张曼曼

（江苏奥赛康药业有限公司，江苏 南京 211100）

引言

盐酸雷尼替丁胶囊对于治疗溃疡病和胃酸高分泌病具有十分重要的作用，尤其在治疗十二指肠溃疡时十分有效。在盐酸雷尼替丁的实际应用过程中，临床上主要使用胶囊剂，而在美国和英国药典以及日本药局方当中均未对胶囊剂进行收载。我国在2000 版药典当中针对盐酸雷尼替丁胶囊的原料和制剂，采用TCL 法对相关物质进行了控制，但发现用碘蒸气方法显色不够稳定，而且重现性相对较差。对此，本文结合原料含量测定方法开展了具体的实验研究，并运用HPCL 法对盐酸雷尼替丁胶囊的相关物质进行分析，通过自身对照法来进行计算。通过具体实验可以发现，运用HPTC 法可以有效分离盐酸雷尼替丁和相关物质峰，并能够限量分析相关物质，操作十分简便和快速，准确性相对较高。

1 盐酸雷尼替丁胶囊概述

盐酸雷尼替丁的化学名称为N’-甲基-N-[2-[[[5-[（二甲氨基）甲基]-2-呋喃基]-甲基]硫代]乙基]-2-硝基-1，1-乙烯二胺盐酸盐，主要用于治疗反流性食管炎、胃溃疡以及其他高胃酸分泌疾病等。其药理作用主要包括以下两方面，一是，药理雷尼替丁具有竞争性阻滞组胺与H2受体结合的作用。抑制胃酸作用，以摩尔计为西咪替丁的5 倍～12 倍，因此为强效的H2受体阻滞剂。具体来说，盐酸雷尼替丁胶囊是一种选择性的H2受体阻滞剂，通过作用于胃壁细胞上的H2受体，抑制胃酸的基础分泌和进食后的分泌，从而降低胃酶的活性。目前主要用于胃炎、胃糜烂、胃溃疡、十二指肠溃疡的治疗，此外，对幽门螺旋杆菌感染也有抑制和杀灭作用。治疗的疗程跟所治疗的疾病有关系，治疗胃炎、胃糜烂，雷尼替丁疗程为2 周左右[1]。治疗胃溃疡、十二指肠溃疡，疗程在4 周～8 周。伴有幽门螺旋杆菌感染时，需要先联合使用其他3 种药物，将幽门螺旋杆菌先根治，然后再治疗胃炎、胃糜烂、胃溃疡、十二指肠溃疡等。二是，毒理小鼠口服的LD50 1440 mg/kg～1 750 mg/kg。连续口服5 周的每天最大无毒剂量，大鼠（雄）为500 mg/kg，大鼠（雌）为250 mg/kg，犬为40 mg/kg。连续26 周的每天最大无毒剂量，大鼠为100 mg/kg，犬为40 mg/kg。小鼠口服100 mg/kg～200 mg/kg 达114 周，大鼠口服100 mg/kg～2 000 mg/kg 达129 周，均未见致癌作用[2]。

2 HPCL 法分析盐酸雷尼替丁胶囊中有关物质

2.1 仪器和试剂

本次实验需要采用的仪器包括高效液相色谱仪和二极管阵列检测器等，试药则由我国药品生物制品检定厂提供的盐酸雷尼替丁，样品则为我国8 个省市厂家所生产的市售药品，甲醇选用色谱纯，其余为分析纯。

2.2 实验方法和结果

2.2.1 色谱条件

色谱柱的柱温为25℃，流动相主要为0.1 mol·L-1醋酸铵-甲醇，其体积比为64∶36，流速则设定为1.0 mol/min-1，检测波长度为320 nm，进样量则达到10 μL。

2.2.2 检测波长和流动相，确定样品浓度

在本次实验当中，原料药含量的测定波长主要采用320 nm。上述流动相不仅能够保证峰形，而且还具有比较适中的保留时间。两倍时间主要是指在12 min 内完成具体的分析工作，并要确保盐酸雷尼替丁和相关物质能够得到有效分离，满足具体的要求。样品质量浓度主要选择0.15 mg/mL，这样不仅能够稀释100 倍，而且还能够与对照液响应相适中，确保检出量能够满足具体要求，具有合适的信噪比，能够与药典当中含量测定浓度保持一致[3-4]。这样在色谱条件相同时，不仅可以进行定量分析，而且还能够检查相关物质[5]。

