矫淑芹 林爱庆 李雪婷

(烟台市牟平区中医医院 1脑病科，山东 烟台 264100；2心血管病科)

缺血性脑卒中将会导致局部脑组织及其功能的损害，其损害程度与缺血的时间长短有关〔1〕。因此，及时恢复脑组织的供血对缺血性脑卒中病人的恢复至关重要。但是再灌注可诱发神经元细胞的凋亡，引起神经元损伤。因此，预防再灌注引起的神经元损伤成为缺血性脑卒中研究领域的热点之一。目前，再灌注引起的神经元损伤的机制尚未得到充分阐明，需要进一步寻找关键的调控因子，为临床的治疗和药物研发提供分子靶点。

微小RNA(miRNAs)是一种长度为22个核苷酸左右的单链内源性的RNA分子〔2，3〕。研究发现，miRNAs在调控脑血管疾病的发生、发展及恢复中发挥重要的调控作用，是一种潜在的缺血性脑卒中治疗靶点〔4～6〕。有研究发现，急性脑缺血小鼠恢复供血后3 h，血液中miR-448的表达量就达到峰值，说明miR-448可能在脑缺血再灌注过程中发挥重要的调控作用〔7〕。另外，降低miR-448的表达可降低缺血再灌注引起的脊髓神经元的凋亡〔8〕。尽管如此，尚无报道探讨miR-448在脑缺血再灌注引起的神经元凋亡中的作用。本文拟通过构建氧葡萄糖剥夺/再恢复(OGDR)神经母细胞瘤细胞模型，分析miR-448在OGDR诱导的细胞凋亡的作用及潜在机制，探讨miR-448在脑缺血再灌注引起的神经元细胞损伤中的作用及机制。

1 材料和方法

1.1实验材料及主要试剂 神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。Trizol和SYBR GREEN qPCR Super Mix购自Invitrogen。CCK8试剂盒和膜联蛋白(Annexin)V-FITC/碘化丙啶(PI)细胞凋亡检测试剂盒购自上海碧云天。……