陈亮 刘雪松 黄思琪 张蕾 冯万宇 李丹 兰世捷 苗艳 沈思思 黄宝银 史同瑞*

1.黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院 161005

2.东北农业大学动物医学学院 150030

大肠杆菌可以引起仔猪的腹泻，根据猪的日龄以及和致病性大肠杆菌的血清型不同，可以将仔猪腹泻疾病分为仔猪黄痢、仔猪白痢以及仔猪水肿病等。引起仔猪腹泻大肠杆菌的致病因子较多，包括了黏附素和肠毒素等。在仔猪腹泻大肠杆菌中常见的黏附素为K88、K99 以及987P 等。致病性大肠杆菌可以通过黏附素的黏附作用让大肠杆菌定居在小肠上皮上，大量繁殖并分泌肠毒素，从而影响动物机体的水分吸收排泄平衡，造成腹泻。

2020 年10 月黑龙江齐齐哈尔市周边某猪场发生仔猪腹泻症状，对该猪场病死仔猪进行剖检，将无菌得到的病料进行细菌的分离鉴定，测定其含有的毒力基因，并通过药敏试验指导临床用药。

1 材料

1.1 病料无菌采集腹泻仔猪病料，包括肝脏、脾脏以及小肠等。

1.2 试剂伊红美蓝琼脂培养基，北京索莱宝科技有限公司生产。麦康凯琼脂培养基，山东拓普生物工程有限公司生产。MH 培养基，青岛海博生物技术有限公司生产。50×TAE，北京拓奥达科技有限公司生产。革兰氏染色液，常德比克曼生物科技有限公司生产。药敏纸片，杭州滨和微生物试剂有限公司生产。Taq Master Mix，南京诺唯赞生物科技股份有限公司生产。DNA Marker，大连Takara 公司生产。

2 方法

2.1 病原菌分离培养将病料无菌接种到鉴别培养基中，观察菌落形态，显微镜下观察细菌形态。……