胡玉海 王晨 谢宇端 余婷 汪浩

(1武汉市汉口医院检验科，湖北 武汉 430012；2中国中医科学院望京医院检验科；3武汉市精神卫生中心检验科)

非小细胞肺癌(NSCLC)是最常见的肺癌亚型，是全球癌症相关死亡的重要原因〔1〕。目前，包括手术、化疗、放疗等治疗方式存在不足之处，亟待开发新的NSCLC治疗策略〔2〕。研究发现中药辅助治疗能改善NSCLC患者生活质量，降低不良反应，对提高其远期生存具有一定优势〔3，4〕。白山毛桃根是民间传统中药，其在胃癌、鼻咽癌、乳腺癌已被证实具有抗肿瘤活性〔5，6〕。白山毛桃根提取物对黑色素瘤细胞异常迁移和侵袭、白血病细胞增殖具有抑制作用〔7〕。本实验探索了白山毛桃根提取物对NSCLC细胞生物学行为的影响，并分析其抗肿瘤作用与miR-182-5p/原钙黏蛋白细胞黏附分子(PCDH10)轴的关系。

1 资料与方法

1.1材料与试剂 人NSCLC细胞株H1299购自中国科学院上海细胞库。RT-qPCR试剂盒(日本Takara公司)；RPMI1640培养基(美国Gibco公司)；四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)(美国R&D Systems)；蛋白提取试剂盒(碧云天生物公司)；双荧光素酶报告基因检测试剂盒(艾美捷科技有限公司)。

1.2方法

1.2.1白山毛桃根提取物溶液的配制 参考王水英〔7〕实验方法制备白山毛桃根提取物，准确称量50 g白山毛桃根，浸泡1 h后加热煮沸1 h，然后过滤收集残渣，再进行二次煮沸、过滤。合并两次滤液，过滤、除菌保存。

1.2.2细胞处理与分组 H1299细胞常规培养于RPMI1640培养基中，分别用10、20、40、60 μg/ml的白山毛桃根提取物处理H1299细胞，作为不同浓度白山毛桃根提取物组，不作任何处理的作为对照组；将miR-182-5p抑制剂及其阴性对照转染至H1299中，记为anti-miR-182-5p组、anti-miR-NC组；……