60目养殖笼（110 cm×90 cm×100 cm）、收集瓶、枝剪刀。

1.3 年橘新芽修剪方法试验

用整体修剪、半侧修剪、内部修剪3种修剪方式，各修剪5株年橘，观察新芽生长，记录新芽长至3 cm以上时的时间和数量。培养条件：温度25～30 ℃，RH 50%～70%，光周期14L:10D，相同水肥管理。

1.3.1 整体修剪 顶部，剪去所有离地面85 cm以上枝条；底部，剪去离盆里土面15 cm内枝条；中部，剪去延伸到花盆外的枝条、花枝、果枝、弱树和枯枝，保留筷子粗细枝条15～20个，每个枝条保留1～2个叶片。

1.3.2 半侧修剪 按照整体修剪，只修剪纵向一半树体。

1.3.3 内部修剪 按照整体修剪，只修剪树体内部。

1.4 柑橘木虱接种数量试验

每个养殖笼中放入6株年橘（共有240个新芽），按照柑橘木虱:新芽数为1:1、2:1、3:1、4:1的比例，分别往每个养殖笼中接入待产卵的柑橘木虱240、480、720、960头，待其产卵3 d后通过吸虫器移除。在移除柑橘木虱的第 15 d后通过吸虫器收获新羽化的柑橘木虱，记录每个养殖笼中羽化后的柑橘木虱数量。培养条件：温度25～30 ℃，RH 50%～70%，光周期14L:10D，相同水肥管理。试验4个处理，每个处理6株年橘，重复3次。

1.5 亮腹釉小蜂接种数量试验

每个养殖笼中放入5株年橘（共有1200头4龄末柑橘木虱若虫）。按照亮腹釉小蜂:柑橘木虱若虫为1:5、1:10、1:15和1:20的比例，分别往每个养殖笼接入240头、120头、80头和60头亮腹釉小蜂（雌雄比为4:1）。在接入亮腹釉小蜂第9 d后通过吸虫器收获新羽化的亮腹釉小蜂，可持续收获8～10 d，每天收获1次。记录每笼收获亮腹釉小蜂雌蜂数量和每笼收获亮腹釉小蜂总数量，并根据下列公式分别计算雌蜂比例、每笼净收获亮腹釉小蜂数量、每笼净收获亮腹釉小蜂雌蜂数量。培养条件：温度 25～30 ℃，RH 50%～70%，光周期14L:10D，提供蜂蜜为食物，相同水肥管理。试验4个处理，每个处理5株年橘，重复 3次。雌蜂比例（%）＝每笼收获雌蜂数量/每笼收获亮腹釉小蜂总数量×100%；每笼净收获亮腹釉小蜂数量＝每笼收获亮腹釉小蜂数量—每笼接种亮腹釉小蜂数量；每笼净收获亮腹釉小蜂雌蜂数量＝每笼收获雌蜂数量—每笼接种雌蜂数量。

1.6 数据统计与分析

修剪方法下年橘生产新芽的时间和数量、不同木虱接种比例下收获木虱的数量、不同接入亮腹釉小蜂比例下产出亮腹釉小蜂的数量等数据分析采用IBM SPSS 20.0进行单因素方差分析（One-way ANOVA），应用Duncan氏新复极差法进行差异显著性检验。

2 结果与分析

2.1 不同修剪方法对年橘生产新芽的时间和数量的影响

新芽长至3 cm所需时间，整体修剪法从修剪到大部分新芽长至3 cm所需的时间最短，仅为12.6 d，显著低于半侧修剪法和内部修剪法。在生产新芽长至3 cm数量上，用整体修剪生产新芽数量多，为39.6个，显著高于半侧修剪、内部修剪。表明在修剪后会诱导在该枝条上萌发出新芽，未修剪的枝条则不萌发或少萌发新芽。所以，选用整体修剪对年橘进行修剪（表1）。

表1 不同修剪方法下年橘生产新芽所需的时间和数量Table 1 The time and number of sprouts produced under different pruning methods

2.2 不同柑橘木虱接种比例对收获木虱数量的影响

在接种比例柑橘木虱:年橘新芽为2:1和3:1中，每笼收获木虱的数量分别为1513.33头和1583.00头，差异不显著（P＞0.05），但均显著高于接种比例为1:1和4:1每笼收获木虱的数量（P＜0.05）。考虑到接种木虱会对年橘造成伤害，在每笼收获木虱数量没有显著差异的情况下，选择较小接种比率有利于年橘的生长，所以选择接种比例2:1为最佳（表2）。

表2 不同柑橘木虱接种比例下收获柑橘木虱的数量Table 2 The number of D.citri harvested under different inoculation ratios

