谭永安，姜义平，赵静，肖留斌

绿盲蝽G蛋白偶联受体激酶2基因（）的表达分析及在绿盲蝽生长发育中的功能

谭永安，姜义平，赵静，肖留斌

江苏省农业科学院植物保护研究所，南京 210014

【目的】克隆绿盲蝽（）G蛋白偶联受体激酶2基因（）cDNA序列，明确其时空表达谱，阐明外源蜕皮激素（20E）对表达的影响，分析在绿盲蝽生长发育中的作用，为进一步研究其在蜕皮激素信号转导通路中的功能打下基础。【方法】RACE法克隆获得全长，实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析不同日龄绿盲蝽及雌成虫不同组织中的表达谱，分析外源20E诱导及RNAi处理后，mRNA表达的应答反应及对绿盲蝽生长发育主要参数（发育历期、若虫体重及成虫羽化率）的影响。【结果】cDNA序列全长2 715 bp，开放阅读框2 106 bp，编码701个氨基酸，ExPASy预测其蛋白分子量为80.2 kD，理论等电点为6.56；蛋白结构分析显示AlGRK2包含4个结构域，即G蛋白信号调节区（RGS，54—175 aa）、丝氨酸/苏氨酸激酶结构域（S-TKc，191—454 aa）、丝氨酸/苏氨酸型蛋白激酶的伸展部分（S-TK-X，455—534 aa）和PH结构域（PH，558—655 aa），其中PH结构域是GRK2蛋白的典型结构域；系统发育分析结果表明，绿盲蝽GRK2与茶翅蝽GRK2亲缘关系最近；在绿盲蝽1—16日龄虫体内均有表达，mRNA表达量呈现出波动式下降的模式，在绿盲蝽初始龄期的表达量较高，而在末龄期的表达量显著下降；在绿盲蝽雌成虫卵巢和脂肪体中高表达，在胸与足中的表达量较低；外源20E处理后，在绿盲蝽1日龄和3日龄表达量显著下调，在雌成虫各组织中均表达上调，在卵巢及脂肪体中上调幅度最大，相反的是，20E信号通路中PLC抑制剂U73122处理的表达量下调；……