李鑫，陈娜，林文娟，袁媛

脉络膜黑色素瘤（choroidal melanoma，CM）多见于40～60 岁人群，属于成人最常见的原发性眼内恶性肿瘤。该病病因未明，可能与内分泌、环境、病毒感染、遗传因素有关[1-2]。CM 属于恶性肿瘤，发展迅速，具有较高的转移率，主要采取眼球摘除方法治疗但对于远处转移的CM 患者，尚无有效治疗方法[3-4]。因此，寻找一种疗效好、副作用小、安全性高的治疗药物迫在眉睫。灯盏细辛具有抑制氧化反应、降血脂、杀菌消毒、抗肿瘤等药理作用[5-6]。以往关于灯盏细辛对眼组织保护作用的研究大都集中在动物体内模型[7-8]，因此，本研究拟在细胞水平进一步研究灯盏细辛对CM 细胞凋亡的促进作用。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

人眼侵袭性CM 细胞系OCM-1（美国ATCC 公司，批号：DSM 4855），98%灯盏细辛注射液（武汉博士德生物工程有限公司，批号：20150112），二甲基亚砜、胎牛血清、达尔伯克改良伊格尔培养基培养液(dulbecco’s modification of eagle’s medium dulbecco，DMEM）、CCK-8 细胞增殖检测试剂盒（江苏凯基生物技术股份有限公司，批号：KGA317），4%多聚甲醛（北京百奥莱博科技有限公司，批号：BTN131248），0.1%胰酶（北京索莱宝生物公司，批号：P7340），Hoechst 33258 染色试剂盒（南京建成生物研究所，批号：G003-1-2），Annexin-V 和PI 试剂盒（北京索莱宝生物公司，批号：CA1020），双辛酸（bicinchoninic acid，BCA）蛋白测定试剂盒、聚氟乙烯（polyvinylidene fluoride，PVDF）膜（上海碧云天公司，批号：P0010S；FFP24），Bcl-2 相关X 蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）及B 淋巴细胞瘤-2 基因（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）抗体（上海碧云天公司，批号：AF0057；P7257），酶标仪（北京中西华大科技有限公司，型号：M399038），流式细胞仪（美国BD公司，型号：DLK0002563），电泳仪（北京恒奥德仪器仪表有限公司，型号：HAD-JY600C），荧光显微镜（上海无陌光学仪器有限公司，型号：WMF-3530LED）。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养 在……