董芳娟 魏增云 薄一览

(忻州师范学院，山西 忻州 034000)

植物病毒在全球范围内的危害越来越大，植物病毒能够导致农作物和经济作物发病，造成产量下降甚至绝收的情况出现，给农业带来极大的损失。近年来，发现的植物病毒种类越来越多，当前发现的植物病毒分为18个科，共76个属，总数量超过1000种。随着我国与国际贸易规模不断扩大，境外植物病毒通过口岸的输出风险不断扩大，因此加强植物病毒的检测效率和准确性就显得更为重要。为了防止植物病毒的危害，需要做好病毒预防和综合防治工作，而建立快速、高灵敏度、高通量的病毒检测体系是做好上述工作的前提。植物病毒的检测技术经历了多年发展，起初常用的检测技术包括生物学鉴定和电子显微镜技术，随后酶联免疫吸附反应成为植物病毒常用的手段。随着分子生物学的发展，在植物病毒检测领域，分子生物学方法已经获得了广泛的应用，包括核酸杂交技术、反转录PCR技术、荧光定量PCR技术和DNA微阵列技术等，本文对这几种技术及其在植物病毒检测领域的应用进行介绍。

1 核酸杂交技术

根据碱基互补配对原理，互补的核酸单链可以相互结合，核酸杂交技术就是利用了这一原理，通过对一段病毒特异的核酸序列进行标记，制成探针，将其和待测样品的核酸进行杂交，若发生杂交则表示病毒存在。这种方法可以应用于DNA、RNA病毒及类病毒的检测，该方法具有较高的灵敏度，同时还具有特异性强、通量高等方面的优点。……