梁 靓，唐锦玲

（江苏省人民医院病理科，江苏 南京 210000）

甲状腺癌是指起源于甲状腺滤泡上皮的恶性肿瘤。早期甲状腺癌患者多无明显症状，中晚期甲状腺癌患者随着肿瘤体积的增大会逐渐出现呼吸困难、吞咽困难、声音嘶哑、心动过速等症状[1-2]。近年来的大量研究显示，恶性肿瘤的生长、转移不仅与肿瘤细胞的增殖、分化有关，还与肿瘤细胞凋亡规律失常有关[3-5]。抗凋亡基因-1（BAG-1）是一个新近发现的抗凋亡基因。有报道称，BAG-1 蛋白可通过多种途径参与肿瘤细胞的凋亡抑制，其表达水平与恶性肿瘤的发生、发展具有一定的相关性。国内的研究显示，BAG-1 蛋白在消化道肿瘤、淋巴造血系肿瘤等恶性肿瘤患者体内的表达水平会明显升高[6-7]。本文主要是研究甲状腺癌组织中BAG-1 蛋白的表达水平及其临床病理意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

将2018 年1 月至2020 年1 月期间我院病理科收集的69 份甲状腺癌组织病理标本、34 份癌旁甲状腺组织标本、35 份甲状腺腺瘤组织标本和30 份正常甲状腺组织标本作为研究对象。将其中69 份甲状腺癌组织病理标本作为研究组，将其中34 份癌旁甲状腺组织标本作为对照A 组，将其中35 份甲状腺腺瘤组织标本作为对照B 组，将其中30 份正常甲状腺组织标本作为对照C 组。研究组69 份甲状腺组织标本取自69 例患者〔年龄为45 ～63 岁，平均年龄为（52.78±3.78）岁〕；其中，取自男性患者和女性患者的甲状腺组织标本分别有31 份和38 份；病理分期为Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期的甲状腺组织标本分别有27 份、21 份、16份和5 份；组织学分型为分化型癌和未分化型癌的甲状腺组织标本分别有53 份和16 份；发生淋巴结转移和未发生淋巴结转移的甲状腺组织标本分别有18 份和51 份。对照A 组34 份甲状腺组织标本取自34 例患者〔年龄为45 ～63岁，平均年龄为（52.54±4.09）岁〕；其中，取自男性患者和女性患者的甲状腺组织标本各有17 份。对照B 组35 份甲状腺组织标本取自35 例患者〔年龄为46 ～64 岁，平均年龄为（53.78±4.11）岁〕；其中，取自男性患者和女性患者的甲状腺组织标本分别有18 份和17 份。对照C 组30 份甲状腺组织标本取自30 例患者，其年龄为44 ～62 岁，平均年龄为（52.65±3.98）岁；其中，取自男性患者和女性患者的甲状腺组织标本分别有16 份和14 份。四组甲状腺组织标本取自患者的年龄及性别相比，差异无统计学意义（P ＞0.05）。

1.2 方法

采用免疫组化法检测四组甲状腺组织标本中BAG-1 蛋白的表达水平，比较四组甲状腺组织标本中BAG-1 蛋白的阳性表达率，并采用Pearson 相关性分析法分析BAG-1基因的表达水平与甲状腺癌临床病理参数的相关性。对甲状腺组织标本中BAG-1 蛋白的表达水平进行检测的方法是：所用试剂为DAB 显色试剂盒和羊抗兔SP 免疫组化染色试剂盒，用BAG-1 兔抗人多克隆抗体作为一抗，用已知BAG-1 呈阳性的扁桃体作为阳性对照。用10% 的福尔马林溶液对甲状腺组织标本进行固定，用石蜡对标本进行包埋，然后将其连续切成5 μm 的薄片。在60℃的温度下对切面进行2 h 的炙烤，储存备用。将切片脱蜡至水，在37℃下用3% 的过氧化氢（H202）处理15 min，用微波修复抗原，加入山羊血清封闭。在切片中加入一抗，置于4℃的环境中过夜。在切片中加入用生物素标记的二抗，用二氨基联苯胺（DAB）进行显色，用苏木精复染后封片。以磷酸盐缓冲液（PHS）代替一抗作为阴性空白对照。结果判断：用400 倍的显微镜随机观察每张病理切片的10 个视野，每个视野计数200 个细胞，胞核内或胞浆出现黄色颗粒且颜色明显比背景染色深为阳性细胞，取10 个视野中阳性细胞的平均值作为该切片的阳性细胞数，计算阳性细胞的比份，阳性细胞的比份超过5%表示BAG-1 蛋白呈阳性表达。