2.3 不同亮腹釉小蜂接种比例对收获亮腹釉小蜂数量的影响

接种比例（亮腹釉小蜂:柑橘木虱若虫）为1:5时，每笼收获亮腹釉小蜂数量最多，平均为810.67头，但每笼收获亮腹釉小蜂的雌蜂比、每笼净收获亮腹釉小蜂的雌蜂数量最少，分别为61.55%、310.67头。按接种比例 1:10时，每笼净收获亮腹釉小蜂数量、每笼收获亮腹釉小蜂的雌蜂数量、每笼净收获亮腹釉小蜂的雌蜂数量最多，分别为646.67头、565.00头和469.00头。所以选择接种比例1:10为最佳（表3）。

表3 不同接种比例下每笼收获亮腹釉小蜂的情况Table 3 The number of T.radiata harvested under different inoculation ratios per cage

3 讨论

近年来，柑橘黄龙病给世界范围内的柑橘产业造成了巨大的经济损失[26,27]，作为柑橘黄龙病的重要传播媒介，柑橘木虱的有效防治显得极其重要。随着对柑橘木虱天敌昆虫资源调查与利用研究的不断深入，包括寄生性天敌和捕食性天敌在内的多个类群资源都受到了关注，而亮腹釉小蜂因其寄生效率高、寄主专一性等特点[28]，成为柑橘木虱寄生性天敌研究利用的重点对象。目前，在巴西[5]、墨西哥[19]、美国加利福尼亚州[20]、美国得克萨斯州[7]和美国佛罗里达州[21]以九里香为植物载体建立了亮腹釉小蜂的规模化生产体系。在我国已有多个高校及科研单位对亮腹釉小蜂展开了基础研究，但未建立亮腹釉小蜂的规模化生产体系[26,27]。

在巴西，按照柑橘木虱:九里香新芽数为（2.5～3.3）:1的比例接种待产卵雌性柑橘木虱，待柑橘木虱若虫生长至4～5龄时，按照柑橘木虱若虫:亮腹釉小蜂为10:1的比例接种亮腹釉小蜂[5]。在美国佛罗里达州，按照柑橘木虱:九里香新芽数为（5～20）:1的比例接种待产卵雌性柑橘木虱，待柑橘木虱若虫生长至4龄时，每个养殖笼（含10株九里香）接入350～450头亮腹釉小蜂[21]。在美国得克萨斯州，将3株不同龄期的九里香苗（18月、2年、4年）修剪3 d后搬至一个养殖笼中，分别在第1、4、7 d接入200头、100头、50头柑橘木虱成虫。大约第12 d出现4～5龄柑橘木虱若虫，每个养殖笼中接种18头（15头雌蜂，3头雄蜂）亮腹釉小蜂，此后分别在第14、16 d再次加入18头亮腹釉小蜂[7]。在美国加利福尼亚州，每个养殖笼中放入15株九里香苗（苗龄6个月），在养殖笼接入300头柑橘木虱成虫，5 d内将产完卵的成虫移除，在10～11 d大部分若虫为3～4龄。每个笼子含有1800～2000头柑橘木虱若虫，按照亮腹釉小蜂:柑橘木虱若虫为1:30接入亮腹釉小蜂雌蜂（60～65头每笼）和每笼10～15头亮腹釉小蜂雄蜂[20]。本研究按接种比例柑橘木虱:新芽数为2:1接入柑橘木虱时为最佳，每笼收获木虱数量为1513.33头。按接种比例亮腹釉小蜂数:柑橘木虱若虫为1:10接入亮腹釉小蜂时为最佳，每笼净收获646.67头亮腹釉小蜂且每笼净收获亮腹釉小蜂的雌蜂数量为469.00头。

国外通过九里香为植物载体规模化生产亮腹釉小蜂，但是随着九里香重复使用次数的提高，生产柑橘木虱若虫的能力会降低[29]。本生产体系与国外不同的是采用年橘为植物载体生产亮腹釉小蜂，相比之下，年橘嫩芽数量更多，年橘在12.6 d长出3 cm以上的新芽39.6个，因此，采用整体修剪法修剪年橘为最佳，生产能力更大，苗木恢复也较快，循环利用率高。

亮腹釉小蜂生产体系中一些环节仍在优化和提高。转移已产卵的柑橘木虱方面，美国佛罗里达州采用光诱和吸虫器的方式收集柑橘木虱[21]，而单独采用吸虫器收集柑橘木虱，相对而言耗费时间较多；另外，生产寄生蜂的运输时间过长会导致存活率较低，在美国佛罗里达州，对已包装的亮腹釉小蜂采用夜间运输、次日送达的方式保证寄生蜂的存活率[21]，或许还可考虑剪下带有寄生蜂蛹的枝条，连蛹带枝一起运输，解决运输中寄生蜂存活率低的问题；田间释放寄生蜂方面，目前采用直接释放成虫的方式，沈祖乐[22]采用蜂卡与蜂盒进行释放的方法值得借鉴，能够使寄生蜂在田间释放前积累足够的产品数量，并能定量、定时的对其种群数量做到精准的掌控。本研究通过建立优化规模化生产亮腹釉小蜂的体系，实现亮腹釉小蜂周年生产，从而进一步推动柑橘木虱生物防治的研究与应用。