miR-424介导的VEGFA低表达阻碍宫颈鳞状细胞癌侵袭和转移
2021-12-08万红英王芬张戈俞茜鲍梦欣
万红英 王芬 张戈 俞茜 鲍梦欣
(1上饶市人民医院妇产科,江西 上饶 334000;2南昌大学第一附属医院妇产科)
宫颈癌是全世界女性中仅次于乳腺癌、结肠癌和肺癌的第四大癌症〔1〕。宫颈癌主要是由高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)基因型感染引起的〔2〕。随着宫颈癌筛查和预防的发展,如HPV联合检测和HPV疫苗接种,宫颈发育异常和癌症的早期诊断程序可降低宫颈癌的发病率和死亡率〔3〕。目前,对于宫颈癌患者的标准治疗指南是放疗联合顺铂类化疗,不幸的是,这些患者在最初的5年中有较高的复发率和较差的生存率〔4〕。大量的miR已被确定在各种肿瘤细胞生物过程中有重要作用,如细胞增殖、周期调控、细胞分化及细胞凋亡〔5〕。异常的miR表达参与宫颈癌的发病机制和进展,因此MicR有作为宫颈癌生物标志物的潜力〔6〕。已有研究表明miR-424对宫颈癌的诊断和预后有提示作用,抑制宫颈癌、子宫内膜癌细胞的生长、转移和浸润〔7〕。但miR-424对宫颈癌的具体作用机制尚未见报道,本研究旨在探讨miR-424介导的血管内皮生长因子(VEGF)A低表达对宫颈鳞状细胞癌的侵袭和转移的影响。
1 材料和方法
1.1试验动物 6只雄性SPF级别裸鼠,4~6周龄,体重(16±2)g,购自江西中医药大学实验动物中心,许可证号:SCXK(赣)2018-0003。DMEM培养基(12100-046)、胎牛血清(10099-141)、胰蛋白酶(15050-057 )和青-链霉素(15140-122)均购自美国赛默飞世尔科技公司;CCK-8试剂盒(C0037)、LipoRNAiTM转染试剂(C0535)、二喹啉甲酸(BCA)蛋白浓度测定试剂盒(P0012S)购自上海碧云天生物技术研究所;Transwell(3374)购自美国Corning公司;荧光素酶(L7840)检测试剂盒购自Solarbio公司;anti VEGFA(ab46154)、Ki67(ab15580)、PCNA(ab18197)、E-cadherin(ab15148)、N-cadherin(ab18203)、Vimentin(ab137321)购自英国Abcam公司。……
