Geno-type MTBDRplus分子线性探针杂交技术在结核病诊断与耐药性检测中的应用价值
2021-11-30李昌锦樊金燕
李 津,李昌锦,杨 洁,黄 婷,樊金燕
(联勤保障部队第900 医院a.结核科;b 检验科,福州350003)
结核菌耐药是结核病治疗过程中面临的主要问题,其疗程长、药物副反应多且严重、患者预后差,已受到越来越多的关注。据统计我国每年新发结核病例中,5.7%为多重耐药结核患者,其中又有8%为泛耐药结核分枝杆菌感染[1]。因而结核菌耐药性检测极为重要。目前临床上多采用BD 960 液体培养法进行结核分枝杆菌的鉴定及耐药性的检测,该方法敏感度低、耗时较长,往往导致诊断及针对性治疗的延误。随着结核菌耐药机制的不断进展,Geno-type MTBDRplus 分子线性探针杂交技术逐步得到重视。这种方法应用生物素标记的引物进行靶序列的扩增,并与固定的寡核苷酸探针杂交,最后通过酶联免疫法显示结果[2]。该技术不仅可对结核分枝杆菌复合群保守序列进行鉴定,还可根据相关基因突变对异烟肼和利福平的耐药表型进行检测。本研究应用线性探针法对结核菌样本进行检测,并与BD 960 液体培养法的检测结果及其药敏结果进行比较,对两种方法的检测效果进行评价,现报告如下。
1 材料与方法
1.1 研究对象 收集2016年1月~2019年12月在本院门诊及住院的临床确诊结核病患者的送检标本413 例,其中男性315 例(76.27%),女性98 例(23.73%)。年龄8~89 岁。
1.2 仪器与试剂 BACTEC MGIT 960 及相关试剂(美国BD 公司);GT-Blot 48 及相关试剂(德国Hain Lifescience 公司) ;结核分枝杆菌抗原试剂盒(杭州创新生物公司);抗酸染色液(珠海贝索公司)。
1.3 检测方法
1.3.1 BD 960 液体培养法检测结核分枝杆菌及异烟肼、利福平耐药性 :严格按仪器使用说明书操作,培养阳性标本经抗酸染色镜检并用结核分枝杆菌抗原检测试剂盒鉴定为结核分枝杆菌。……
