褚璐璐 袁 博 邢 伟

临床上上皮性卵巢肿瘤的发病风险较高，在具有相关家族史或者合并有癌基因携带的群体中，上皮性卵巢肿瘤的发生风险可进一步上升[1-2]。临床上通过对于上皮性卵巢肿瘤的诊断或者鉴别诊断，能够在卵巢肿瘤的手术治疗或者治疗方案的制定等方面发挥作用。人蛋白DJ-1蛋白是近年来新发现的肿瘤基因，其对于卵巢上皮细胞的异常增殖具有一定的调控作用，还可以显著促进癌细胞核DNA的异常分裂过程[3]；哥本哈根指数(Copenhagen index，CPH-1)能够通过结合CA125及HE4，对癌细胞的异常分化增殖过程反应，进而具有评估卵巢恶性肿瘤的发生风险作用。目前为止，相关背景研究已经探讨了CPH-1在卵巢恶性肿瘤鉴别诊断过程中的价值，认为其能够显著提高卵巢肿瘤的鉴别效能，但对于CPH-1或者DJ-1蛋白的表达与卵巢癌临床病理特征的关系分析不足，本文对此进行研究，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 对象

本文选取我院2016年1月至2019年7月经病理学检查确诊的上皮性卵巢癌患者66例作为恶性组、80例卵巢良性肿瘤患者作为良性组，所有患者符合中华医学会制定关于上皮性卵巢癌患者的诊断参考标准[4]。恶性组的年龄范围(37～67)岁，平均年龄(55.2±8.6)岁；根据国际妇产联盟(FIGO)分期包括：Ⅰ期13例、Ⅱ期25例、Ⅲ期12例、Ⅳ期6例；组织学分化：高分化16例、中分化31例、低分化19例；病理学类型：浆液性癌患者53例、非浆液性癌患者13例。良性组，年龄范围(35～65)岁，平均(54.2±10.0)岁；病理学类型：卵巢囊肿患者22例、卵巢浆液性腺瘤患者34例、卵巢黏液性腺瘤患者24例。恶性组与良性组在上述一般资料上比较，无统计学上的差异(P>0.05)，可进行比较。

1.2 方法

1.2.1 血清DJ-1蛋白的检测方法 样本采集与提取：用采血管取患者的清晨肘部静脉血，摇匀，并离心，其上清液为样本。血清DJ-1蛋白的检测：经过孵育、洗涤等反复处理后，加入TMB显色底液并避光36 ℃孵育15 min，最后加入100 μl的终止液并在3 min内检测OD450值。BioTek酶标仪(由美国伯腾仪器有限公司生产)。

1.2.2 CPH-I评测方法 取患者外周静脉血3～5 ml，放置室温下5～10 min，在自然分层后，抽取上层清亮液体进行检测。使用化学发光免疫分析仪(由贝克曼库尔特UniCel DxI 800生产)对HE4、CA125检测，EasyBlot ECL化学发光显色试剂盒(由赛默飞公司生产)。CPH-I=-14.0647+1.0649×LOG2(HE4)+0.6050×LOG2(CA125)+0.2672×年龄/10。

1.3 统计方法

2 结果

2.1 2组患者的DJ-1蛋白、CPH-1对比

经2组独立样本t检验分析，恶性组患者的DJ-1蛋白、CPH-1均高于良性组，具有统计学差异(P<0.05)，见表1。

表1 2组患者的DJ-1蛋白、CPH-1对比

2.2 卵巢上皮性恶性肿瘤的病理学特征与DJ-1蛋白、CPH-1的关系

在不同FIGO分期、不同病理学类型、不同分化程度的卵巢上皮性恶性肿瘤患者血清中DJ-1蛋白水平均无统计学差异(P>0.05)；见表2。

表2 卵巢上皮性恶性肿瘤的病理学特征与DJ-1蛋白的关系

不同FIGO分期、不同分化程度的上皮性卵巢恶性肿瘤患者的CPH-1指数具有统计学差异(P<0.05)，见表3。

表3 卵巢上皮性恶性肿瘤的病理学特征与CPH-1的关系

2.3 血清DJ-1蛋白、CPH-1鉴别诊断上皮性卵巢肿瘤良恶性的价值

血清中DJ-1蛋白鉴别诊断上皮性卵巢肿瘤良恶性的灵敏度为66.03%、特异度为78.14%、ROC曲线下面积AUC值为0.745；CPH-1鉴别诊断上皮性卵巢肿瘤良恶性的灵敏度为94.28%、特异度为84.57%、ROC曲线下面积AUC值为0.909；见表4、图1。