1.3 统计学方法

用SPSS 13.0 软件处理本研究中的数据，计数资料用%表示，用χ² 检验，计量资料用均数±标准差（± s）表示，用t 检验，P ＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 比较四组甲状腺组织标本中BAG-1 蛋白的阳性表达率

研究组甲状腺组织标本中BAG-1 蛋白的阳性表达率高于对照A 组、对照B 组与对照C 组甲状腺组织标本，差异有统计学意义（P ＜0.05）。详见表1。

2.2 甲状腺癌组织中BAG-1 基因的表达水平与甲状腺癌临床病理参数的相关性

在这69 份甲状腺癌组织标本中，未分化型甲状腺癌组织标本中BAG-1 的阳性表达率高于分化型甲状腺癌组织标本，差异有统计学意义（P ＜0.05）；有淋巴结转移的甲状腺癌组织标本中BAG-1 的阳性表达率高于无淋巴结转移的甲状腺癌组织标本，差异有统计学意义（P ＜0.05）；病理分期为Ⅲ期、Ⅳ期的甲状腺癌组织标本中BAG-1 的阳性表达率高于病理分期为Ⅰ期、Ⅱ期的甲状腺癌组织标本，差异有统计学意义（P ＜0.05）。详见表2。通过进行Pearson相关性分析可知，甲状腺癌组织中BAG-1 蛋白的表达水平与甲状腺癌的组织学分型、淋巴结转移与病理分期呈显著正相关（P ＜0.05）。

3 讨论

甲状腺癌在临床上较为常见。此病患者约占恶性肿瘤患者总数的1%。近年来我国甲状腺癌的发病率以每年递增20% 左右的速度持续增长[8]。有研究发现，甲状腺癌的发生、发展不仅取决于肿瘤细胞的增殖，还与肿瘤细胞的凋亡有关[9]。BAG-1 是临床上在对B 淋巴细胞瘤-2 基因（Bcl-2）结合的各类蛋白进行研究时发现的另一种凋亡抑制基因。Emmanouil 等[9]研究指出，人表皮生长因子受体2（HER2）呈阳性的乳腺癌患者体内BAG-1 蛋白的表达水平显著升高。这说明，BAG-1 蛋白的异常表达与肿瘤的发生、发展密切相关。BAG-1 蛋白是一个与细胞凋亡相关的多功能蛋白，有多种亚型，可通过与大量的细胞靶点相互作用来实现抗细胞凋亡的作用[10]。BAG-1 蛋白在与Bcl-2 结合后，可共同起到抑制细胞凋亡的作用。BAG-1 蛋白在与多种生长因子受体结合后，可促进生长因子的表达，提高细胞的增殖能力。Kizilboga 等[11]研究指出，若BAG-1 蛋白过度表达，会抑制肿瘤细胞的凋亡，促进肿瘤的发生与发展。本研究的结果显示，研究组甲状腺组织标本中BAG-1蛋白的阳性表达率高于其他三组甲状腺组织标本。这表明，BAG-1 蛋白在甲状腺癌组织中存在高表达的现象，BAG-1蛋白与甲状腺癌的发生、发展关系密切。BAG-1 蛋白表达水平的升高可增强与细胞靶点的相互作用，抑制癌细胞凋亡，导致癌细胞增殖/ 凋亡的平衡遭到破坏，使癌细胞异常存活，进而累积形成优势克隆，促进甲状腺癌的发展。本研究的结果显示，恶性程度高的未分化型甲状腺癌组织标本中BAG-1 的阳性表达率高于恶性程度低的分化型甲状腺癌组织标本，有淋巴结转移的甲状腺癌组织标本中BAG-1的阳性表达率高于无淋巴结转移的甲状腺癌组织标本，病理分期为Ⅲ期、Ⅳ期的甲状腺癌组织标本中BAG-1 的阳性表达率高于病理分期为Ⅰ期、Ⅱ期的甲状腺癌组织标本。这说明，甲状腺癌组织中BAG-1 蛋白的表达水平与甲状腺癌的临床病理参数呈正相关

综上所述，甲状腺癌组织中BAG-1 蛋白的表达水平较高，且其表达水平与甲状腺癌的临床病理参数呈显著正相关。甲状腺癌组织中BAG-1 蛋白的表达水平可作为反映甲状腺癌恶性程度和预后的重要参数。