景增秀 康桂兰 魏秀邦 刘彦武

(1西宁市第二人民医院心血管内科，青海 西宁 810003；2吴忠市人民医院心血管内科)

血管内皮细胞损伤导致的血栓形成是高血压、冠心病等多种心血管疾病发生的病理基础〔1,2〕。研究显示，氧化应激可通过促进细胞产生过量的炎症因子，降解细胞外基质，促使细胞凋亡等方式损伤血管内皮细胞〔3,4〕。氧化应激造成的血管内皮细胞损伤主要是由于活性氧介导的，过氧化氢(H2O2)是活性氧类物质之一，常用于体外氧化应激模型的建立〔5〕。微小RNA(miRNA)是一类小分子单链非编码RNA，长度为18～25个核苷酸，可在转录后抑制或降解mRNA的翻译调控细胞增殖、凋亡、分化等生物学过程，参与疾病的发生和发展〔6〕。研究表明，miR-30b-3p在肝脏缺血再灌注损伤小鼠的肝组织中低表达，过表达miR-30b-3p可减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤〔7〕。miR-30b的过表达对糖氧剥夺诱导的视网膜神经节细胞发挥保护损伤〔8〕。目前，miR-30b-3p是否影响H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞氧化应激和凋亡还未知。本研究主要探讨了miR-30b-3p对H2O2诱导的人脐静脉血管内皮细胞EVC-304氧化应激和凋亡的影响及其可能的调控机制。

1 材料与方法

1.1材料和试剂 EVC-304细胞，武汉大学细胞典藏中心；胎牛血清和RPMI1640培养基，美国Hyclone公司；血清CXC趋化因子配体(CXCL)16抗体，美国Novus公司；GAPDH、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和酶切含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3抗体，美国Santa Cruz公司；miR-30b-3p模拟物(mimics)阴性对照、CXCL16的siRNA及阴性对照，上海Gnen Pharma公司；Lipofectamine2000转染试剂，美国Invitrogen公司；Annexin V-FITC/PI凋亡试剂盒，南京森贝伽生物公司；丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物还原酶(GSH-Px)检测试剂盒，南京建成生物工程研究所；……