2.2.3 空白实验

相关实验人员需要采用流动相制成相应的空白溶液，并按照“有关物质检查法”进样，但其色谱图上并没有任何色谱峰，对照品和供试品都选用盐酸盐，在一定时间内，自身对照的稀溶液仍然存在，而且量保持不变。在同等色谱条件下使用稀盐酸进行进样，可以证实为氯离子峰。

2.2.4 线性实验

对适量的盐酸雷尼替丁对照品进行精密称取，在加入流动相后进行定量稀释，从而制成相应浓度的溶液。之后，相关实验人员需要按照“有关物质检查法”的相关方法进一步开展实验，从而得到进样量和峰面积回归方程，其中，进样量需要控制在0.3μg/μL～3 μg/μL 范围以内，且要具有良好线性[6]。

2.2.5 专属性实验

相关实验人员在采用HPLC 法开展实验时，需要确保分离度能够满足具体要求，而通过回收率实验，可以对HPLC 法的准确程度进行验证，具有较强的专属性。

2.2.6 重复性实验

相关实验人员需要连续取同一批样品进行3 次相关物质分析，各杂质峰面积和与自身对照主峰面积比保持相同，其中n=6，RSD=0.28%。相关实验人员还需要连续对同一样品溶液进行5 次取样，各杂质峰面积和与自身对照主峰面积间的比保持相同，其中n 为5，RSD 为0.28%。

2.2.7 稳定性实验和耐用性实验

实验人员需要分别取供试品溶液在0、4、8、24h进行进样，并要对杂质峰总面积和对照液比较进行测定，可以发现，其比例基本保持不变。通过对不同型号的C18 柱进行使用，对同一份样品进行测定，可以发现只是在保留时间方面存在一定的差异，而各杂质峰面积和对照液峰面积之间相比，比例基本保持不变。

2.2.8 有关物质检查法

实验人员需要将适量盐酸雷尼替丁胶囊内容量取出，然后进行精密称定，在加入流动相溶解之后，可以制成0.15 mg/mL的溶液，将其进行过滤处理，将初滤液弃去，以续滤液作为供试品溶液，并要精密吸取1 mL，在100 mL量瓶当中放置。之后，需要加入流动相进行稀释，一直达到刻度值，然后摇匀处理，最后得到0.001 5 mg/mL 的对照溶液。相关实验人员需要取10 μL 对照溶液注入液相色谱仪，并对仪器灵敏度进行调整，确保主成分色谱峰高度可以达到量程的20%～25%。然后，需要取10 μL供试品溶液，将其注入液相色谱仪中，对色谱图进行记录，一直到供试品溶液主成分峰的保留时间的2 倍。对供试品溶液色谱图进行分析，例如显杂质峰，各杂质峰的面积总和应该小于对照品溶液主峰面积的4 倍[7]。

2.2.9 样品中相关物质测定结果

根据拟定方法对盐酸雷尼替丁胶囊相关物质进行分析，并与TLC 法进行对比，可以得到如表1 结果。

表1 10 批样品有关物质HPLC 分析结果及与TLC 对比

3 结果讨论

首先，根据上述实验和结果可知，通过对HPLC法进行使用，可以对盐酸雷尼替丁胶囊样品中相关物质总量进行准确检查，并能够对不同样品杂质情况进行区别。例如，9 号样品采用HPLC 测定，可以发现其具有3 个杂质峰，而运用TLC 方法则只出现了一个杂质斑点，且只是对比其他样品颜色相对深一些，由此可以看出，HPLC 的分离效果相对较好。

其次，选用自身对照法来分析相关物质，该方法当中所规定的供试品溶液各杂质峰面积和应该低于自身对照溶液主峰面积的4 倍，这与我国药典的现行方法相符合。

最后，该方法的色谱条件可以同时测定盐酸雷尼替丁胶囊含量，其加样回收率可以达到100.8%，而RSD 则可以达到0.91%，其中n 为6。在相同色谱条件下，不仅可以进行定量分析，而且还能够检查相关物质，采用此方法同时测定10 批样品含量，其结果符合原标准方法。

4 结语

综上所述，通过采用HPLC 法，可以有效分析盐酸雷尼替丁胶囊的有关物质，而且此种方法相对TLC 方法具有更为明显的优势，不仅操作简单方便，而且影响因素相对较少，可以有效实现盐酸雷尼替丁和其他杂质之间的完全分离，限量检查相关物质，而且还可以在同一色谱条件下检查有关物质和进行含量测定，因此应用价值较高，应得到进一步推广和应用。