卢伟 卫玲燕 任延鑫 李鑫宇 宝东艳

(锦州医科大学 1第一临床学院骨科，辽宁 锦州 121001；2第一临床学院2015级；3基础医学院生理学教研室)

听力障碍是世界主要健康问题之一。全世界每500名新生儿中就有1例患有听力障碍，65岁以上近1/3患有听力障碍〔1，2〕。由于耳蜗神经元和耳蜗毛细胞不能再生，耳毒性药物、噪声及年龄都可造成耳聋。钙蛋白酶(Calpain)是一类广泛分布于哺乳动物胞质中的钙依赖性半胱氨酸蛋白酶。Calpain1和Calpain2是此家族中研究最广泛的成员，都是由28和80 kD亚单位组成的异二聚体。近年来发现，在庆大霉素、丁胺卡那霉素及新霉素等氨基糖甙类诱导的内耳细胞死亡中有钙蛋白酶的参与〔3～5〕。前期研究发现，葛根素能拮抗卡那霉素(KM)的耳毒性，本实验通过制备KM耳中毒小鼠模型，结合听脑干反应观察葛根素对KM耳中毒的拮抗作用，同时探讨葛根素发挥作用是否与 Calpain1有关。

1 材料与方法

1.1实验动物 BALB/c雄性小鼠40只，体重25～30 g。由大连医科大学实验动物中心提供，许可证号：SYXK( 辽) 2004-0029。

1.2主要试剂和仪器 葛根素注射液购自康普药业股份有限公司，批号H20043980。硫酸KM(粉剂)生理盐水溶解使用，购自美国 Ameresco公司，每日新鲜配制。兔抗Calpain1单克隆抗体购自武汉博士德生物工程有限公司，β-actin 购自武汉博士德生物工程有限公司。Smart EP&OAE听觉诱发电位记录系统购自美国智听公司。

1.3分组及小鼠耳毒模型制备 BALB/c小鼠随机分成4组，每组10只。正常对照组：腹腔注射等量生理盐水；KM组：KM皮下注射 750 mg/kg，2次/d；KM+葛根素组：皮下注射KM 750 mg/kg，2次/d，同时腹腔注射葛根素200 mg/kg，1次/d；……