表4 血清DJ-1蛋白、CPH-1鉴别诊断上皮性卵巢肿瘤良恶性的价值

图1 血清DJ-1蛋白、CPH-1鉴别诊断上皮性卵巢肿瘤良恶性的ROC曲线

3 讨论

临床上卵巢恶性肿瘤的发病率或者年发病人数均维持在较高的水平，在卵巢生发上皮细胞异常病变的过程中，不同来源恶性肿瘤细胞的发生风险越高，其远期临床结局的恶化越为显著[5]。上皮性卵巢肿瘤的早期诊断水平较低，鉴于卵巢属于中空性器官，其早期发生恶性肿瘤病变时多数患者可无明显的临床症状。对于上皮性卵巢肿瘤的早期诊断或者鉴别诊断，能够在提高卵巢癌根治性手术切除率、降低卵巢癌的远期复发率、改善卵巢肿瘤患者的生存预后方面发挥作用。影像学检查虽然能够在上皮性卵巢肿瘤的诊断过程中发挥作用，但妇科超声检查对于部分早期卵巢肿瘤的漏诊率较高，其早期鉴别的阳性预测值较低。血清中糖链蛋白125(CA125)或者附睾蛋白(HE4)虽然能够在上皮性卵巢肿瘤的鉴别过程中发挥作用，但其单独检测的鉴别价值较低，单独检测对于卵巢恶性肿瘤的鉴别灵敏度不足40%[6-7]。

DJ-1是新发现的肿瘤标志物，其作为癌基因相关家族成员，可以对卵巢上皮细胞上游转录的激活程度产生影响，加剧癌细胞的异常分化过程。DJ-1蛋白作为肿瘤信号通路调控蛋白，其对于癌细胞内效应因子或者第二信使的激活，能够加剧癌细胞核基因错配的风险[8]；CPH-1是结合CA125及HE4的风险预测模型，其能够在不同年龄段的卵巢恶性肿瘤的鉴别过程中发挥作用[9]。多数研究者单独探讨了CPH-1在卵巢肿瘤诊断过程中的作用，认为其能够提高卵巢恶性肿瘤的早期筛查价值[10-13]，但对于DJ-1蛋白的分析较少。

本文通过对于卵巢肿瘤患者中DJ-1蛋白、CPH-1的表达分析可见，在卵巢恶性组患者中，DJ-1蛋白的表达浓度明显上升，而CPH-1评分也明显的上升，高于卵巢良性肿瘤组，统计学差异显著，这一结果说明DJ-1蛋白、CPH-1的高表达或者高评分都可以对卵巢恶性肿瘤的病情进展过程产生影响。这主要由于DJ-1蛋白的表达上升，能够加剧卵巢卵泡上皮细胞癌基因的激活，提高下游MAPK信号通路的激活，最终促进癌细胞的异常发生；CPH-1评分的上升，能够反应体内CA125或者HE4蛋白的波动情况，CPH-1评分越高，患者体内肿瘤指标的波动越为明显，恶性肿瘤的发生风险越高。其他相关研究也表明，在卵巢恶性肿瘤患者中，DJ-1蛋白的水平平均可上升40%，而且在多发转移或者合并有明显腹水的患者中，其上升更为显著[14-15]。在探讨DJ-1蛋白、CPH-1与卵巢恶性肿瘤患者临床病理特征的关系中，得知DJ-1蛋白的表达与卵巢恶性肿瘤临床病理特征并无密切的关系，提示DJ-1蛋白的异常表达并不会影响到癌细胞的生物学行为，不会影响到癌细胞的特征。在临床分期较晚或者卵巢癌细胞分化程度较差的患者中，CPH-1评分明显上升，表明CPH-1评分的改变能够影响到卵巢癌细胞的浸润或者癌细胞分化成熟。这主要由于CPH-1能够反应CA125或者HE4的表达，而CA125或者HE4的表达又直接与癌细胞的浸润和分化过程有关。诊断学方面的分析可见，DJ-1蛋白、CPH-1在单独诊断卵巢恶性肿瘤的过程中均具有一定的价值，但CPH-1诊断的灵敏度及特异度相对较高，临床上可以通过CPH-1预测风险模型，进而评估卵巢恶性肿瘤的发生风险。

综上所述，在卵巢恶性肿瘤患者中，DJ-1蛋白、CPH-1明显上升，在鉴别诊断上皮性卵巢肿瘤良恶性中的应用价值上，CPH-1优于血清DJ-1蛋白，能够反应出卵巢恶性肿瘤的恶性程度。