王乡，陈积，唐茂华

广东医科大学附属第二医院传染科，广东 湛江 524003

慢性乙型肝炎（CHB）是导致肝硬化及肝癌的主要原因［1］。我国作为CHB 高发国家，每年有超过100 万新发CHB 患者，由CHB 引起的肝硬化及肝癌比例达到60%和80%［2］，因此CHB 防治任务十分艰巨。血红素加氧酶1（HO-1）是一种最容易被诱导的应激反应蛋白酶，在细胞缺氧、炎症刺激时高表达［3］。研究发现，HO-1 参与机体抗炎、抗 氧 化 过 程［4］。 高 迁 移 率 族 蛋 白B1（HMGB1）是一种机体炎症反应后期的调节因子，在自身免疫反应等非感染性炎症反应中发挥重要作用［5］。一定范围内的HMGB1 参与机体保护性免疫反应，但随着水平升高，可导致免疫反应过激而造成炎症损伤［6］。研究显示，CHB 患者存在机体免疫反应亢进，可促进HMGB1 表达［7］。本研究通过检测不同病情程度CHB 患者血清HO-1及HMGB1 水平，探讨其与病情程度的相关性，以及二者对预后的预测效能，为CHB 的临床诊治提供新思路。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2020 年1 月—2021 年1 月我院收治的CHB 患者100 例（CHB 组），男63 例、女37例，年龄18～63（44.12 ± 5.92）岁，BMI（23.87 ±2.36）kg/m2，合并高血压20 例、糖尿病11 例，吸烟29 例，饮酒11 例。CHB 诊断符合《慢性乙型肝炎防治指南（2019 年版）》［8］中的标准，Child-Pugh 分级A级36 例、B 级40 例、C 级24 例。排除标准：其他病毒引起的肝炎；合并原发性肾脏疾病；合并心脑血管疾病、恶性肿瘤、结缔组织病；精神异常或认知功能异常；妊娠或哺乳期妇女。另选取性别、年龄匹配的同期健康体检者50 例作为对照组，男28 例、女22 例，年龄18～65（44.42±5.53）岁。本研究通过我院医学伦理学审核，受试者均签署知情同意书。

1.2 血浆HO-1、HMGB1 检测方法 对照组入组后、CHB组治疗前采集空腹外周静脉血，采用ELISA法检测血浆HO-1、HMGB1含量。

1.3 治疗与预后随访方法 CHB 组根据《慢性乙型肝炎防治指南（2019 年版）》［8］给予相应的治疗措施。随访2年，记录患者的死亡情况。

1.4 统计学方法 采用SPSS23.0统计软件。正态分布且方差齐的计量资料以±s表示，组间比较采用t检验；计数资料采用百分数（%）表示，组间比较采用χ2检验，n小于40、t小于1 或小于5 大于1 的应校正，采用Fisher确切概率法。多组间比较采用方差分析，两两组间比较采用LSD-t检验。采用Spearman相关分析血浆HO-1、HMGB1含量与Child-Pugh分级的关系。采用ROC 曲线分析HO-1、HMGB1 对患者预后的预测效能。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血浆HO-1、HMGB1 水平比较 不同Child-Pugh 分级患者的血浆HO-1、HMGB1 水平均高于对照组（P均＜0.05）。CHB 组不同Child-Pugh分级患者之间比较，C 级血浆HO-1 水平低于A、B级，HMGB1 水平高于A、B 级（P均＜0.05）；B 级HO-1 水平低于A 级，HMGB1 水平高于A 级（P均＜0.05）。见表1。

表1 两组血浆HO-1、HMGB1水平比较（±s）

表1 两组血浆HO-1、HMGB1水平比较（±s）

注：与C级比较，*P＜0.05；与B级比较，#P＜0.05。

组别CHB组A级B级C级对照组n 36402450 HO-1（U/L）114.39±40.22*#83.55±14.27*43.45± 8.267.85± 2.12 HMGB1（μg/L）30.87±13.56*#56.86±14.34*67.86±13.4612.23± 2.34

2.2 CHB 患者血浆HO-1、HMGB1 与Child-Pugh 分级的相关性 血浆HO-1 与Child-Pugh 分级呈负相关（r=-0.782，P＜0.01），HMGB1 与Child-Pugh 分级呈正相关（r=0.613，P＜0.01）。

2.3 不同预后CHB 患者的血浆HO-1、HMGB1 水平比较 对患者随访2 年，存活84 例，死亡16 例。死亡患者血浆HMGB1 水平高于存活患者（P＜0.05），HO-1 水平低于存活患者（P＜0.05）。见表2。

