刘伟

中药柴胡主要入药部位是其经过干燥处理的根,若在春季、秋季进行采挖,摘去不需要的茎、叶,并对根部泥沙进行洗净,对其干燥处理后进行存储。作为中医较为常见解表药,柴胡又名地熏、柴草,为味道苦涩,略带寒性,性味苦、微寒,对肝脏梳理具有较强效果。在感冒、疟疾等病症中具有较强治疗效果,所以其具有较大鉴别价值。柴胡由伞形科植物Bupleurum chinense DC 即北柴胡或者狭叶柴胡Bupleurum scorzonerifolium Willd 即南柴胡的根组织干燥形成［1］。北柴胡植株高约50～85 cm,其主根呈棕褐色,质地坚韧,不容易被折断,外观较为粗大,断面以片状显层,拥有较强纤维性,气味有淡香味,而味道则微苦,在吉林、河北等城市较为常见。而南柴胡高约45～70 cm,为多年生草本,其主根为浅棕黄色,质地软,容易被折断,其断面不显层,也具有纤维性,气味则是腐败油脂气味［2］；倒披针形中部叶,长约3～11 cm,宽约0.6～1.6 cm,纵脉7～9 条,下有粉霜；拥有细长的花梗,苞片2～3 片,为狭披针形,花呈现鲜黄色；双悬果多为椭圆形,尺寸为长3 mm、宽2 mm,在黑龙江、内蒙古等地均有分布。入药柴胡味道辛辣且苦涩,微有寒性。归于肝、胆及肺经,主要功效为疏肝解郁、退热解疟；多用于治疗感冒发热与月经不调等常见病,使用3～10 g/次进行熬制食用。但是柴胡是调动肝风、肝阳的一类药材,如果患者气机上逆,则要谨慎用药。

1 材料与方法

1.1 材料 使用柴胡(吉林信成药业有限公司)药材；95%乙醇(山东辉安化工有限公司)、石油醚(淄博市临淄天德精细化工研究所)、氯仿(南京润升石化有限公司)、甲醇(泰州市鸿兴化工有限公司)作为分析纯；石油醚需要在60～90℃环境下进行保存。使用超声波清洗器SK1200H(上海科导超声仪器有限公司)；紫外分光光度计使用MultiskanSkyHigh 全波长酶标仪(赛默飞世尔科技Thermo Fisher Scientific),拥有220 nm/min的扫描速度,尺度扩张每厘米可扩张20 nm,1 nm 狭缝,拥有200～400 nm 的扫描波与1 cm 的石英吸收池；PTY-85/124 便携式天平(上海保衡电子科技有限公司)作为称量工具。

1.2 方法

1.2.1 柴胡炮制方法 普通柴胡：将收购材料中茎叶去除,只保留根部,将其携带的泥沙进行清洗,捞出后等待水分彻底将柴胡润透后,尽快切片并晒干。醋柴胡：以已制成柴胡片为材料,按照50 kg 柴胡片与12 斤醋的比例将其彻底搅拌拌匀,让醋与柴胡片充分接触,将其放置在锅中使用文火进行炒制,直到柴胡片将醋充分吸收,质地略微干燥,及时关火取出,将其晒干。鳖血柴胡：将已制成柴胡片作为材料,以50 kg 柴胡片与200 个活鳖取血的比例,使用温水稀释鳖血,在大盆中将柴胡片进行充分拌匀并闷润,在锅内使用文火略微炒制、放凉。酒柴胡：以100 kg 柴胡片与10 kg黄酒的比例,使用黄酒将柴胡片充分拌匀并闷润,使用文火炒干、放凉。柴胡炭：使用文火将柴胡片炒到外表呈现黑色后向锅内适度喷洒清水,降低柴胡片表面问题并晾干。蜜柴胡：将锅中的蜂蜜进行加热,在其沸腾时将柴胡片倒入锅中,文火炒至颜色变为深黄色,用手触摸不粘手即可［3］。从上述几类柴胡药材炮制方法可以看出,鳖血柴胡为暗红色,酒柴胡为淡黄色,柴胡炭为黑色,蜜柴胡为深黄色,与原材料的柴胡片都有一定辨别性。但是使用醋搅拌并炒制的醋柴胡,外表并无较强辨识度,很容易与柴胡混淆。醋柴胡具有解热退烧效果,所以治疗感冒发烧效果较好。但是柴胡片则疏肝理气,对肝郁气滞引起的胸胁胀痛具有较好治疗效果,且需要与其他药物进行配合治疗［4］。所以,需要采用合适方法对普通柴胡与醋柴胡进行鉴别,保证药效。

