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高效液相色谱法测定饲料中胆固醇

2021-12-29侯林丛刘丽芳刘丹丹兰尊海

河南畜牧兽医 2021年21期
关键词:方法

侯林丛,刘丽芳,陆 静,刘丹丹,兰尊海*

(1.河南海瑞正检测技术有限公司,河南 郑州 450001;2.河南工业大学生物工程学院)

胆固醇又称胆甾醇,一种环戊烷多氢菲的衍生物,胆固醇是动物体维持正常生理活动所必需的物质,在动物体内经过代谢还能转化为胆汁酸、7-脱氢胆固醇,且7-脱氢胆固醇经紫外线照射会转变成为维生素D3,适量的胆固醇对维持机体正常生理功能具有重要意义。但堆积过多的胆固醇也会影响动物的健康。从20世纪80年代开始,胆固醇逐渐成为国内外研究的热点[1]。

目前胆固醇的测定方法主要有直接试剂盒法和间接试剂盒法[2]、气相色谱法[3-6]、短波近红外光谱法[7]、气相色谱-质谱法[8-12]、高效液相色谱法[13-20]、比色法[21-23]、液相色谱-质谱法[24-27]等。其中比色法是传统方法,操作复杂,所需试剂较多,结果有偏差故而不能广泛应用,质谱法对仪器和人员的要求较高,在一定程度上增加了检测的成本。该研究通过与气相色谱法进行试验比对后,在大量试验基础上优化饲料中胆固醇的高效液相色谱法测定条件,以期为基层检测机构及饲料生产企业的检验人员提供参考。

1 材料与方法

1.1 仪器与主要试剂

e2695高效液相色谱仪,配紫外检测器;BSA224S分析天平;旋转蒸发器。

胆固醇标准品(纯度≥99%)、甲醇(色谱纯)、无水乙醚(分析纯)、抗坏血酸(分析纯)、无水乙醇(分析纯)、氢氧化钾(分析纯);蒸馏水、高纯水。

饲料原料、配合饲料、浓缩饲料等均为客户委托检测的样品。

1.2 试验方法

1.2.1 样品前处理

1.2.1.1 皂化

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