田贵金 刘军红 陈晶 张小龙 杨志森

(1邯郸市第一医院综合外科，河北 邯郸 056002；2武安市第一人民医院产科)

肝癌是常见的恶性肿瘤，发病率和死亡率高，手术和放化疗是其主要治疗手段，肝癌的复发和转移严重影响患者治疗效果、患者预后和生存期，深入研究肝癌的分子机制，寻找分子靶标，对于肝癌的靶向治疗具有重要的意义〔1,2〕。研究表明长链非编码RNA(LncRNA)参与多种肿瘤的发生、发展及预后，部分LncRNA也参与肝癌的发生发展过程，可作为诊断的生物标志物或治疗的靶点〔3〕。LINC01446是一种新的LncRNA，研究发现敲低LINC01446可抑制胶质母细胞瘤细胞增殖，阻止细胞周期进展并减少体外侵袭〔4〕。还有研究报道LINC01446与胃癌的总体存活率相关〔5〕。此外研究发现miRNA也参与肿瘤的发展发展，麦冬腺苷-B通过Linc00668/miR-432-5p抑制人肺腺癌细胞的转移和上皮-间质转化〔6〕。LncRNA癌症易感性候基因(CASC)15通过竞争性结合miR-432-5p上调Toll-样受体(TLR)4而促进心脏肥大〔7〕。然而，LINC01446和miR-432-5p对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及LINC01446与miR-432-5p之间的关系尚未清楚。本实验旨在研究LINC01446和miR-432-5p对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及LINC01446是否通过调控miR-432-5p影响肝癌细胞的进展，为肝癌的分子靶向治疗提供参考和新靶点。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1肝癌组织和肝癌细胞来源 肝癌组织和癌旁组织均取自邯郸市第一医院，患者均知情。正常肝细胞THLE-2和肝癌细胞MHCC97L、Hep3B、Huh7、HCCLM3购自美国菌种保藏中心(ATCC)。

1.1.2主要试剂 RPMI1640培养基购自美国Sigma公司；荧光定量试剂盒购自美国Invitrogen公司；RIPA蛋白裂解液、四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法试剂盒、凋亡检测试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司；……