刘金霞，王钰池，郭卓，赵江月，孔珺，秦宇

（中国医科大学附属第四医院眼科，中国医科大学眼科医院，辽宁省晶状体学重点实验室，沈阳 110005）

年龄相关性黄斑变性（age-related macular degeneration，AMD）是老年人群不可逆转性盲的主要原因之一［1］。AMD分为干性和湿性2种类型，其中，干性AMD占比较多，目前尚无有效治疗手段［2-3］。干性AMD的病理改变以光感受器细胞变性为主［4］。视网膜氧化损伤已被确定为干性AMD的主要致病因素之一，光感受器细胞受到各种来源的氧化应激刺激，导致视网膜退行性变，严重影响视力［5］。

核因子E2相关因子2（nuclear factor-erythroid 2-related factor 2，Nrf2）是机体发挥抗氧化应激反应的重要转录因子。基础状态下，Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Kelch-like ECH-associated protein-1，Keap1）与Nrf2在细胞质中结合，引起Nrf2降解；氧化应激时，Nrf2与Keap1解离，移位入核，与下游基因血红素单加氧酶（heme oxygenase-1，HO-1）结合，发挥抗氧化作用［6-7］。因此，通过激活Nrf2/Keap1信号通路，可增加细胞抗氧化反应能力，减轻细胞氧化损伤［8］。微RNA（microRNA，miRNA）可通过内源性RNA干扰机制抑制多种靶基因的表达，调节各种细胞功能［9］。已有研究［10］证明，多种miRNAs可通过调控Nrf2影响AMD发 病，包 括miR-144［11］、miR-141［12］、miR-626［13］等。但光感受器细胞中miRNAs对Nrf2的调控机制尚未完全明确。本研究通过细胞实验，研究在干性AMD中miR-125b通过Nrf2/Keap1信号通路对光感受器细胞氧化应激反应的调控作用。

1 材料与方法

1.1 材料

小鼠视锥细胞系661W细胞由美国休斯顿大学Muayyad R.AL-UBAIDI教授赠予。DMEM培养液、青链霉素混合液、胰蛋白酶、PBS（中国江苏凯基生物公司），3%过氧化氢（H2O2）溶液、DMSO（美国SIGMA公司），胎牛血清（澳大利亚AusGeneX公司），RNAiso Plus、LipofectamineTMRNAiMAX、OPTI-MEM（美国Invitrogen公司），PrimerScript RT reagent Kit（日本TaKaRa公司）、TB Green premix Ex Taq Ⅱ（日本TaKaRa公司），增强型CCK-8试剂盒（美国Apexbio公……