何 阳李其富黎昌炫陈瑞鹏

(海南医学院第一附属医院 神经内科,海口 570000)

糖尿病是一种慢性代谢紊乱性疾病,以2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)较为常见,随着近来人们饮食结构及生活方式的改变,发病率呈增加且年轻化趋势,其中糖尿病各种并发症是其致死、致残的重要原因,危害严重[1-2]。近来研究显示,糖尿病是脑梗死的独立危险因素,T2DM患者较非糖尿病患者发生脑缺血再灌注损伤的风险高2～6倍,且糖尿病合并脑梗死发病率逐年升高,严重影响患者预后及生存质量[3]。尽管近来研究糖尿病加重脑梗死的机制较多,但其具体机制尚未完全阐明[4]。成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)是一种新的代谢调节因子,在大脑新陈代谢、保护和认知方面发挥重要作用[5],β-klotho是一种膜蛋白,可增强FGF21与其受体FGFR1结合的亲和性,辅助其完成相应特异功能,在神经系统血管内皮功能、血糖及体重等调节中发挥重要作用[6-7]。因此本研究拟探究FGF21/βklotho/FGFR1通路在T2DM局灶性脑缺血模型大鼠脑损伤中的作用机制,以期为T2DM加重局灶性脑缺血性疾病的机制研究提供新的思路。

1 材料和方法

1.1 实验动物

健康雄性清洁级10周龄SD大鼠60只,体重280～310 g,购买及饲养均在北京维通利华实验动物技术有限公司上海分公司[SCXK(沪)2017-0011][SYXK(沪)2017-0014]。本研究经过本院动物伦理委员会批准通过(IACUC-L2018-0005)。实验遵循3R原则,给予人道主义关怀。

1.2 主要试剂与仪器

PrimeScriptTMRT reagent Kit(Perfect Real Time)(货号:RR037A)、TB Green® Premix Ex TaqTMII(Tli RNaseH Plus)(货号:RR820A)均购自TaKaRa公司;引物由上海吉玛生物科技有限公司合成;FGFR1抑制剂PD173074(货号:HY-10321)、FGFR1激动剂PF05231023(货号:HY-113697)购自MCE公司;原位末端标记……