1.2.2 紫外谱线组法 紫外谱线组法是基于紫外吸收光谱法(ultraviolet absorption spectrophotometry)基础上进一步拓展的新型方法。紫外吸收光谱法借助物质在紫外线不同波长中对其吸收能力存在差异,方便分析物质构成,设备多使用紫外可见分光光度计。从光源散发紫外线利用光栅对其进行分光处理,使其可以穿过待测样品溶液和对照组溶液,将带有溶液相关波长信息投射至倍增管上,借助光电转换方式将紫外线光携带溶液信息进行放大,再使用紫外吸收光谱绘制图,可待测物质分析其定性数据［5］。因为紫外线蕴含较大能量,所以该方法具有较强灵敏度。对于一些芳烃、杂环化合物等具有较强鉴别效果,所以多用于划分与其存在相近特性的其他物质,或者对于空气或水体污染情况进行监测。比如使用清水作为对照组,使用该方法对废水硝酸盐进行测定［6］。而在近些年的应用中,对于一些中药材,例如柴胡与醋柴胡区分也具有较强的应用效果。

1.2.2.1 溶液制备 选择待鉴别的柴胡与醋柴胡20～40 目的样品粗粉,称取1 g,共称取5 份,并将其放置在50 ml 带有软塞实验室用锥形瓶内,并加入无其他杂质的蒸馏水作为对照组,将作为分析纯的氯仿、石油醚(60～90℃)、95%乙醇、甲醇,分别取20 ml 注入锥形瓶中,保持室内温度恒定,再浸泡12 h 后使用超声波清洗器对粗粉进行充分清洗,保持1 h 清洗时间,将残渣过滤干净后转移至干净的新锥形瓶,进行备用［7］。

1.2.2.2 光谱预处理 在进行鉴别试验中获得光谱中含有鉴别样品信息,也会夹杂来自仪器或背景光等多余噪声,需要借助小波去噪方法处理光谱信号x(t),提升信息质量。所以将小波函数的ψ(t)进行位移τ,并以不同尺度α 条件下将待鉴别信号x(t)进行处理：

其等效频域为：

其中,X(ω)、ψ(ω)分别为Ⅹ(t)、ψ(t)傅里叶变换。

为处理高斯叠加产生的转折点,提升小波系数连续性,借助软阈值进一步去噪。

其中,Wλ为软阈值在收缩状态下函数,sgn(W)为w 符号,当阈值λ 比w 小时将w 与λ 作差,取两者绝对值即软阈收缩数值,当阈值λ 大于w 时与λ 之和,即可作为软法收缩数值使用。

2 结果

使用紫外可见分光光度计对待测试溶液进行分别测定,并以其自身溶剂作为空白对照组,使用设备进行扫描后获得相应紫外图谱,将所有图谱进行叠加后获得紫外谱线组,可以发现不同溶液的吸光度从大到小分别为：蒸馏水、甲醇、95%乙醇、氯仿,最后为60～90℃的石油醚［8］。而且,无论是普通柴胡还是醋柴胡,所有提取液都在200 nm 波长条件下达到最大吸光度,随后随波长增加而逐渐下降。而在所有溶液中,乙醇溶液具有最高光谱吸收能力,所以将普通柴胡甲醇溶液与醋柴胡甲醇溶液进行对比,可以发现在相同波长条件下,普通柴胡在吸光度方面要略高于醋柴胡［9］。将普通柴胡与醋柴胡进行鉴别后,将其样本应用于实验室用白鼠上,鉴别出醋柴胡在解热与退烧方面具有较强效果,而普通柴胡则是具有较强疏肝理气功效。

3 讨论

针对柴胡多份样品进行多次测定,可以发现其光谱吸收的最高峰位没有太多变化,但是在其他波长情况下光谱吸收度会有一定差异。即使用紫外谱线组法作为柴胡类型分辨具有较强指标重现效果,可以有效提升准确度。而根据不同分析纯制成的提取液存在较大差别,因为其溶剂拥有不同成分,所以将紫外谱线图进行拼装为组图,也会看出较大变化与差异,可以利用其对中药材进行鉴别。而将柴胡甲醇提取液与醋柴胡甲醇提取液进行对比,对获得紫外谱线图进行观察,可以发现在进行分析纯炮制中药材时前后并没有明显变化,有效成分并不会因制成溶剂而发生相应变化［10］。而在200～300 nm 波长范围内,柴胡氯仿提取液与醋柴胡氯仿提取液在紫外谱线图谱可以看到明显差异,可以使用这种方法对柴胡与醋柴胡进行有效鉴别。同时,本文使用紫外线谱组法对柴胡与醋柴胡鉴别方法也可以作为鉴别其他不易使用感官进行分辨中药材的一种方法［11,12］。

综上所述,虽然使用紫外谱线组法可以有效鉴别柴胡与醋柴胡之间的区别,达到高质量药材分辨效果,但是该方法仍然只是一种借鉴方法,并不是只有这一种鉴别方法,其余还有利用大数据技术收集整理大量药材样本,借助分析药材微观分子与数据库进行对比,从而实现药材高质量鉴别。在实际应用中应以实用性为主,避免出现使用技术死板、不懂变通的应用误区。