登革病毒IgG抗体的检测:基于登革病毒E蛋白的荧光素酶免疫吸附法
2021-12-16刘金月李晓霞王海鹰唐时幸万成松
南方医科大学学报 2021年11期
刘金月,李晓霞,王海鹰,唐时幸,万成松
南方医科大学公共卫生学院,广东 广州 510515
登革病毒(DENⅤ)引发的登革热(DF)是全球重大虫媒传染病,在热带、亚热带地区均有流行。随着气候变化和人口流动增多,登革热日益严重[1,2]。据统计,DENⅤ原发性感染大部分为隐性感染[3],可作为传染源导致更多感染发生[4]。目前,DENⅤ存在四种血清型(DENⅤ1-4),单一血清型的原发感染能产生该特定血清型持久的同型免疫,但对其他血清型只能产生短暂的免疫保护[5]。研究表明,DENⅤ二次异型感染更易引发重症,包括致死性登革出血热(DHF)和登革休克综合征(DSS)等[6,7],给疾病防控带来沉重的医疗负担[8]。另一方面,猩猩、猴类等动物对登革病毒易感,是丛林型登革热的主要传染源,可通过蚊媒感染人。因此,建立准确、便捷的DENⅤ检测技术,能提升DENⅤ现场或野外监测站点的检测能力,便于开展岛礁、边防、丛林等特殊哨点的DENⅤ早期筛查、流行病学调查。
DENⅤ实验室检验方法有病毒分离、RT-PCR、抗体检测等,病毒分离法操作繁多、费时;RT-PCR检测核酸,快速、准确、便捷,但不反映抗体水平;抗体检测是目前最常用的快速检测技术[10]。通过抗体检测,DENⅤ原发感染发病后8~10 d,可检测到IgG抗体[11],并在体内维持多年[12],二次感染时迅速增多[13],已作为区分原发感染和继发感染的指标。但辣根过氧化物酶联免疫法测量光密度(OD值),检测范围较窄;特殊动物检测所需的种属二抗难获取,应用范围受限;抗原制备、蛋白表达、纯化折叠复杂,制备周期较长。
本研究采用G蛋白捕……
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