张海梅 张嘉刚 易敏 杨世荣 马苑宁

(青海省第五人民医院，青海 西宁 810000)

胃癌(gastric cancer，GC)是全球癌症相关死亡的主要原因之一。综合治疗策略大大提高了患者的治疗效果，但大多数胃癌患者的预后仍然较差[1]。相关研究[2]发现，恶性肿瘤大多由于长期炎症发展形成，Gagliani等人提出“炎症—肿瘤”假说，并作出相关研究。绒毛(villin)蛋白是一种钙调节的肌动蛋白结合蛋白，在正常成人组织中，在小肠黏膜，肾近端小管，肝内胆管，胰管，胆囊上皮等的上皮细胞中观察到绒毛蛋白的表达。实验[3]证明，绒毛蛋白被认为是最重要的肠道分化之一标记。本课题主要研究NF-κB、villin蛋白的表达与胃癌临床病理特征及患者预后的相关性。

1 材料与方法

1.1临床材料 从我院收集2015年1月至2018年12月接受胃癌根治性切除术患者的胃癌组织36例，及邻近正常癌旁组织36例(对应胃癌患者的正常组织)。同时选36例健康者为对照组进行社会学人口特征的对比，见表1。TNM分期根据美国癌症联合委员(AJCC)第8版分期系统进行分类[4]，所有数据进行匿名分析，研究经我院伦理委员会批准，患者均知情同意。

表1 社会学人口特征比较

1.2主要试剂 兔抗人NF-κB单克隆抗体，购于美国Abcam公司；鼠抗人villin单克隆抗体，购于上海研生生化试剂有限公司；免疫组化试剂盒，购于上海研生生化试剂有限公司。无水乙醇、二甲苯、DAB染色液、苏木素复染液、PBS缓冲液、中性树胶等。

1.3方法

1.3.1免疫组织化学法 将石蜡包埋组织切片用于实验研究。组织切片放入二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中进行脱蜡，之后放入无水乙醇、90%、80%、70%的酒精中进行水化，冲洗净后放入PBS缓冲液中浸洗3次，5 min/次，擦干后每片样品滴加200 μL的一抗，4℃冰箱孵育过夜。……