李 洁，高 博，吴爱睿，郑爱斌，赵 丽，齐国涛，朱才业

（1.甘肃省白银市白银区农业农村局，甘肃 白银 730900；2.甘肃省畜牧兽医研究所，甘肃 平凉 744000；3.甘肃省白银市平川区畜牧兽医技术服务中心，甘肃 白银 730913；4.甘肃省白银市平川区动物疫病预防与控制中心，甘肃 白银 730913；5.甘肃农业大学，甘肃 兰州 730070）

小反刍兽疫（PPR）是由小反刍动物麻疹病毒（SRMV）引起的一种传染性极强的小反刍动物疾病，原称小反刍兽疫病毒（PPRV）[1]。PPRV（副粘病毒科，麻疹病毒属）在绵羊和山羊中引起一种急性发热性疾病，受感染畜群的发病率和死亡率均较高。副粘病毒都具有负性、非节段的RNA基因组，其宿主范围和致病决定因素已被利用反向遗传学进行了广泛研究[2]。小反刍兽疫（PPR）是山羊和绵羊的一种病毒性疾病，最早于20世纪40年代在西非发现，自1993年以来在中东和南亚流行，但印度对该病毒的首次描述是1987年[3]。2007年我国西藏西南部阿里地区首次发现了PPRV，2013年12月新疆维吾尔族自治区发现PPRV，2014年4—5月，安徽、贵州、广西、湖北、湖南、山西、新疆、云南和浙江等地区暴发PPRV[4]。目前PPR在接种疫苗后得到了有效控制，但部分养殖场仍受到该病的严重侵害，这可能源于疫苗免疫未成功导致某些个体或畜群未得到免疫保护。

目前规模化羊养殖场都对PPR进行了免疫接种，但在抗体检测时常发现存在羔羊免疫失败的现象。因此，研究影响PPR疫苗免疫效果的因素是非常重要的。母源抗体可通过幼龄动物吸吮母乳时获得，形成免疫保护机制，在幼畜母源抗体滴度较高时进行免疫接种，会导致免疫效果不佳甚至免疫效价为0，因此对幼畜免疫时要针对母源抗体的干扰作用设定首免日龄[5]。免疫前应调查待免畜群的生理状态，避免在机体恢复期或寄生虫感染的情况下进行疫苗接种[6]。机体免疫功能在应激状态下会对免疫效果产生抑制作用，待免畜群处于恶劣环境时不宜接种[7]。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物 试验羊只为某养殖场同期分娩的经产绵羊20只（于分娩前28 d皮下注射小反刍兽疫活疫苗1 ml）及其所产的20只羔羊。1.1.2 主要试剂与仪器 小反刍兽疫活疫苗，由新疆天康生物股份有限公司生产，生产批号2021006-1；小反刍兽疫病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒，由青岛立见生物科技有限公司生产，生产批号20 172113；酶标分析仪（型号DNM－9606）购自北京普朗新技术有限公司；智能生化培养箱（型号150A）购自金坛市医疗仪器厂。

1.2 方法

1.2.1 样品采集、处理方法 将20只母羊分别于免疫后第7 d、第14 d、第21 d、第28 d进行颈静脉采血；20只羔羊分别于出生第0 d、第7 d、第14 d、第28 d、第45 d、第60 d、第90 d进行颈静脉采血。使用真空采血管每管采集3 ml左右全血，4 ℃过夜静置后分离血清，同时进行标记，于-20 ℃保存。

1.2.2 抗体水平检测 用小反刍兽疫病毒阻断ELISA 抗体检测试剂盒检测待检血清中PPRV的抗体水平，根据试剂盒说明书判定结果，即待检血清阻断率PBs＞50，结果判为阳性；PBs≤50，结果判为阴性。

待检血清阻断率PBs=100-ODs/ODcm*100。

2 试验结果

2.1 母羊抗体检测结果

由表1可知，母羊接种疫苗后第14 d的抗体阳性率为80%，符合国家制定的合格率标准（合格率≥70%）。接种后第21 d抗体阳性率达到90%，具有较高的保护率。接种后第28 d抗体阳性率达100%，全部免疫合格。

表1 母羊抗体检测结果

2.2 羔羊抗体检测结果

由表2可知，羔羊刚出生时由于未吸吮母乳，体内未产生母源抗体；出生第7 d、第14 d的母源抗体阳性率达100%；出生第28 d、第45 d的母源抗体阳性率分别为95%、85%，说明羔羊在45日龄以前均可得到母源抗体较好的保护，可防止PPRV早期侵入；出生第60 d母源抗体阳性率下降到70%，刚达到国家规定的免疫合格率；出生第90 d母源抗体阳性率降为45%，说明随着羔羊日龄的增加母源抗体水平呈明显下降趋势。建议在羔羊60日龄左右免疫接种PPR疫苗。

表2 羔羊母源抗体检测结果

3 讨论

3.1 PPR活疫苗的免疫效果

PPR严重影响畜牧业发展，我国将其列为一类动物疫病，严格落实免疫程序是提高免疫效率及防控PPR的重要途径[8]。对白银市白银区小反刍兽疫疫苗临床免疫效果的调查显示，没有出现不良反应，怀孕母羊未因免疫而出现流产现象。白银区进行疫苗免疫后，没有发生小反刍兽疫疫情，可见该疫苗的安全性较高[9]。本试验对怀孕母羊进行PPR免疫，分别于不同时期进行抗体检测，结果表明，在免疫后第14 d抗体合格率达到国家标准，免疫后第21 d抗体阳性率达90%，免疫后第28 d全部呈阳性，这与任杨等[10]的研究结果一致。

3.2 母源抗体的消长规律

母源抗体的衰减会抑制疫苗接种，如麻疹疫苗接种后血清转化的抑制。这一现象在人类医学和兽医学中都有描述，与所使用的疫苗类型无关，与母源抗体的数量有关，母源抗体滴度越高，持续时间越长[11]。母源抗体是影响疫苗免疫效果的因素之一，在羔羊PPRV母源抗体滴度相对较高时免疫，会抑制机体产生保护抗体，从而造成免疫效果不佳或失败[12]。本试验对绵羊羔羊进行母源抗体水平检测，结果表明羔羊出生后第7 d、第14 d母源抗体阳性率均为100%，第60 d母源抗体阳性率为70%，第90 d母源抗体阳性率降至45%。李芳等[13]研究表明大部分羔羊在60日龄后，母源抗体水平显著下降，因此建议羔羊的首免时间为60日龄前后。田凯鸽[14]研究表明不同养殖模式下羔羊PPRV母源抗体在放养时比圈养的持续时间长，这与放养羔羊一直可以吸吮母乳有关。

4 结论

PPR活疫苗接种后第28 d抗体检测合格率可达100%，在实际生产过程中可根据此日龄进行采血送检。绵羊羔羊PPR活疫苗接种建议在60日龄前后。由于影响羔羊母源抗体的因素较多，母源抗体消长水平会有所不同，需根据检测结果制定较完善的免疫程序。