杨青青，陆强，刘佳

（苏北人民医院 药学部，江苏 扬州225001）

婴幼儿阶段是中枢神经系统发育的高峰期和敏感期，该阶段神经系统可塑性强，易受外界刺激[1]。有研究显示，围生期使用麻醉药物可能产生神经毒性，损伤神经元，进而影响认知功能[2]。依托咪酯是临床围生期患儿手术常用的全身麻醉药[3]。有研究表明，依托咪酯可通过兴奋γ-氨基丁酸受体，抑制神经系统兴奋，产生麻醉效果，但其对中枢神经元的影响及对远期认知功能的影响尚存在争议[4]。另有研究表明，中枢胆碱能系统，尤其是烟碱型乙酰胆碱受体（nicotinic acetylcholine receptor, nAChR）功能与认知功能关系密切[5]。本研究通过观察新生大鼠依托咪酯暴露后的远期认知功能变化，并观察nAChR 功能的变化，为临床研究提供理论支持。

1 材料与方法

1.1 实验动物

清洁级SD 大鼠，48 只，7 d 龄，均为雄性，体质量10～15 g，饲养于扬州大学动物实验中心。实验动物生产许可证号：SCXK（苏）2017-0007，实验动物使用许可证号：SYXK（苏）2017-0044。

1.2 主要试剂与仪器

依托咪酯注射液（江苏恒瑞医药股份有限公司，国药准字H32022379，规格10 ml：20 mg，批号20191022），α7nAChR 激动剂PNU-282987（北京百奥莱博科技有限公司，纯度99.37%，规格10 mg，货号M06398）。兔抗大鼠α7nAChR、乙酰胆碱酯酶（Acetylcholinesterase,AChE）单抗购自美国Abcam 公司，辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔IgG 单抗（北京博生福生物技术有限责任公司，货号IG101），α7nAChR 和AChE 引物由上海生工生物工程股份有限公司设计合成。XR-XY1032 Y 型电迷宫（上海欣软信息科技有限公司），3-15 实验室通用型离心机（德国SIGMA 公司），MRX A2000 型酶标仪（韩国K LAB OPTIZEN 公司），ABI 7500 实时荧光定量聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR）仪（美国Applied Biosystems公司），DYY-6D 型电泳仪（北京六一仪器厂）。……