表2 不同预后CHB患者血浆HO-1、HMGB1水平比较（±s）

表2 不同预后CHB患者血浆HO-1、HMGB1水平比较（±s）

注：与存活者比较，*P＜0.05。

预后存活死亡n 8416 HO-1（U/L）92.05±36.2748.15±15.56*HMGB1（μg/L）46.65±19.1768.48±17.20*

2.4 血浆HO-1、HMGB1对CHB患者死亡的预测效能 根据血浆HO-1、HMGB1绘制ROC曲线，结果显示，HO-1 联合HMGB1 预测CHB 患者死亡的AUC 最大，为0.905（0.844～0.965），灵敏度为99.2%，特异度为77.4%。见表3。

表3 血浆HO-1、HMGB1对CHB预后的预测效能

3 讨论

一直以来，慢性乙肝都是全球性健康问题，全球30.0%的肝硬化及45.0%的肝癌患者由HBV 感染引起，每年约65 万人死于慢性乙肝引起的肝衰竭、肝硬化及肝癌［9］。目前，临床对于乙型肝炎的具体发病机制尚未完全阐述清楚，但相关资料显示不同炎性细胞因子在不同类型乙型肝炎患者中均起着至为关键的作用［10-11］。

HO-1 是一种热休克蛋白，机体在病毒、缺氧等多种刺激下使细胞的活性氧水平增加，可促进HO-1高表达，并进一步通过催化血红素发挥抗氧化及调控细胞凋亡作用［12］。研究发现，当HBV 损伤肝细胞后，可刺激HO-1 在肝实质及间质细胞中表达，通过代谢产物铁蛋白、胆绿素等发挥抗氧化、调控凋亡等作用，保护肝细胞，进而可延缓肝硬化的发生［13］。本研究结果显示，随着Child-Pugh 分级增加，HO-1 水平逐渐降低，HO-1 与Child-Pugh 分级存在负相关关系。提示HO-1 对CHB 肝功能及肝损伤有一定保护作用。而对于Child-Pugh 分级为C 级患者，其肝功能损伤已经到了终末期，因此大量肝细胞坏死，肝细胞功能严重损伤，HO-1释放随之明显减少。

HMGB1属于炎症细胞因子家族，不仅可以损伤细胞发挥促炎作用，且可以与活化的免疫细胞相互作用进一步损伤细胞，特别是较高水平时产生的免疫过激反应甚至超过原损伤引起的炎症反应，最终引起器官衰竭［14］。动物实验显示，肝炎导致的肝硬化大鼠的肝脏纤维间隔区及变性坏死区均有HMGB1 的 高 表 达［15］。此 外HMGB1 通 过 参 与MAPK、NF-κB 等信号转导通路增加了肝细胞外基质合成，进而促进了肝纤维化的发生［16］，且HMGB1的高表达与肝硬化的严重程度正相关［17］。侯丽娟等［18］动态观察重型乙肝患者HMGB1 水平亦发现，随着肝功能损伤程度加重，HMGB1 水平逐渐降低，考虑其可能与终末期肝细胞大量坏死有关。本研究结果显示，随着Child-Pugh 分级增加，HMGB1 水平逐渐升高，HMGB1 水平与Child-Pugh 分级存在正相关关系。表明HMGB1参与了CHB病情进展过程。

CHB 在我国有较高感染率，肝脏受到HBV 侵袭，会引起肝脏损害和炎症反应，进而导致肝纤维化、肝硬化甚至肝癌，严重威胁人类的生命健康。准确评价肝炎所处免疫状态及肝内炎症进展程度，不仅是选择合适的治疗方案和有效控制患者病情的关键，且可靠、有效的血清学指标对CHB 预后评价同样有重要价值。本研究结果显示，CHB 患者经过积极、正规治疗2 年后，有16.0%的CHB 患者死亡，可见CHB 患者的病死率较高。且死亡组HMGB1 水平较高，而HO-1 水平较低。进一步采用ROC 曲线分析，发现HO-1＜72.84 U/L 及HMGB1≥52.19 μg/L 单 独 预 测CHB患者死亡的AUC 较低，而两者联合应用预测患者死亡的AUC 为0.905，因此建议两者联用价值更高。

综上所述，CHB 患者随Child-Pugh 分级的升高，血浆HO-1逐渐降低，而HMGB1逐渐升高，两指标可以反映CHB病情严重程度；此外预后不佳的CHB患者血浆HO-1 更低，而HMGB1 水平更高，且HO-1＜72.84 U/L 联合HMGB1≥52.19 μg/L 在预测CHB 预后中有较高的价值。